HGF及VEGF在復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者絨毛和蛻膜中的表達.pdf

1、目的:反復(fù)自然流產(chǎn)(recurrent spontaneous abortion,RSA)是指與同一性伴侶連續(xù)發(fā)生3次或3次以上自然流產(chǎn)。RSA是妊娠常見的并發(fā)癥之一。據(jù)文獻報道,RSA占總?cè)焉锏?％左右[1],占早期自然流產(chǎn)的15％-20％。由于RSA基本為在妊娠早期發(fā)生反復(fù)性的流產(chǎn),且多發(fā)生于相同的妊娠月份,對患者身心及其家庭都帶來了嚴(yán)重的影響。另外多次流產(chǎn)還存在繼發(fā)不孕的可能性。RSA的病因除已知因素外,目前仍有超過50％原因不明

2、[1]。因此對不明原因的RSA病因及其機制的研究也成為了國內(nèi)外的熱點。肝細胞生長因子(Hepatocyte growth factor,HGF)是一種來源于間質(zhì)細胞的多效性細胞因子,在形成、維持及重塑多細胞組織結(jié)構(gòu)等方面有重要的調(diào)節(jié)作用。在胎盤中HGF主要由絨毛間質(zhì)細胞分泌,在調(diào)節(jié)胎盤形態(tài)發(fā)生、增加滋養(yǎng)細胞遷移及侵襲、促進胎盤血管發(fā)生等方面發(fā)揮著重要的作用。研究表明缺乏HGF可導(dǎo)致胎盤形成障礙而引起胚胎的早期死亡。還有研究發(fā)現(xiàn)當(dāng)組織損傷

3、時HGF合成增加,促進損傷愈合。血管內(nèi)皮生長因子(Vascular endothelialgrowth factor,VEGF)是調(diào)節(jié)胎盤血管生成的重要因子,有研究顯示在RSA中,VEGF水平下降[2],但也有研究得出相反的結(jié)論,未能達成一致。目前國內(nèi)尚未有關(guān)HGF在RSA患者中表達水平的報道。本研究通過測定HGF及VEGF在RSA患者絨毛及蛻膜中的表達,與正常早孕組相比較,探討其與不明原因反復(fù)流產(chǎn)的關(guān)系。
　　 方法:完全隨機

4、選取2010年7月至2011年2月在河北醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院婦產(chǎn)科門診就診的反復(fù)自然流產(chǎn)患者20例為反復(fù)自然流產(chǎn)組。病例選擇條件:既往發(fā)生過3次或3次以上自然流產(chǎn),無急、慢性疾病,排除染色體異常,生殖器官異常,內(nèi)分泌異常,免疫因素,感染因素等可能引起流產(chǎn)的因素;完全隨機選擇同期同醫(yī)院要求行人工流產(chǎn)的正常健康早孕婦女為對照組。兩組選取病例經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析,年齡、停經(jīng)天數(shù)、胎囊大小均無統(tǒng)計學(xué)差異。所有病例負(fù)壓吸取宮腔內(nèi)容物后,立即用0.9％氯化

5、鈉溶液漂洗干凈血跡后,迅速分離絨毛及蛻膜各約1.0×1.0×1.0cm,置于4％多聚甲醛溶液中固定24-48小時,常規(guī)脫水、透明、石蠟包埋、統(tǒng)一切片、HE及免疫組化染色、觀察結(jié)果,采用四級半定量法進行結(jié)果分析。
　　 結(jié)果:
　　 1.HGF在絨毛中的表達結(jié)果:HGF在絨毛中主要表達于滋養(yǎng)細胞胞漿及合體滋養(yǎng)細胞細胞核中,正常絨毛中染色均勻,著色較淺,RSA組中染色較深(圖3)。RSA組絨毛中HGF表達高于NEP組,差異有

6、顯著性(t=28.697,p＜0.01,表2)。
　　 2.HGF在蛻膜中的表達結(jié)果:HGF在蛻膜中主要存在于腺上皮細胞胞漿中,NEP組部分蛻膜細胞核可見著色,RSA組中可見大量蛻膜細胞核著色,染色較NEP組深(見圖4)。RSA組蛻膜中HGF表達高于NEP組,差異有顯著性(t=20.228,p＜0.01,表3)。
　　 3.VEGF在絨毛中的表達結(jié)果:VEGF主要表達于絨毛細胞滋養(yǎng)細胞和合體滋養(yǎng)細胞的胞漿中,細胞核未見明

7、顯著色。RSA組著色較NEP組深(見圖5)。RSA組絨毛中VEGF表達高于NEP組,差異有顯著性(t=11.34,p＜0.01,表4)。
　　 4.VEGF在蛻膜中的表達結(jié)果:VEGF主要表達于蛻膜細胞、腺上皮細胞和血管內(nèi)皮細胞胞漿中,細胞核未見明顯著色。RSA組著色較NEP組深(見圖6)。RSA組絨毛中HGF表達高于NEP組,差異有顯著性(t=2.389,p＜0.05,表5)。
　　 5.HGF與VEGF的相關(guān)性分析結(jié)

8、果:在NEP組及RSA組中,HGF及VEGF間均不存在線性相關(guān)關(guān)系(r1=0.016,p＞0.05.r2=0.145,p＞0.05.r3=0.334,p＞0.05.r4=0.134,p＞0.05)。
　　 結(jié)論:
　　 1.RSA患者絨毛與蛻膜中HGF的表達高于對照組,且差異具有顯著性。提示RSA的發(fā)生與HGF的升高存在相關(guān)性。
　　 2.RSA患者絨毛與蛻膜中VEGF的表達高于對照組,且差異具有顯著性。提示RS