缺氧誘導因子-1α、血管內(nèi)皮生長因子在糖尿病大鼠視網(wǎng)膜病變中的表達及其超微結(jié)構研究.pdf

1、目的 研究早期糖尿病大鼠視網(wǎng)膜中HIF．1α、VEGF及其mRNA活性表達變化與超微結(jié)構改變，以期探討HIF．1α、VEGF在DR發(fā)病機制中的作用，為DR早期診斷與防治提供實驗依據(jù)。 方法 將SD大鼠132只隨機分為兩組：對照組與糖尿病組，其中糖尿病組采用STZ一次性大鼠腹腔注射建立糖尿病模型；應用免疫組化SP法和RT-PCR法分別于l、3、6個月觀察糖尿病大鼠視網(wǎng)膜HIF．1α、VEGF蛋白及其mRNA活性表達

2、變化；應用透射電鏡觀察三個時間點視網(wǎng)膜的超微結(jié)構改變。 結(jié)果 1、免疫組化法檢測HIF．1α、VEGF蛋白在對照組視網(wǎng)膜上均不表達；在DRl組，HIF．1α、VEGF表達即被激活，主要表達于視網(wǎng)膜內(nèi)核層及外核層細胞核；隨著病程的延長，神經(jīng)節(jié)細胞、血管內(nèi)皮細胞、內(nèi)界膜均有HIF．1α、VEGF表達，且呈進行性增強，與對照組相比差異有統(tǒng)計學意義(P<0．05)。 2、RT-PCR法檢測HIF．1amRNA、VEGFm

3、RNA在對照組視網(wǎng)膜不表達；隨著病程的延長，DRl、DR3、DR6上表達呈進行性增強，與對照組相比差異有統(tǒng)計學意義(P<0．05)。 3、相關分析顯示：在DR病變中HIF．1α與VEGF之間的表達存在明顯的正相關關系(r=0。630，P<0．05)。 4、視網(wǎng)膜超微結(jié)構：DR3組視網(wǎng)膜開始出現(xiàn)較明顯的超微結(jié)構改變，表現(xiàn)為線粒體減少，腫脹：嵴變短、消失或髓樣變：細胞核形態(tài)不規(guī)則，核染色質(zhì)聚集和邊聚；血管表現(xiàn)為基底膜節(jié)段性增

4、厚、斷裂缺失，內(nèi)皮細胞腫脹和變形，向血管腔內(nèi)呈指狀突起，管腔變窄或閉塞；周細胞核異染色質(zhì)濃集居邊。 結(jié)論 l、DR與HIF-lα、VEGF活性表達增強呈正相關，同時二者的表達與DR的發(fā)生、發(fā)展存在時效和空間性關系； 2、在DR出現(xiàn)超微結(jié)構病理改變之前，HIF．1α、VEGF表達已被激活，且活性均隨著病變發(fā)展呈增強； 3、VEGF表達增強可能受活化的HIF．1α調(diào)節(jié)；HIF．1a與VEGF在DR的誘導、血管