反復(fù)流產(chǎn)患者絨毛、蛻膜、血清中血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）的表達(dá)及絨毛超微結(jié)構(gòu)的研究.pdf

1、目的：反復(fù)自然流產(chǎn)(RSA)是妊娠早期最常見的并發(fā)癥之一，一般是指一對夫婦發(fā)生兩次或兩次以上的流產(chǎn)。文獻(xiàn)報導(dǎo)發(fā)生率為0.4-1.0％，占所有妊娠丟失的15-20％，據(jù)報道國外不明原因的反復(fù)流產(chǎn)約為50％，國內(nèi)約為50-75％。給患者及家庭造成了心理創(chuàng)傷和經(jīng)濟負(fù)擔(dān)。不明原區(qū) RSA發(fā)病的病因及機制是目前研究的熱點。血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)是一種作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞的多功能因子，具有強大的促血管生成作用。在人體代謝旺盛的組織如胚胎組織、胎

2、盤、增生期子宮內(nèi)膜、黃體等，VEGF常高水平表達(dá)，以滿足生長發(fā)育的需要。VEGF功能異常、表達(dá)缺乏，可引起胚胎種植、胎盤形成障礙等，是造成自發(fā)流產(chǎn)的重要原因之一。有報道顯示RSA患者血清和蛻膜組織中VEGF及受體表達(dá)低于正常妊娠者，可致血管生成不足而引發(fā)流產(chǎn)。另有研究發(fā)現(xiàn)RSA患者血清VEGF的含量明顯高于正常對照組，認(rèn)為由于VEGF的異常增高可致流產(chǎn)。而H前尚沒有研究其早期絨毛中VEGF的表達(dá)及其與血清中VEGF水平的相互關(guān)系。本研究

3、目的通過測定反復(fù)自然流產(chǎn)忠者絨毛、蛻膜及血清中VEGF的表達(dá)，觀察其絨毛的超微結(jié)構(gòu)，并與正常人工流產(chǎn)組(對照組)進(jìn)行比較，探討不明原因反復(fù)流產(chǎn)患者的流產(chǎn)病因及發(fā)生機制。 方法：選擇2006年3月.2006年12月在河北醫(yī)科人學(xué)第二醫(yī)院生殖醫(yī)學(xué)科門診就診的20-35歲反復(fù)流產(chǎn)患者24例為實驗組。病例選擇條件：發(fā)生過二次或二次以上自然流產(chǎn)；孕周<12周；無其他急、慢性病史；排除：1、染色體異常；2、內(nèi)分泌異常；3、子宮畸形；4、血

4、栓形成傾向；5、免疫因素；6、感染因素。隨機選取同期在河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院婦產(chǎn)科要求人工流產(chǎn)的孕周<12周，年齡在20-35歲正常女性20例為對照組。所有研究對象于行人工流產(chǎn)術(shù)前抽取外周肘靜脈血，分離血清后，凍存于-20℃冰箱內(nèi)待測VEGF。人工流產(chǎn)術(shù)后所得絨毛及蛻膜組織用生理鹽水沖洗后，部分絨毛立即放入2.5％戊二醛液中固定，常規(guī)脫水、干燥鍍膜，掃描電鏡(日本JSM-5600LV)觀察絨毛的超微結(jié)構(gòu)；部分絨毛及蛻膜立即放入4％多聚甲醛

5、液中固定，常規(guī)脫水、石蠟包埋、統(tǒng)一切片，HE、免疫組織化學(xué)染色，觀察結(jié)果(采用4級半定量積分法進(jìn)行結(jié)果判定)。 結(jié)果： 1 年齡、妊娠天數(shù)、孕囊直徑的比較：實驗組與對照糾.平均年齡分別為29.1±4.0歲、26.7±4.3歲；妊娠天數(shù)分別為63.6土12.4天、56.2±19.8天；孕囊直徑分別為25.72±11.82mm、26.10土10.82 mm；比較無統(tǒng)計學(xué)意義(p>0.05)。 2 血清VEGF水平的

6、比較：實驗組與對照組平均血清VEGF分別為106.32±17.26pg/ml、88.26±10.15 pg/ml。RSA組高于正常對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.01)。 3 VEGF在絨毛中的表達(dá)結(jié)果： 絨毛中VEGF陽性表達(dá)主要定位于胞漿，呈棕黃色顆粒或線狀，同時有少量細(xì)胞膜及細(xì)胞間質(zhì)著色。正常絨毛組織滋養(yǎng)細(xì)胞著色呈細(xì)小均勻的淺黃色：RSA組滋養(yǎng)細(xì)胞著色較深(圖1、2)。RSA組絨毛中VEGF的表達(dá)高于對照組，

7、差異有顯著性(u=3.243，p<0.01)。 4 VEGF在蛻膜中的表達(dá)結(jié)果： RSA組與對照組蛻膜中VEGF的表達(dá)無顯著性差異(u=0.5766，p>0.05)。 5 血清VEGF與絨毛中VEGF的表達(dá)的相關(guān)性：實驗組和對照組血清VEGF水平與絨毛VEGF的表達(dá)存在線性相關(guān)關(guān)系(r<,1>=0.8477，p<,1><0.05；r<,2>=0.7463 p<,2><0.05)。 6 血清VEGF與蛻

8、膜中VEGF的表達(dá)的相關(guān)性：實驗組和對照組血清VEGF水平與蛻膜VEGF的表達(dá)不存在線性相關(guān)關(guān)系(r<,1>=0.2820，p<,1>>0.05；r<,2>=0.2879，p<,2>>0.05)。 7 絨毛超微結(jié)構(gòu)的觀察：對照組絨毛組織的微絨毛呈毛絨樣，其粗細(xì)均勻、長度一致，排列有序，個體問微絨毛形態(tài)，如粗細(xì)、長度及表面結(jié)構(gòu)等略有差別。RSA實驗組絨毛組織的微絨毛數(shù)量明顯減少，分布不均勻，部分區(qū)域微絨毛稀少，甚至消失；微絨毛排

9、列不整齊、形態(tài)不規(guī)則，微絨毛增粗、變短、末端圓鈍，有水腫、斷裂的現(xiàn)象；局部粘連密度增高，反光增強。 結(jié)論： 1 RSA患者血清VEGF水平及絨毛組織中VEGF的表達(dá)高于對照組，差異有顯著性。RSA組與對照組蛻膜組織中VEGF表達(dá)無顯著性差異。血清VEGF水平與絨毛組織VEGF的表達(dá)存在直線相關(guān)關(guān)系；血清VEGF水平與蛻膜組織VEGF的表達(dá)不存在線性相關(guān)關(guān)系。提示RSA的發(fā)生可能與患者血清VEGF水平和妊娠絨毛組織中VE