消脂方治療非酒精性脂肪性肝病的藥效學(xué)及機(jī)制研究.pdf

1、目的:觀察消脂方對非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)模型大鼠的治療作用，并探討其機(jī)制。進(jìn)一步研究消脂方含藥血清對3T3-L1前脂肪細(xì)胞的誘導(dǎo)分化作用及機(jī)制。
　　方法:62只雄性SPF級SD大鼠，隨機(jī)分為造模組（51只）和正常組（11只）。采用高脂飲食法復(fù)制大鼠NAFLD模型，造模成功后隨機(jī)均勻分為模型組、非諾貝特組(0.05g·kg-1·d-1)、消脂方組(42.5 g·kg-1·d-1、21.5 g·kg-1·d-1、10.6

2、g·kg-1·d-1)。消脂方組和非諾貝特組灌喂相應(yīng)藥物，正常組和模型組灌喂等體積生理鹽水。4周后處死動物，全自動生化儀檢測空腹血糖(FBG)、總膽固醇(TG)、甘油三酯(TC)、丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(AST)、谷氨酰胺轉(zhuǎn)肽酶(GGT)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、游離脂肪酸(FFA)，酶聯(lián)免疫法檢測脂聯(lián)素(Adiponectin)，放射免疫法檢測胰島素(INS)，計算胰島素抵抗指數(shù)(HOMAR-IR)

3、，HE染色和油紅O染色觀察肝臟病理變化。RT-PCR方法檢測肝組織過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPARα)、固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白(SREBP1c)和腫瘤壞死因子α（TNFα）mRNA的表達(dá)水平;Western blot方法檢測肝組織PPARα、SREBP1c和TNFα蛋白的表達(dá)水平。采用不同濃度的消脂方含藥血清作用于小鼠3T3-L1前脂肪細(xì)胞，用細(xì)胞增殖與活性檢測試劑盒（CCK-8）檢測其對3T3-L1前脂肪細(xì)胞增殖的影響;油紅O染色

4、及分光光度法分析脂肪細(xì)胞的分化程度;RT-PCR法檢測PPARα mRNA和肝X受體α(LXRα)mRNA表達(dá)水平情況。
　　結(jié)果:與模型組比較，各治療組肝臟脂肪蓄積及炎癥減輕，血脂、肝功、肝脂、FFA、FINS、HOMAR-IR、MDA、SREBP1c和TNFα mRNA及蛋白表達(dá)水平顯著降低，以消脂湯高劑量組尤為顯著; SOD含量、PPARα mRNA及蛋白顯著升高。消脂方10％含藥血清對3T3-L1細(xì)胞增殖無顯著性影響，但可

5、顯著抑制3T3-L1前脂肪細(xì)胞向成熟脂肪細(xì)胞分化，且有一定劑量依賴關(guān)系;與空白對照組比較，消脂方10％含藥血清可顯著降低PPARα mRNA及LXRα mRNA表達(dá)水平。
　　結(jié)論:消脂方能顯著改善NAFLD的胰島素抵抗和氧化應(yīng)激，減輕肝臟脂肪蓄積和炎癥反應(yīng)，上調(diào)PPARα和下調(diào)SREBP1c、TNFα mRNA及蛋白表達(dá)是其減輕肝臟脂肪蓄積的可能機(jī)制。消脂方10％含藥血清能顯著抑制3T3-L1前脂肪細(xì)胞的分化，其機(jī)制可能與其能抑