2011-2012年廣州市哨點醫(yī)院病毒性腹瀉的流行病學研究.pdf

1、背景:
　　 病毒性胃腸炎是世界各國高發(fā)疾病之一，尤其在發(fā)展中國家因胃腸炎疾病死亡的兒童人數(shù)高于相應(yīng)的發(fā)達國家。隨著檢測技術(shù)的不斷發(fā)展和腹瀉研究的深入，病毒性腹瀉在急性非細菌性腹瀉中顯得越來越重要，占60％。引起嬰幼兒腹瀉的常見病原體以輪狀病毒(Rotavirus，RV)為主，之后相繼發(fā)現(xiàn)諾如病毒(Norovirus，NoV)、扎幌病毒(Sapovirus，SaV)、腸道腺病毒(denoviruses，AdV)和星狀病毒(Ast

2、roviru，AstV)也是引起急性腹瀉的主要病因。
　　 據(jù)統(tǒng)計，在世界范圍內(nèi)由A組輪狀病毒起因的腹瀉每年大約有1.11億，其感染對象主要為5歲以下兒童，在我國每年約有1～2萬名5歲內(nèi)兒童死于輪狀病毒腹瀉。杯狀病毒在世界范圍內(nèi)流行僅次于輪狀病毒，這與水源性和食源性胃腸炎的暴發(fā)和散發(fā)有著密切的關(guān)系，其自身毒性較弱，且發(fā)病過程具有自限性，但傳染性較強，如不能及時治療可導致患者死亡。腸道腺病毒引起的腹瀉呈全球分布，多以區(qū)域性流行為主

3、，少見暴發(fā)流行報道。由腸道腺病毒引起的腹瀉全年均可發(fā)生，部分地區(qū)有季節(jié)性升高現(xiàn)象，以秋冬季常見，Ad41型為流行優(yōu)勢株，部分地區(qū)以Ad40為主，也可見非腸道腺病毒引起的腹瀉報道。星狀病毒感染在世界范圍內(nèi)廣泛存在，易感人群以2歲兒童為主，在患兒腹瀉糞便中檢出率為0.6％～26％，其既可引起醫(yī)源性感染和散發(fā)流行，也有暴發(fā)報道，有研究報道它也是成人腹瀉散發(fā)流行的病原體之一。
　　 國內(nèi)外近幾年對病毒性腹瀉的流行病學研究已廣泛開展，但多

4、數(shù)研究主要針對常住人群5歲內(nèi)兒童進行研究，針對成人和城鄉(xiāng)結(jié)合部人群腹瀉的報道較少。伴隨改革開放急促的步伐，經(jīng)濟、醫(yī)療衛(wèi)生行業(yè)也在迅猛發(fā)展，但農(nóng)村、城鄉(xiāng)結(jié)合部等經(jīng)濟條件卻相對落后，由于人員構(gòu)成復(fù)雜流動性大、知識水平低、經(jīng)濟條件差等問題，整體上影響了城市流動人口的衛(wèi)生保健服務(wù)狀況，腹瀉病的發(fā)病率不容樂觀，所以本研究前瞻性地收集兩家哨點醫(yī)院（其一為城區(qū)人群，其二為城鄉(xiāng)結(jié)合部人群）2011年6月至2012年5月的兒童腹瀉患者和18歲以上成人腹瀉

5、標本進行相關(guān)病毒研究，以便系統(tǒng)的掌握廣州市5歲以下兒童和18歲以上成人病毒性腹瀉的流行特征和流行優(yōu)勢株的變化，為以后制定病毒性腹瀉的預(yù)防控制策略提供科學依據(jù)，也為將來研制開發(fā)病毒疫苗提供全面系統(tǒng)的背景資料。
　　 研究目的:
　　 1.了解廣州市哨點醫(yī)院2011年6月～2012年5月5歲內(nèi)兒童和18歲以上成人散發(fā)病毒性腹瀉中RV、NoV、AdV、AstV和SaV感染狀況及流行病學特征，完善我國病毒性腹瀉的流行病學基礎(chǔ)資料

6、;
　　 2.了解該地區(qū)5歲內(nèi)兒童和18歲以上成人病毒性腹瀉中NoV、AdV、AstV和SaV基因型別，探討4種病毒的流行優(yōu)勢毒株，明確各病毒分子特征及基因型分布情況;
　　 3.為廣州地區(qū)兒童和成人病毒感染性腹瀉的研究提供豐富的背景資料。
　　 方法:
　　 1.標本收集:
　　 收集2011年6月～2012年5月期間在廣州市白云區(qū)某社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心和南方醫(yī)院第三附屬醫(yī)院檢驗科就診的年齡在5歲以

7、下的360例患兒標本和年齡在18歲以上的127例成人腹瀉患者糞便標本、人口學資料及流行病學資料。
　　 2.標本處理方法:
　　 每份糞便標本取5～10g或5～10ml，加入PBS，震蕩后制成10％的懸液，分裝三管后-80℃保存?zhèn)溆谩?br>　　 3.標本病毒檢測方法:
　　 使用A群輪狀病毒膠體金法檢測糞便中的輪狀病毒后對符合要求的標本進行核酸提取，用引物JV12Y/JV13I、Ad1/Ad2、Mon269/

8、Mon270和SLV5317/SLV5749分別檢測NoV、AdV、AstV和SaV，對純化后的PCR陽性產(chǎn)物進行測序，測序結(jié)果應(yīng)用BLAST在GenBank上尋找各陽性株的同源序列，應(yīng)用Clustal W進行多序列對比分析和MEGA5.0構(gòu)建遺傳進化樹，分析NoV、SaV、AdV和AstV的基因型別，判斷NoV、AdV、AstV和SaV的流行優(yōu)勢毒株。
　　 4.統(tǒng)計分析方法:數(shù)據(jù)管理采用Epidata2.1進行雙份錄入，運用

9、統(tǒng)計軟件SPSS13.0對收集的患者資料進行統(tǒng)計分析，分析廣州地區(qū)病毒性腹瀉的流行病學特征，檢驗水準α為0.05。
　　 結(jié)果:
　　 1.2011年6月-2012年5月共收集廣州市兩家哨點醫(yī)院5歲內(nèi)患兒糞便標本和問卷共360份?；純褐饕O(jiān)護人文化程度以大專及以上最多53.0％(188/355)，職業(yè)以在家及待業(yè)為主20.2％(71/351)。
　　 2.共收集18歲以上符合要求的成人腹瀉患者糞便127份，成人患

10、者中平均年齡為(41.91±17.92)。患者文化程度以大專及以上占最多，為50.4％(64/127)，文盲最少為0.8％(1/127)，職業(yè)以辦公室白領(lǐng)占最多，為25.2％(32/127)。
　　 3.五歲內(nèi)兒童RV、NoV、AdV、SaV、AstV的檢出率分別為30％(108/360)、8.9％(32/360)、7.5％(27/360)、1.7％(6/360)、2.5％(9/360)，以輪狀病毒檢出最高?；旌细腥菊?％(18

11、/360)，以輪狀病毒混合感染為主。五種病毒檢出者主要集中在3歲內(nèi)兒童，輪狀病毒集中發(fā)病季節(jié)主要集中在9-11月，以10月高發(fā)，札幌病毒以11月到12月為發(fā)病高峰，星狀病毒僅在10-12月有檢出，這三種病毒散發(fā)主要集中在秋冬季，而諾如病毒發(fā)病高峰以6月最為集中，腺病毒的發(fā)病高峰在2011年以9月最高，2012年2月最高。
　　 4.成人患者五種病毒的檢出率以諾如病毒檢測率最高，為8.7％(11/127)，其次是輪狀病毒5.5％(

12、7/127)，腺病毒2.4％(3/127)，札如病毒2.4％(3/127)，星狀病毒0.8％(1/127)。未見混合感染。病毒感染主要集中在60歲以上這個年齡組中占25％(7/28)。發(fā)病季節(jié)顯示:輪狀病毒的流行期為12月-次年2月份，諾如病毒的發(fā)病高峰在9月和12月，腺病毒、札幌病毒和星狀病毒檢出例數(shù)較少，還不能顯示季節(jié)分布特點。
　　 5.序列分析結(jié)果:360份兒童糞便標本中檢出諾如病毒感染32株，測序分析，26株屬于GⅡ-

13、4型，其中3株屬于GⅡ-4-2006a。3株屬于GⅡ-13型，1株為GⅡ-5，2株GⅡ-6。檢出6株SaV，6株為都為GⅠ型，其中4株為GⅠ-1型，2株屬于GⅠ-2;檢出AdV27例，其中Ad-41型18例，9例非腸道腺病毒中檢出2份Ad1型，2份Ad2型，1份Ad7型，2份Ad12型，2份Ad31型;而檢出9株AstV均為HAstV-1。
　　 6.127份成人腹瀉標本中檢出諾如病毒11株，其中8株屬于GⅡ-4，1株GⅡ-b，

14、1株GⅡ-6，1株GⅠ-1。腺病毒檢出3例均為Ad41，星狀病毒1例陽性為HAst-1;札幌病毒陽性2例屬于GⅠ-2，1例屬于GⅣ。
　　 結(jié)論:
　　 1、病毒性腹瀉是引起嬰幼兒和成人腹瀉的重要病原，其中兒童以輪狀病毒為主，成人以諾如病毒為主，3歲以內(nèi)兒童和60歲以上老年人為感染高發(fā)人群，不同病毒引起的季節(jié)性高峰有所不同，故應(yīng)開展長期、連續(xù)的的疾病監(jiān)測和病原學檢測;
　　 2、NoV GⅡ-4型是引起廣州市哨點

15、醫(yī)院5歲內(nèi)兒童和18歲以上成人散發(fā)腹瀉的流行優(yōu)勢株，其中3株屬于GⅡ-4-2006a，而在我國很多地區(qū)均已檢測到2006b，對2006a檢出報道較少;AdV引起腹瀉的流行優(yōu)勢株為Ad41，同時也檢出了其他多個非腸道腺病毒的基因型別，但未檢出Ad40型，表明Ad41是廣州地區(qū)流行優(yōu)勢株，與國內(nèi)外AdV血清型變化趨勢相符;AstV在兒童和成人腹瀉中的流行優(yōu)勢株均為AstV-1，與我國國內(nèi)情況相同;兒童SaV以GⅠ-1為主，而成人以GⅠ-2型