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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:建立大鼠重癥急性胰腺炎(SAP)模型,動(dòng)態(tài)觀察SAP胰腺、腎臟組織病理變化,觀察胰腺、腎臟組織SOD、MDA含量變化、NF-κB表達(dá)情況及血清細(xì)胞因子水平變化。采用依達(dá)拉奉干預(yù)SAP大鼠,探討依達(dá)拉奉對(duì)SAP胰腺及腎損傷氧自由基、細(xì)胞因子的影響及可能機(jī)制。
方法:60只健康成年雄性SD大鼠,隨機(jī)分成:對(duì)照組(C組)、重癥急性胰腺炎組(S組)、依達(dá)拉奉治療組(T組),各組再按術(shù)后6、12小時(shí)時(shí)間段隨機(jī)分為2個(gè)亞組。重癥急性
2、胰腺炎組以5%牛磺膽酸鈉(0.1ml/100g體重)逆行胰膽管注射制作重癥急性胰腺炎模型。依達(dá)拉奉治療組為制模后立即于鼠尾靜脈注射依達(dá)拉奉(3mg/kg),重癥急性胰腺炎組制模后立即鼠尾靜脈注射等量生理鹽水,對(duì)照組開腹后僅翻動(dòng)十二指腸,其余步驟同重癥急性胰腺炎組。于術(shù)后6h、12h處死各組大鼠,肉眼觀察胰腺和腎臟大體改變情況。采集血液標(biāo)本,全自動(dòng)化分析儀測(cè)定血淀粉酶(AMY)、尿素氮(BUN)及肌酐(Cr),酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA
3、)法檢測(cè)血清中腫瘤壞死因子-α( TNF-α)、白細(xì)胞介素-6(IL-6)水平。留取胰腺和腎臟組織標(biāo)本,采用黃嘌呤氧化酶法檢測(cè)超氧化物歧化酶(SOD)活性,硫代巴比妥酸比色分析法測(cè)定組織丙二醛(MDA)含量,HE染色觀察胰腺及腎臟組織病理變化,免疫組化法檢測(cè)胰腺和腎臟核因子-κB p65(NF-κB p65)表達(dá)情況。采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件建立數(shù)據(jù)資料,均數(shù)比較用完全隨機(jī)設(shè)計(jì)資料的方差分析和相關(guān)分析進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,以-X±SD表示,
4、P<0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
結(jié)果:⑴光鏡下觀察:C組胰腺及腎臟標(biāo)本均未見明顯病理改變;S組胰腺標(biāo)本可見不同程度壞死,間質(zhì)充血、水腫,炎細(xì)胞浸潤(rùn);腎臟標(biāo)本可見腎小球瘀血,腎小管腫脹,腎小管腔內(nèi)有壞死組織和管型,間質(zhì)內(nèi)可見出血和炎細(xì)胞浸潤(rùn)。且隨時(shí)間延長(zhǎng),胰腺及腎臟的各種病理表現(xiàn)呈加重趨勢(shì);T組上述病變較S組減輕。⑵S組與C組比較,各時(shí)間段(術(shù)后6h、12h)血清AMS、BUN、Cr、TNF-α、IL-6水平均顯著升高(P<0.01
5、),胰腎組織MDA均顯著升高(P<0.01),胰腎組織SOD均顯著降低(P<0.01),胰腺和腎臟組織病理學(xué)評(píng)分均顯著增加(P<0.01)。S組胰腺和腎臟組織病理學(xué)評(píng)分隨時(shí)間延長(zhǎng)而顯著增加(P<0.01)。⑶C組胰腎組織NF-κB p65微量表達(dá),而S組表達(dá)顯著上調(diào)(P<0.01),S組胰腎組織NF-κB p65表達(dá)隨時(shí)間延長(zhǎng)而上調(diào)(P<0.01)。⑷pearson相關(guān)分析顯示:S組大鼠胰腎組織MDA水平與胰腎組織病理學(xué)評(píng)分及NF-κB
6、 p65表達(dá)呈正相關(guān)分別為(r=0.910、P<0.01,r=0.923、P<0.01;r=0.850、P<0.01,r=0.885、P<0.01);S組大鼠胰腎組織SOD活性與胰腎組織病理學(xué)評(píng)分及 NF-κB p65表達(dá)呈負(fù)相關(guān)分別為(r=-0.891、P<0.01,r=-0.883、P<0.01;r=-0.865、P<0.01,r=-0.841、P<0.01);胰腺組織病理學(xué)評(píng)分與腎臟組織病理學(xué)評(píng)分呈正相關(guān)(r=0.952,P<0.
7、01);S組大鼠胰腎組織NF-κB p65表達(dá)與TNF-α、IL-6呈正相關(guān)分別為(r=0.859、P<0.01,r=0.932、P<0.01;r=0.874、P<0.01,r=0.842、P<0.01)。⑸與S組比較,T組各時(shí)間段血清AMS、BUN、Cr、TNF-α、IL-6水平均顯著降低(P<0.01),胰腎組織 SOD均顯著升高(P<0.01),胰腎組織 MDA均顯著降低(P<0.01),胰腺和腎臟組織病理學(xué)評(píng)分及NF-κB p6
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