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文檔簡介
1、目的:建立大鼠重癥急性胰腺炎(SAP)模型,動態(tài)觀察SAP胰腺、腎臟組織病理變化,觀察胰腺、腎臟組織SOD、MDA含量變化、NF-κB表達情況及血清細胞因子水平變化。采用依達拉奉干預SAP大鼠,探討依達拉奉對SAP胰腺及腎損傷氧自由基、細胞因子的影響及可能機制。
方法:60只健康成年雄性SD大鼠,隨機分成:對照組(C組)、重癥急性胰腺炎組(S組)、依達拉奉治療組(T組),各組再按術后6、12小時時間段隨機分為2個亞組。重癥急性
2、胰腺炎組以5%?;悄懰徕c(0.1ml/100g體重)逆行胰膽管注射制作重癥急性胰腺炎模型。依達拉奉治療組為制模后立即于鼠尾靜脈注射依達拉奉(3mg/kg),重癥急性胰腺炎組制模后立即鼠尾靜脈注射等量生理鹽水,對照組開腹后僅翻動十二指腸,其余步驟同重癥急性胰腺炎組。于術后6h、12h處死各組大鼠,肉眼觀察胰腺和腎臟大體改變情況。采集血液標本,全自動化分析儀測定血淀粉酶(AMY)、尿素氮(BUN)及肌酐(Cr),酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA
3、)法檢測血清中腫瘤壞死因子-α( TNF-α)、白細胞介素-6(IL-6)水平。留取胰腺和腎臟組織標本,采用黃嘌呤氧化酶法檢測超氧化物歧化酶(SOD)活性,硫代巴比妥酸比色分析法測定組織丙二醛(MDA)含量,HE染色觀察胰腺及腎臟組織病理變化,免疫組化法檢測胰腺和腎臟核因子-κB p65(NF-κB p65)表達情況。采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件建立數據資料,均數比較用完全隨機設計資料的方差分析和相關分析進行統(tǒng)計分析,以-X±SD表示,
4、P<0.05有統(tǒng)計學意義。
結果:⑴光鏡下觀察:C組胰腺及腎臟標本均未見明顯病理改變;S組胰腺標本可見不同程度壞死,間質充血、水腫,炎細胞浸潤;腎臟標本可見腎小球瘀血,腎小管腫脹,腎小管腔內有壞死組織和管型,間質內可見出血和炎細胞浸潤。且隨時間延長,胰腺及腎臟的各種病理表現呈加重趨勢;T組上述病變較S組減輕。⑵S組與C組比較,各時間段(術后6h、12h)血清AMS、BUN、Cr、TNF-α、IL-6水平均顯著升高(P<0.01
5、),胰腎組織MDA均顯著升高(P<0.01),胰腎組織SOD均顯著降低(P<0.01),胰腺和腎臟組織病理學評分均顯著增加(P<0.01)。S組胰腺和腎臟組織病理學評分隨時間延長而顯著增加(P<0.01)。⑶C組胰腎組織NF-κB p65微量表達,而S組表達顯著上調(P<0.01),S組胰腎組織NF-κB p65表達隨時間延長而上調(P<0.01)。⑷pearson相關分析顯示:S組大鼠胰腎組織MDA水平與胰腎組織病理學評分及NF-κB
6、 p65表達呈正相關分別為(r=0.910、P<0.01,r=0.923、P<0.01;r=0.850、P<0.01,r=0.885、P<0.01);S組大鼠胰腎組織SOD活性與胰腎組織病理學評分及 NF-κB p65表達呈負相關分別為(r=-0.891、P<0.01,r=-0.883、P<0.01;r=-0.865、P<0.01,r=-0.841、P<0.01);胰腺組織病理學評分與腎臟組織病理學評分呈正相關(r=0.952,P<0.
7、01);S組大鼠胰腎組織NF-κB p65表達與TNF-α、IL-6呈正相關分別為(r=0.859、P<0.01,r=0.932、P<0.01;r=0.874、P<0.01,r=0.842、P<0.01)。⑸與S組比較,T組各時間段血清AMS、BUN、Cr、TNF-α、IL-6水平均顯著降低(P<0.01),胰腎組織 SOD均顯著升高(P<0.01),胰腎組織 MDA均顯著降低(P<0.01),胰腺和腎臟組織病理學評分及NF-κB p6
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