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1、在臨床上,胸腺素α1和干擾素α-2b聯(lián)合使用,在治療多種病毒性疾病以及腫瘤中得到了廣泛的應(yīng)用.由于胸腺素α 1和干擾素α-2b在功能上具有相互促進的作用,它們的融合可能產(chǎn)生一種具有雙重活性,或者高于原來各自活性的高活性重組蛋白.基于這些認(rèn)識,我們嘗試了采用基因工程的方法構(gòu)建胸腺素α 1/干擾素α-2b融合蛋白,并對其生物學(xué)活性進行了初步的研究.使用大腸桿菌偏愛的密碼子對胸腺素α 1基因進行了優(yōu)化設(shè)計,用嵌套式PCR方法得到了干擾素α-2
2、b基因,將兩個基因用具有高度柔性的Gly-Ala-Ala-Ala-Gly連接肽的編碼序列連接起來,克隆到表達(dá)載體中.測序結(jié)果表明,構(gòu)建的表達(dá)載體中的外源基因的序列與理論設(shè)計的基因序列完全一致.融合蛋白基因在大腸桿菌中得到了高效表達(dá),表達(dá)產(chǎn)物以包涵體形式存在.包涵體蛋白經(jīng)過強陰離子交換柱Q Sepharose H.P.柱層析和Sephacryl S-200分子篩柱純化、透析復(fù)性、EK酶酶切、Sephacryl S-200分子篩柱再純化,獲
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