新型水溶性光敏劑的評(píng)價(jià)和機(jī)制研究.pdf

1、一、新型水溶性卟啉類光敏劑A1抗腫瘤作用及其機(jī)制研究
　　 具有優(yōu)良的物理化學(xué)性質(zhì)的光敏劑的研究是目前PDT治療中的關(guān)鍵問(wèn)題。本實(shí)驗(yàn)室合成的光敏劑A1具有很多優(yōu)點(diǎn)：如合成方法簡(jiǎn)單，結(jié)構(gòu)單一，較好的水溶性，較好的光穩(wěn)定性、在650nm處可以激發(fā)等。前期研究表明A1體外具有很好的PDT療效，本文在此基礎(chǔ)上進(jìn)一步研究了A1的抗腫瘤作用及其作用機(jī)制。體外MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明單純給藥或光照對(duì)腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)無(wú)或很小影響，而光照下A1-PDT能

2、明顯抑制多種人類腫瘤細(xì)胞，說(shuō)明A1-PDT在體外具有抗腫瘤作用。A1的亞細(xì)胞定位與細(xì)胞緊密相關(guān)。激光共聚焦顯微鏡顯示化合物A1主要定位在腫瘤細(xì)胞的溶酶體中，但是在A549和DU145細(xì)胞在細(xì)胞的線粒體中也有一定聚集，說(shuō)明光敏劑A1發(fā)揮光化學(xué)反應(yīng)以及其損傷的首要細(xì)胞器為溶酶體。與此對(duì)應(yīng)，A1-PDT引發(fā)的細(xì)胞死亡因細(xì)胞而異：流式細(xì)胞儀檢測(cè)發(fā)現(xiàn)A1-PDT可以誘導(dǎo)人黑色素瘤細(xì)胞A375產(chǎn)生凋亡，并且有較好的劑量依賴性，而對(duì)人前列腺癌DU-1

3、45只引起了少量凋亡，同時(shí)A1-PDT可以誘導(dǎo)人前列腺癌DU-145細(xì)胞產(chǎn)生大量的自噬泡。上述結(jié)果表明A1-PDT可以通過(guò)自噬途徑或凋亡途徑誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞死亡，因細(xì)胞而異。體內(nèi)荷瘤鼠實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ妥C明A1在給藥后18-24小時(shí)腫瘤的內(nèi)的藥物含量達(dá)到高峰。A1-PDT可以抑制小鼠肝癌H-22，人肺癌A549，人黑色素瘤A375和人肝癌Hepg2生長(zhǎng)，且局部瘤內(nèi)給藥模式抑制作用最強(qiáng)，說(shuō)明A1-PDT在體內(nèi)仍具有很好的抗腫瘤活性。
　　 二、

4、新型水溶性卟啉類光敏劑A1-光動(dòng)力學(xué)對(duì)大鼠前列腺增生影響及機(jī)制初步研究
　　 良性前列腺增生也稱前列腺肥大，是中老年男性的常見(jiàn)病。微創(chuàng)的介入治療已成為臨床治療BPH的首選。光動(dòng)力療法的優(yōu)點(diǎn)是毒性小、收效快、靶向性強(qiáng)，在殺傷增殖細(xì)胞的同時(shí)不危及正常組織。同時(shí)，PDT操作簡(jiǎn)便、損傷副作用小、可反復(fù)進(jìn)行，對(duì)一些年老體弱、全身狀況差的患者也可治療，由于具有上述優(yōu)點(diǎn)，PDT的應(yīng)用范圍正被推廣到更多的良性疾病中去。我們探索了A1-PDT在治

5、療前列腺肥大方面的應(yīng)用。結(jié)果表明A1-PDT顯著抑制大鼠BPH中前列腺的增生，同時(shí)不會(huì)損傷到比鄰的組織（結(jié)直腸和膀胱組織）。機(jī)制研究顯示：A1-PDT可以抑制VEGF和bFGF兩種重要的多肽生長(zhǎng)因子在BPH中的表達(dá)，同時(shí)上調(diào)凋亡基因BAX的表達(dá)促進(jìn)BPH中細(xì)胞發(fā)生凋亡進(jìn)而抑制前列腺的組織的增殖。
　　 三、水溶性糖酞菁光敏劑篩選、構(gòu)效關(guān)系研究及其機(jī)制研究
　　 酞菁類作為光敏劑具有其特有的優(yōu)勢(shì)但是酞菁水溶性差的缺點(diǎn)嚴(yán)重的

6、限制了其使用。本研究中我們利用半乳糖作為修飾集團(tuán)，來(lái)改善酞菁的水溶性和其生物相容性，并對(duì)其構(gòu)效關(guān)系進(jìn)行了研究。結(jié)果表明，以半乳糖修飾的酞菁具有較好的水溶性，且伴隨取代糖數(shù)目的增加酞菁化合物的水溶性增加，化合物單線態(tài)氧的產(chǎn)率下降?；衔锞哂休^緩慢的光漂白率，其中T4的光漂白率最低。對(duì)于1-3個(gè)半乳糖修飾的酞菁化合物T1，T2，T3在治療范圍內(nèi)對(duì)腫瘤細(xì)胞無(wú)明顯細(xì)胞毒性而在光照下它們能顯著抑制多種腫瘤細(xì)胞的增殖。細(xì)胞定位實(shí)驗(yàn)表明該類化合物的

7、細(xì)胞定位與化合物結(jié)構(gòu)及細(xì)胞種類密切相關(guān)：T1，T2主要聚集在HepG2細(xì)胞的線粒體內(nèi)，溶酶體僅有少量進(jìn)入；而T3主要聚集在HepG2細(xì)胞的溶酶體內(nèi)，線粒體僅有少量進(jìn)入；T1，T2，T3在人黑色素瘤A375中的亞細(xì)胞定位與HepG2細(xì)胞相似；T1，T2，T3在人肺癌A549中T2和T3在線粒體和溶酶體均有較強(qiáng)的進(jìn)入?；衔颰1，T2-PDT可以降低線粒體的膜電位，并可以誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生凋亡。T3-PDT可以誘導(dǎo)人肺癌A549細(xì)胞產(chǎn)生大量的