nNOS及LXRα基因多態(tài)性與缺血性卒中的關(guān)聯(lián)性研究.pdf

1、研究背景：
　　腦卒中具有發(fā)病率高、死亡率高、致殘率高及復(fù)發(fā)率高的特點，是全世界致死及致殘的主要病因，在中國已成為致死及致殘的首位原因，中國每年有150萬-200萬新發(fā)腦卒中病例，其中70-80％為缺血性卒中(Ischemic stroke，IS)。因此研究缺血性腦血管病的危險因素及作用機制對防治此類疾病有重要的理論和現(xiàn)實意義。多數(shù)研究提示IS的發(fā)病不僅與常見的傳統(tǒng)危險因素，如高血壓、糖尿病、高脂血癥、吸煙、心臟病、高同型半胱氨酸

2、血癥有關(guān)，而且具有一定的遺傳易感性，研究認為遺傳因素在缺血性卒中的發(fā)生中所占比重平均為37.9％。
　　動脈粥樣硬化的形成和發(fā)展是心、腦血管疾病的主要病因。而最近的研究表明nNOS基因和LXRα基因，通過不同機制作用于動脈粥樣硬化的形成和發(fā)展。因此本研究選取了nNOS基因和LXRα基因這兩個與動脈粥樣硬化相關(guān)基因，采用候選基因病例對照的研究方法，分析了nNOS基因(rs2293050、rs2139733、rs7308402、rs1

3、483757)和LXRA基因(rs2167079、rs2279238)位點的基因型和等位基因在IS組、IS亞組及對照組中頻率分布差異，從而探討nNOS基因和LXRA基因多態(tài)性和中國北方漢族人群缺血性卒中的相關(guān)性，為更詳盡的了解發(fā)病潛在的遺傳機制提供分子流行病學依據(jù)，為早期診斷IS提供更多的分子生物學指標。
　　研究方法：
　　采用病例-對照研究方法，病例組選取中國北方漢族缺血性腦卒中患者，共413例，其中男性201例，女性2

4、12例，年齡32-90歲間，均為漢族，彼此無親緣關(guān)系;選取性別、年齡與IS組相匹配的健康個體477例作為對照，男性224例，女性253例;在此基礎(chǔ)上將IS組和對照組按性別不同分為男女亞組。應(yīng)用單堿基延伸法(Multiplex SNaPshot)檢測nNOS基因(rs2293050、rs2139733、rs7308402、rs1483757)和LXRA基因(rs2167079、rs2279238)位點的多態(tài)性。用擬合優(yōu)度x2檢驗驗證每個位

5、點SNP基因型分布頻率是否符合Hardy-Weinberg平衡。采用SPSS16.0統(tǒng)計軟件x2檢驗各個位點基因型、等位基因在對照組與病例組及各亞組中的頻率分布差異、風險度分析，最后結(jié)合臨床資料，對相關(guān)數(shù)據(jù)進行Logistic回歸分析，排除性別、年齡、高血壓、糖尿病、吸煙、飲酒史等傳統(tǒng)混雜因素的干擾，以P＜0.05為檢驗水準。利用SHEsis在線軟件對nNOS基因的4個SNPs位點和LXRA基因的2個位點進行連鎖不平衡分析和單倍型分析。

6、
　　研究結(jié)果：
　　1、所有研究對象的每個SNPs基因型在抽樣群體中的分布均符合Hardy-Weinberg平衡(P＞0.05)，說明本研究所選取的樣本具有人群代表性適合做遺傳學分析。
　　2、nNOS基因rs7308402位點多態(tài)性在病例組與對照組的頻率分布:該位點的A等位基因及AG基因型頻率在病例組明顯低于對照組(P=0.041，P=0.037)。攜帶AG基因型的個體發(fā)生IS的風險經(jīng)過Logistic回歸分析校正

7、各種混雜因素后仍有統(tǒng)計學差異，發(fā)病危險度降低到0.59倍(OR=0.59，95％CI:0.35-0.99; P=0.049)。女性亞組分析中，A等位基因及AG基因型的頻率分布也是有統(tǒng)計學差異的(P=0.002，P=0.001)，攜帶AG基因型的個體發(fā)生缺血性卒中的風險經(jīng)過Logistic回歸分析校正各種混雜因素后仍有統(tǒng)計學差異，發(fā)病危險度降低到0.345倍(OR=0.35,95％CI:0.16-0.74; P=0.006)。
　　

8、3、LXRA基因rs2279238位點多態(tài)性在病例組與對照組的頻率分布:該位點的T等位基因及TT基因型頻率在病例組明顯高于對照組(P=0.013，P=0.006)。攜帶TT基因型的個體發(fā)生缺血性卒中的風險經(jīng)過Logistic回歸分析校正各種混雜因素后仍有統(tǒng)計學差異，發(fā)病危險度增加到1.65倍(OR=1.65，95％CI:1.02-2.68，P=0.042)。女性亞組分析中，T等位基因及TT基因型的頻率分布也是有統(tǒng)計學差異的(P=0.00

9、1，P=0.001)，攜帶TT基因型的個體發(fā)生缺血性卒中的風險經(jīng)過Logistic回歸分析校正各種混雜因素后仍有統(tǒng)計學差異，發(fā)病危險度增加到2.35倍(OR=2.35,95％CI:1.18-4.68; P=0.015)。
　　4、nNOS基因rs1483757、rs2139733、rs2293050位點基因型及等位基因頻率在病例組與對照組中的頻率分布無統(tǒng)計學差異，與中國北方漢族人群的缺血性卒中發(fā)病無相關(guān)性。
　　5、LXRA

10、基因rs2167079位點基因型及等位基因頻率在病例組與對照組中的頻率分布無統(tǒng)計學差異，與中國北方漢族人群的缺血性卒中發(fā)病無相關(guān)性。
　　6、nNOS基因單倍型在病例組與對照組中的分布頻率:GATA(rs1483757、rs2139733、rs2293050、Rs7308402)單倍型在病例組中的分布頻率明顯低于對照組，提示其可能是一種保護性的單倍型，(OR=0.59，95％CI:0.36-0.98，P=0.038)。
　　

11、7、nNOS基因rs2139733-rs2293050兩位點之間存在連鎖不平衡。
　　8、LXRA基因rs2167079-rs2279238兩位點之間不存在連鎖不平衡。
　　結(jié)論：
　　1、nNOS基因rs7308402位點的A等位基因及AG基因型能夠降低中國北方漢族人群尤其是女性人群患缺血性卒中的風險。
　　2、nNOS基因GATA(rs1483757-rs2139733-rs2293050-rs7308402