肥胖兒童胰島素抵抗與體脂、血脂及抵抗素、白細胞介素-6的關系.pdf

1、研究背景
　　 肥胖(obesity)是機體能量攝入超過消耗，多余的能量以脂肪形式貯存于組織，造成體內(nèi)脂肪堆積過多，體質(zhì)量超常的疾病。在全球呈流行態(tài)勢，且低齡化趨勢日益明顯，全球?qū)W前兒童超重及肥胖的發(fā)生率已從1990年的4.2％上升至2010年的6.7％;我國兒童肥胖亦呈日益增長趨勢，2000年我國7～22歲漢族城市男生、城市女生、鄉(xiāng)村男生、鄉(xiāng)村女生肥胖檢出率分別為4.37％、2.32％、1.46％和0.92％，而到2010年，

2、城鄉(xiāng)男女生肥胖檢出率分別上升至13.33％、5.64％、7.83％、3.78％。單純性肥胖占兒童肥胖的95％，由某種生活行為因素，如攝食過多、個人生活方式、缺乏運動等原因所致。兒童期肥胖不但影響生長發(fā)育，還與成年期代謝綜合征(MS)或稱胰島素抵抗綜合征(IRS)密切相關，既是MS的表現(xiàn)之一，又在MS的形成中起重要作用。非酒精性脂肪肝病(NAFLD)是由脂代謝紊亂造成的肝臟損傷，近期被認為是代謝綜合征的肝臟表現(xiàn)，胰島素抵抗是MS的病理基礎

3、。
　　 長期以來我國對兒童超重和肥胖的診斷標準采用人群中同年齡同性別體重或同性別身高別體重的均值，＞20％為肥胖。1995年世界衛(wèi)生組織(WHO)建議，對不同年齡段的兒童青少年采用不同指標判定超重與肥胖，體質(zhì)量指數(shù)[BMI，體重/身高2(kg/m2)]用于10～19歲青少年;身高別體重的Z評分值用于10歲以下兒童。國際肥胖專家工作組(IOTF)提出國際通用的兒童超重和肥胖的BMI診斷標準。中國肥胖問題工作組(WGOC)則于20

4、03年推薦制定了正常兒童的BMI百分位數(shù)，取P85、P95作為超重及肥胖的標準，適用于年齡7～18歲男女。2010年李輝等提出了與成年人界值點接軌的中國2～18歲兒童超重、肥胖篩查BMI界值點數(shù)據(jù)。一般認為BMI、腰圍(WC)、腰臀比(WHR)、腰圍身高比(WHtR)及皮下脂肪厚度可反映體脂狀況。
　　 胰島素抵抗(IR)是指正常血濃度的胰島素有效地促進外周葡萄糖攝取、抑制肝糖輸出和抑制極低密度脂蛋白(VLDL)輸出的能力受損。

5、通過胰島素和血糖水平來證實，常用的為穩(wěn)態(tài)模型胰島素抵抗(HOMA-IR)指數(shù)。一般認為肥胖兒童存在不同程度的IR現(xiàn)象，主要表現(xiàn)為高胰島素血癥。隨著對IR研究的不斷深入，肥胖與IR相關因素的探索已備受關注。目前的研究提出了一個新概念:脂肪組織是一個內(nèi)分泌器官，脂肪細胞在聯(lián)系Ⅱ型糖尿病(T2DM)、IR與肥胖中起關鍵作用，它分泌多種物質(zhì)，包括抵抗素及白介素(IL)-6等，可使外周組織出現(xiàn)IR。
　　 抵抗素是2001年由Steppa

6、n等首先報導的脂肪組織分泌的新多肽激素，相對分子質(zhì)量為12500，約由114個氨基酸組成，通常以二聚體的形式存在，其生理作用尚不完全明確。人抵抗素基因的編碼順序在第19對染色體。有研究顯示給小鼠腹腔內(nèi)注射抵抗素可使血糖水平升高，胰島素水平無顯著變化，而注射抵抗素抗體可使胰島素抵抗模型小鼠的血糖恢復到實驗前水平，且胰島素的敏感性也明顯升高，表明抵抗素具有胰島素抵抗作用。有認為抵抗素是一種聯(lián)系肥胖與IR的激素，但也有報道抵抗素在正常人、IR

7、或2型糖尿病人群中的表達并無不同。目前國內(nèi)外對抵抗素的研究局限于動物實驗、離體實驗以及基因方面，尚無大型的臨床研究，人抵抗素是否與IR確切關聯(lián)，抵抗素的信號轉(zhuǎn)導機制以及在代謝中的確切作用如何均是當前研究的焦點。
　　 IL-6是一種多效應細胞因子。脂肪組織是IL-6的主要分泌組織，脂肪細胞產(chǎn)生IL-6隨肥胖程度的增加而增加，肥胖患者血IL-6水平升高，體重下降后血IL-6水平隨之下降，血IL-6含量與IR顯著相關，與體重、BMI

8、、體脂含量呈正相關，與胰島素敏感性呈負相關。目前認為，血漿IL-6水平及脂肪細胞分泌IL-6的量與肥胖、IR及T2DM有密切關系，IL-6是肥胖相關的胰島素抵抗的主要因素。
　　 人的IL-6基因位于染色體7p15-21，長度約5kb，有5個外顯子和4個內(nèi)含子。其中啟動子區(qū)的-174G/C基因多態(tài)性和IR有關，研究發(fā)現(xiàn)IL-6不同位點基因型的分布和等位基因頻率在不同人種中相差很大，與年齡、性別及體重也有關系，但目前國內(nèi)尚缺乏兒童

9、肥胖與IL-6相關的資料，尤其是IL-6基因多態(tài)性。
　　 研究目的
　　 通過觀察單純性肥胖兒童的IR、BMI、WC、WHR、WHtR、血脂、血清抵抗素、IL-6的水平及IL-6的-174G/C基因多態(tài)性，并作多元相關性分析，以探討兒童肥胖胰島素抵抗與BMI、WHR、血脂、抵抗素、IL-6及其-174G/C基因多態(tài)性的關系。同時對并發(fā)NAFLD的肥胖兒童進行分析，探討NAFLD與胰島素抵抗、體脂、血脂的關系。
　

10、　 方法
　　 1、對象選擇2010年1月-2011年12月在深圳市婦幼保健院兒科內(nèi)分泌門診就診的單純性肥胖兒童90例（肥胖組），其中男56例，女34例;年齡2.5～14.3歲，平均（8.3±3.0）歲。經(jīng)體格檢查、腹部B超及內(nèi)分泌、肝、腎功能等檢查，排除了其他內(nèi)分泌病、遺傳代謝病及中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病引起的繼發(fā)性肥胖，身高在同年齡同性別組正常范圍內(nèi)。肥胖診斷標準為與成年人界值點接軌的中國2～18歲兒童超重、肥胖篩查BMI界值點法

11、。其中選45例檢測血抵抗素、IL-6及其-174G/C基因多態(tài)性，男25例、女20例，年齡2.5～14.3歲，平均年齡(7.2±2.8)歲。
　　 按照中華醫(yī)學會肝病學分會脂肪肝和酒精性肝病學組《非酒精性脂肪性肝病診療指南(2010年修訂版)》診斷肥胖NAFLD24例(NAFLD組)，占肥胖兒童的26.67％，男17例，女7例，年齡5.1～12.7歲，平均(9.1±2.0)歲;余66例為無NAFLD的單純性肥胖兒童（無NAFLD

12、組），男39例，女27例;年齡2.5～14.3歲，平均(8.1±3.2)歲。
　　 另選擇同期在本院體檢健康的兒童35例為健康對照組，體質(zhì)量均正常，無慢性疾病，檢查肝、腎功能均正常。男17例，女18例;年齡(4.2～12.5)歲，平均（7.8±2.6）歲。各組間年齡、性別均無統(tǒng)計學差異。
　　 2、體格指標測量對所有研究對象均記錄其性別、年齡，所有受試者于清晨8～9時空腹脫鞋帽，穿單衣，測量身高、體質(zhì)量、血壓、腰圍和臀圍

13、等，計算其BMI=體重(Kg)/身高2(m2)、WHR=腰圍(cm)/臀圍(cm)、WHtR=腰圍(cm)/身高(cm)。
　　 3、標本采集及實驗室檢測受試者均隔夜禁食后于清晨8～9時空腹抽取靜脈血4ml，分離血清后立即上機檢測血清胰島素(FINS)、糖(FBG)、膽固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)和ALT、AST等。FINS采用全自動螢光免疫分析系統(tǒng)測定，F(xiàn)B

14、G、TC、TG、HDL-C、LDL-C、ALT、AST采用全自動生化測定儀測定，以穩(wěn)態(tài)模型胰島素抵抗指數(shù)(HOMA-IR)公式計算IR值(IR=FINS×FBG/22.5)。酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)法測定血抵抗素、IL-6濃度。IL-6基因檢測:取靜脈血2ml，EDTA抗凝，酚氯仿法提取DNA，行聚合酶鏈式反應(PCR)擴增后采用雙去氧核糖核酸末端終止法行基因測序。
　　 4、統(tǒng)計學處理統(tǒng)計分析采用SPSS13.0軟體，檢

15、驗數(shù)據(jù)是否呈正態(tài)分布，偏態(tài)分布數(shù)據(jù)以中位數(shù)(P25，P75)表示，其他數(shù)據(jù)采用(X)±S表示;HOME-IR為非正態(tài)分布，轉(zhuǎn)換為自然對數(shù)按照正態(tài)分布比較。兩組比較:正態(tài)分布采用兩獨立樣本t檢驗（由于大部分醫(yī)學生理指標均為正態(tài)分布，本研究樣本量較小，雖然不滿足正態(tài)分布，血脂、血糖亦均視為正態(tài)分布），偏態(tài)分布資料用秩和檢驗;計數(shù)資料組間比較用x2檢驗，相關性分析采用偏相關分析，控制因素為年齡。三組比較:正態(tài)分布者采用單因素方差分析，兩兩比較

16、，方差齊者采用LSD檢驗法，方差不齊者采用WelchF檢驗法;偏態(tài)分布采用Kruskal-WallisH檢驗。BMI、WC、WHR、WHtR在診斷肥胖兒童NAFLD中的價值采用受試者工作特征(ROC)曲線分析。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。
　　 結果
　　 1、單純性肥胖組及健康對照組的性別、年齡無顯著性差異，x2/t=1.933、1.003,P=0.164、0.318;單純性肥胖組BMI、WHR、WC、WHtR分

17、別為24.97±3.77kg/m2，0.94±0.05,80.26±12.58cm,0.60±0.05，明顯高于健康對照組17.28±3.30kg/m2,0.83±0.02,58.55±10.38cm,0.45±0.04,t=10.588、9.078、17.355、14.722,P均=0.000，差異有統(tǒng)計學意義。
　　 2、單純性肥胖組及健康對照組兒童空腹血糖分別為4.95±0.63mmol/L，4.93±0.44mmol/L

18、,t=0.195,P=0.846，無顯著性差異;單純性肥胖組血FINS為108.48(66.05,140.57)pmol/L,Ln(IR)為3.08±0.56，明顯高于健康對照組的63.80(31.47,103.49)pmol/L和2.54±0.74,Z/t=-3.717、4.471，P均=0.000;單純性肥胖組血TC、TG和LDL-C分別為4.03±1.00mmol/L、1.41±0.80mmol/L，2.14±0.87mmol/L

19、,明顯高于健康對照組的3.55±0.82mmol/L、0.97±0.52mmol/L和1.71±0.43mmol/L,t=2.515、3.593、3.683,P=0.013、0.001、0.000，差異有統(tǒng)計學意義;兩組HDL-C無顯著差異，t=1.007,P=0.319。HOMA-IR值與BMI、WC、WHR、WHtR、血TG、LDL-C呈正相關，r分別=0.400、0.351、0.265、0.331、0.245、0.183，P分別=

20、0.000、0.000、0.003、0.000、0.006、0.042，有統(tǒng)計學意義。
　　 3、單純性肥胖組血清抵抗素濃度為27.76(17.35,53.23)ug/L，明顯高于健康對照組21.53(15.85,29.36)ug/L,Z=-2.076,P=0.038，有統(tǒng)計學意義。血抵抗素與HOMA-IR無相關性，r=0.180,P=0.112;與BMI、WC、WHR、WHtR、TG呈正相關，r=0.25、0.333、0.26

21、1、0.322、0.462,P=0.026、0.023、0.020、0.004、0.000。
　　 4、單純性肥胖兒童血清IL-6濃度為34.30(18.99,56.93)ng/L，明顯高于健康對照組兒童20.90(13.10,39.75)ng/L,Z=-2.633,P=0.008，差異有統(tǒng)計學意義。血IL-6與HOMA-IR無相關性，r=0.177,P=0.118;而與抵抗素、BMI、WC、WHR、WHtR、TG呈正相關，r=

22、0.504、0.260、0.413、0.231、0.387、0.248,P=0.000、0.021、0.000、0.041、0.000、0.028。對80例研究對象（單純性肥胖45例、健康兒童35例）IL-6的-174位點基因測序結果均為GG型，均未見到C基因型。
　　 5、BMI、WC、WHR、WHtR在NAFLD組明顯增高，分別為27.96±3.23kg/m2、90.08±8.84cm、0.97±0.04、0.63±0.05

23、，其次為無NAFLD組，分別為23.88±3.35kg/m2、76.69±11.85cm、0.93±0.05、0.58±0.05，健康對照組則為17.28±3.30kg/m2,58.55±10.38cm,0.83±0.02,0.45±0.04,F=81.023、62.927、180.418、142.072，P均=0.000，差異有統(tǒng)計學意義;三組血糖無明顯差異，F(xiàn)=0.405，P=0.668;FINS和Ln(IR)值以NAFLD組最高，

24、分別為137.30(99.11，141.97)pmol/L和3.29±0.44，其次為無NAFLD組，分別為98.47(61.15，134.92)pmol/L和3.00±0.58，健康對照組為63.80(31.47，103.49)pmol/L，2.54±0.74,H/F=17.810、11.776，P均為0.000(除NAFLD組和無NAFLD組Ln(IR)比較P＞0.05外），差異有統(tǒng)計學意義;血清TG、TC和LDL-C水平在NAFL

25、D組最高，分別為1.83±0.78mmol/L、4.44±0.99mmol/L、2.64±0.90mmol/L，其次為無NAFLD組，分別為1.25±0.76mmol/L、3.88±0.97mmol/L、1.95±0.79mmol/L，健康對照組為0.97±0.52mmol/L、3.55±0.82mmol/L、1.73±0.43mmol/L,F=10.862、5.844、11.684,P=0.000、0.004、0.000（除無NAFL

26、D組與健康對照組比較，P均＞0.05外），差異均有統(tǒng)計學意義。三組HDL-C無顯著差異，F(xiàn)=0.519，P=0.598。BMI、WC、WHR、WHtR診斷NAFLD的受試者工作特征(ROC)下曲線面積分別為0.872、0.882、0.847、0.862，均＞0.5，P均為0.000，其中WC的ROC曲線下面積最大，對NAFLD的診斷意義最大。
　　 結論
　　 單純性肥胖兒童存在胰島素抵抗現(xiàn)象;同時存在體質(zhì)量指數(shù)、腰圍、

27、腰臀比、腰圍身高比增高和血脂紊亂，主要是血TC和LDL-C升高;其血抵抗素、IL-6均明顯升高，兩者呈正相關，且均與BMI、WC、WHR、WHtR、TG正相關。肥胖兒童胰島素抵抗與BMI、WC、WHR、WHtR、血TG、LDL-C均呈正相關，但與血抵抗素、IL-6無相關。對IL-6的-174位點基因測序結果均為GG型，提示IL-6的-174G/C位點基因型可能與肥胖的發(fā)生無關。NAFLD發(fā)生與肥胖尤其是腹型肥胖、胰島素抵抗以及高TC、T