根瘤農桿菌介導的胡蘿卜愈傷組織細胞表達人干擾素α-2b的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的：將人干擾素α-2b(human interferonα-2b,hIFNα-2b)基因導入胡蘿卜愈傷組織細胞，探討植物細胞表達hIFNα-2b的可行性。
　　方法：將已構建成功并保存于大腸桿菌DH5α中的人干擾素α-2b基因植物雙元表達載體pBI121-hIFNα-2b以凍融法轉化根瘤農桿菌LBA4404感受態(tài)細胞，經過卡那霉素和利福霉素的雙重篩選，選出陽性菌落，并經PCR鑒定質粒成功轉化。利用植物離體培養(yǎng)技術培養(yǎng)胡蘿卜愈傷組

2、織細胞，并通過根瘤農桿菌介導的遺傳轉化法，用含有質粒 pBI121-hIFNα-2b的農桿菌感染胡蘿卜愈傷組織細胞，經卡那霉素和頭孢霉素雙重篩選，選出轉基因陽性細胞。利用RT-PCR、Western Blotting檢測陽性細胞中hIFNα-2b基因的表達產物。
　　結果：經RT-PCR與Western Blotting檢測，轉基因陽性細胞中存在hIFNα-2b基因的表達產物。
　　結論：本研究成功將hIFNα-2b基因導入

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