

版權說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權,請進行舉報或認領
文檔簡介
1、本文對糖尿病早期視網(wǎng)膜膠質(zhì)細胞病變及其對血視網(wǎng)膜屏障的影響進行了探討,主要內(nèi)容有: 1、STZ誘導糖尿病大鼠模型的建立及早期糖尿病大鼠視網(wǎng)膜GFAP和(3ccIudin表達的變化 目的:研究糖尿病時視網(wǎng)膜血管內(nèi)皮細胞緊密連接蛋白和膠質(zhì)細胞GFAP表達的改變。 方法:按60mg/kg一次性大鼠腹腔注射STZ,3d后測血糖¨.0mmo!A以上為造模成功。用免疫熒光法和免疫印跡法分別從形態(tài)學和定量上觀察糖尿病時視網(wǎng)膜血
2、管內(nèi)皮細胞0cciudin和膠質(zhì)細胞GFAP表達的改變. 結果:糖尿病2w時,視網(wǎng)膜星型膠質(zhì)細胞GFAP表達減少同時有Ⅵu¨er細胞GFAP表達增加。第12w時,星型膠質(zhì)細胞GFAP表達接近消失,而Müller細胞大量表達GFAP。Occludin在正常視網(wǎng)膜不同血管分布不同。在糖尿病時,Occludin在毛細血管表達減少,而在視網(wǎng)膜動脈則表現(xiàn)為顆粒狀沉積. 結論:糖尿病時.視網(wǎng)膜膠質(zhì)細胞GFAP表達的改變伴隨著血管內(nèi)皮
3、細胞Occludin表達的變化,說明膠質(zhì)細胞可能通過影響內(nèi)皮細胞間的相互作用來增加BRB的通透性,導致糖尿病視網(wǎng)膜病變發(fā)生。 2、新生大鼠視網(wǎng)膜MOiler細胞和新生牛視網(wǎng)膜血管內(nèi)皮細胞體外分離、培養(yǎng)及鑒定 目的:體外分離培養(yǎng)新生大鼠視網(wǎng)膜MOiler細胞和新生牛視網(wǎng)膜血管內(nèi)皮細胞(boveinretinalvascularendothelialcells,BREC),觀察其形態(tài)、結陶及生長情況. 方法:以酶輔助
4、顯微分離一酶消化法分離、單獨培養(yǎng)MOiler細胞和BREC.倒置相差顯微鏡觀察原代與傳代細胞生長情況,描記生長曲線.以脧質(zhì)細胞纖維酸性蛋白(glialfibrillaryacidicprotein,GFAP)抗體和VonWillebrand因子抗體分別對培養(yǎng)的Muller細咆和BREC進行免疫學鑒定.透射電鏡觀察細胞超微結構。 結果:體外成功培養(yǎng)出Müller細胞和BREC.GFAP抗體和VonWillebrand因子抗體染色均
5、為陽性,原代MOiler細胞呈星形、不覘則形,BREC呈多邊形、鋪路石樣,傳代細咆伸展更加明顯.呈密集單層生長。細胞生長曲線均接近“S”形。透射電鏡顯示均具有正常細胞器結陶。 結論:體外分離結合酶消化法培養(yǎng)大鼠Müller細胞及BREC.實驗方法操作簡便,獲得的細胞純度高,符合體內(nèi)生物學特性,為體外研究兩種細胞的相互作用打下良好的實驗基礎。 3、糖基化終末產(chǎn)物對體外培養(yǎng)Miiller細胞生長的影響 目的:探討體外
6、Mii}ler細胞在糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)作用下增殖活性的變化 方法:采用本實驗室培養(yǎng)及鑒定的新生大鼠Müller細胞,設置正常生長組和添加AGEs培養(yǎng)組,AGEs濃度在250ug/ml-1000ug/ml范圍內(nèi)逐步遞增。MTT法測定AGEs對體外純化培養(yǎng)g0[[er細胞增殖的影響。 結果:高濃度AGEs對Miiller細胞有明顯的促增殖作用,并在一定的濃度范圍內(nèi)(250ug/mi-1000ug/mi)細胞增殖活性呈
7、劑量依賴關系。 結論:體外高濃度AGEs可促進MUller細胞異常增殖,與臨床上觀察到增殖性糖尿病視網(wǎng)膜病變時膠質(zhì)細胞反應性增生情況一致,因此可以在體外用高濃度AGEs模擬體內(nèi)糖尿病環(huán)境,觀察脧質(zhì)細胞形態(tài)和功能的改變. 4、不同生長條件下Miiller細胞上清液對視網(wǎng)膜血管內(nèi)皮細胞生長的影響 目的:探討AGEs作用下異常增殖的Miiller細胞對視網(wǎng)膜血管內(nèi)皮細胞(REC)緊密連接蛋白(Occludin)表達的影
8、響。 方法:分別收集兩組細胞的上清液,加入培養(yǎng)的BREC中,分6組觀察。第①組未添加任何細胞上清液的BREC:第②組添加正常M[iller細胞上清液后的BREC:第③組添加AGEs作用后的Miiller細胞上清液后的BREC:第④組正常培養(yǎng)條件下的MUller細胞上清液:⑤AGEs作用后的Miiller細胞上清液;⑥無細胞組.為空白對照組,EL[SA法測定6組細胞上清液中Occludin的含量,比較其變化。 結果:添加正
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責。
- 6. 下載文件中如有侵權或不適當內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 糖尿病視網(wǎng)膜病變血視網(wǎng)膜內(nèi)屏障功能保護的研究.pdf
- ADMA在糖尿病視網(wǎng)膜病變早期——視網(wǎng)膜屏障損傷中的作用及機制.pdf
- 糖尿病視網(wǎng)膜病變
- 聯(lián)合脂肪間充質(zhì)干細胞移植對糖尿病視網(wǎng)膜病變大鼠血-視網(wǎng)膜屏障的影響.pdf
- 視網(wǎng)膜Muller細胞在早期糖尿病視網(wǎng)膜病變中作用的研究.pdf
- 糖尿病視網(wǎng)膜病變介紹
- 糖尿病視網(wǎng)膜病變宣教
- 絡通對糖尿病大鼠早期視網(wǎng)膜病變的影響.pdf
- 糖尿病性視網(wǎng)膜病變
- 從視網(wǎng)膜圖像到糖尿病視網(wǎng)膜病變診斷.pdf
- 糖尿病視網(wǎng)膜病變的護理
- 視網(wǎng)膜小膠質(zhì)細胞在糖尿病大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)病變中的作用研究.pdf
- 活化的小膠質(zhì)細胞對血視網(wǎng)膜屏障的影響.pdf
- 糖尿病視網(wǎng)膜病變早期干預的療效評價
- 促紅細胞生成素對糖尿病視網(wǎng)膜病變中血—視網(wǎng)膜屏障的保護作用機制研究.pdf
- 糖尿病視網(wǎng)膜病變多焦視網(wǎng)膜電流圖研究.pdf
- 紅參對糖尿病大鼠視網(wǎng)膜病變的影響.pdf
- Netrin-1對早期糖尿病視網(wǎng)膜病變大鼠視網(wǎng)膜血管通透性的影響.pdf
- 糖尿病視網(wǎng)膜病變視網(wǎng)膜光凝損傷的臨床觀察.pdf
- 糖尿病視網(wǎng)膜病變患者血清OX-LDL與LPa的表達對早期診斷糖尿病視網(wǎng)膜病變的意義.pdf
評論
0/150
提交評論