不同運動負荷所致大鼠關(guān)節(jié)軟骨和滑膜中comp表達的改變及其臨床意義的研究.pdf

1、背景
　　 隨著社會的進步,越來越多的人開始喜愛運動,人們開始注意運動與骨性關(guān)節(jié)炎(OA)是否有劑量效應(yīng)關(guān)系。長距離耐力跑(馬拉松)是相對安全的運動方式,但高強度重復(fù)、過度使用關(guān)節(jié),會減少關(guān)節(jié)糖蛋白的潤滑作用,破壞膠原,慢慢地磨損軟骨,引起在軟骨下骨的很多微骨折。OA的病變主要為關(guān)節(jié)軟骨的退行性改變和滑膜病變,進而導(dǎo)致關(guān)節(jié)軟骨損傷、破壞、關(guān)節(jié)邊緣和軟骨下骨反應(yīng)性增生,骨贅形成。軟骨由軟骨細胞、基質(zhì)、水分構(gòu)成。目前有多種生物標記物

2、能達到早期診斷OA的目的,其中comp(軟骨寡聚基質(zhì)蛋白)是比較新的標記物,能反映關(guān)節(jié)軟骨破壞的程度和軟骨的丟失。
　　 本研究擬通過建立不同強度的運動負荷模型,檢測其軟骨,滑膜中comp表達的改變,來建立運動強度與OA的發(fā)生的聯(lián)系。
　　 目的
　　 1、通過各部位的生物標記物水平能明確何種運動強度及周期會引起關(guān)節(jié)軟骨退變。
　　 2、能通過檢測生物標記物來早期診斷并預(yù)防運動所帶來的軟骨病變。
　

3、　 方法
　　 第一部分:大鼠不同強度運動模型的制作:實驗對象為清潔級3月齡雄性S-D大鼠60只(經(jīng)一周跑臺適應(yīng)訓(xùn)練篩選后選擇的),運動強度參照Bedford的動物負荷模型。建立中等,高等強度各20只,空白對照20只。制作動物3跑道跑臺,各級速度分別為18,30m/min,各級每天運動時間30,60min,空白對照籠中自由活動。
　　 第二部分:從訓(xùn)練后的4周、12周、20周取材。每次分別在各組隨機選取5只處死.取其軟

4、骨,滑膜。處死動物后,剝離膝關(guān)節(jié)周圍軟組織,咬骨鉗取下關(guān)節(jié)軟骨,10%EDTA脫鈣4周后,脫水,固定,制作石蠟切片,進行HE染色,觀察基本形態(tài),免疫組化,免疫熒光測定comp,圖像分析系統(tǒng)進行密度分析并采集圖片。取下膝關(guān)節(jié)周圍貼近關(guān)節(jié)的滑膜,脫水,固定,制作石蠟切片,進行HE染色,觀察基本形態(tài),免疫組化,免疫熒光測定comp,圖像分析系統(tǒng)進行密度分析并采集圖片。對收集的數(shù)據(jù)進行分析,建立起生物標記物與不同強度,不同周期的軟骨退變水平的關(guān)

5、系。
　　 結(jié)果
　　 高強度運動,能引起comp增多,關(guān)節(jié)軟骨丟失。長期高等強度會造成軟骨退變,與OA相關(guān)聯(lián)。中等強度運動會增加軟骨基質(zhì)含量,對軟骨功能有益。運動與OA有一定的劑量-效應(yīng)關(guān)系。我們可以通過測定comp的含量來對軟骨損傷進行評估,及時調(diào)節(jié)運動員的訓(xùn)練強度。
　　 結(jié)論
　　 不同強度運動與OA有劑量效應(yīng)關(guān)系,長期高等強度運動會導(dǎo)致關(guān)節(jié)軟骨和滑膜中comp增多,軟骨結(jié)構(gòu)破壞,引起關(guān)節(jié)退變。<