血管內(nèi)皮生長因子在腎病大鼠中的表達(dá)及意義.pdf

1、目的：本實驗利用阿霉素制備微小病變型腎病綜合征動物模型。采用酶聯(lián)免疫學(xué)方法(ELISA)測定不同階段大鼠血、尿及腎臟組織中血管內(nèi)皮生長因子(vascularendothelial growth factor，VEGF)的水平，來揭示VEGF在微小病變型腎病中的表達(dá)及意義及其與蛋白尿的關(guān)系，從而進(jìn)一步探討微小病變型腎病綜合征中蛋白尿的發(fā)病機制。為臨床對蛋白尿的治療提供實驗依據(jù)。 方法：選用 6 周齡的雄性Wistar火鼠62只，隨

2、機分為正常組、腎病組。正常對照組 30 只(隨機再分在組，每組10只)，人鼠尾靜脈注射5mg/kg 生理鹽水；腎病組(阿霉素模型組)(ADR模型組)32只。人鼠尾靜脈注射阿霉素 5mg/kg 制備微小病變型腎病綜合征(MCNS)模型。置于大鼠代謝籠內(nèi)喂養(yǎng)。注射后第 6 天檢測所有大鼠24小時尿蛋白定量，尿蛋白>30mg/24h者為MCNS模型成助，剔除2只，腎病組剩余30只(隨機再分三組，每組10只)。分別于實驗的第 7 天、14天、2

3、8天收集24小時尿液測尿蛋白量，實驗的第14天、28滅分別采血用自動生化儀測定血清白蛋白和血清總膽固醇水平，實驗的第7天、14天、28人采用雙搞夾心ELISA 方法檢測各組大鼠血清、尿、腎組織 VEGF 的水平，并處死大鼠，取腎組織做光鏡檢查，觀察各組火鼠腎臟形念學(xué)改變。 結(jié)果： 1．腎病組大鼠于實驗第7天出現(xiàn)大量蛋白尿，此后進(jìn)行性升高，實驗第28 天尿蛋白達(dá)高峰，各期與正常組比較尿蛋白明顯升離(P<0.01)，三個時間

4、點相比差異有顯著性 (P<0.01)。同時表現(xiàn)為低蛋白血癥，高膽固酵血癥和明顯的水腫。 2．腎臟形念學(xué)觀察：腎病組外觀，包膜緊張，水腫，光鏡下腎小球結(jié)構(gòu)正常，腎小管輕微改變。 3．腎病組大鼠血清、尿液和腎組織中VEGF的水平于實驗第7天出現(xiàn)升高(41.63±2.73pg/ml：9.22±1.32p/ml：8.93+0.90ng/ml)，第 14 人濃度進(jìn)步升高 (72.07±9.38 pg/ml；15.88±3.21 p

5、g/ml：12.17±3.51 ng/ml)，第28 天濃度達(dá)高峰 (124.18±24.43 pg/ml：27.26±5.24 pg/ml：21.05±4.16ng/ml)。腎病組各時間點與正常組比較 VEGF 含量明顯升高(P<0.01)，腎病組大鼠血清、尿液和腎組織中VEGF 的含量在各自三個時間點棚比差異有顯著性(P<0.05)。 4．相關(guān)分析：血清VEGF 的濃度與 24 小時尿蛋白量呈正機關(guān)(r=0.775，P<0.

6、01)，尿液 VEGF 的濃度與 24 小時尿蛋白量呈正相關(guān)(r=0.807，P<0.01)，腎臟 VEGF 的含量與 24小時尿蛋白量呈正相關(guān)(r=0.629，P<0.01)，血清 VEGF 的濃度與尿液VEGF的濃度呈正相關(guān) (r=0.583，P<0.01)；尿液VEGF的濃度與腎臟 VEGF 的含砒也是呈正相關(guān)(r=0.824，P<0.01)。 結(jié)淪： 1．阿霉素一次性尾靜脈注射可成功制備微小癇變型腎病病綜合征(M