血管危險因素及腦缺血對老年性癡呆認知功能影響的研究.pdf

1、研究背景 阿爾茨海默病(Alzheimer's disease，AD)是老年人群癡呆的主要類型，占老年癡呆患者的60％～70％。目前全球有AD患者約1200萬人，隨著全球人口老齡化問題的加劇，預(yù)計到2050年全球?qū)⒂?500萬AD患者。AD患者的醫(yī)療和照料給家庭和社會帶來了巨大的負擔(dān)，對AD的防治非常緊迫。 流行病學(xué)研究發(fā)現(xiàn)高血壓、糖尿病、高膽固醇血癥、動脈粥樣硬化、TIA史等腦血管疾病的危險因素影響AD的發(fā)生，可使AD

2、的患病風(fēng)險增高。根據(jù)這些依據(jù)可以得出一個假想，血管危險因素對AD的進展可能有重要作用，可能會加重AD的認知功能障礙，探討血管危險因素在AD進展中的作用對于AD的治療將有重要的提示作用：除了傳統(tǒng)的抗乙酰膽堿能藥物外，積極控制血管危險因素將是AD治療上新的突破，很好地使用治療血管危險因素的藥物如抗高血壓藥、降糖藥、降脂藥，將減緩、阻止甚至逆轉(zhuǎn)AD的進展。 血管危險因素影響AD認知功能的機制是什么呢?血管危險因素導(dǎo)致腦動脈粥樣硬化，引

3、起慢性腦灌注不足，嚴(yán)重者引起腦梗塞，臨床上以腔隙性腦梗塞最常見，血管危險因素影響AD認知功能的機制就是上述腦血管疾病引起的急、慢性腦缺血。腦缺血導(dǎo)致海馬神經(jīng)元發(fā)生缺血性改變，功能紊亂甚至死亡，最終出現(xiàn)認知功能障礙。因此近年來腦缺血與AD的關(guān)系日益受到重視。流行病學(xué)與病理學(xué)研究發(fā)現(xiàn)約三分之一的臨床診斷為AD的患者腦中同時存在腦梗塞的病理改變；腦缺血可加重AD的認知功能障礙。這些研究都提示AD與腦缺血間存在密切的聯(lián)系，探討腦缺血在AD進展中

4、的作用將為AD的治療提供新的思路。 進一步認識血管危險因素及腦缺血在AD發(fā)展中的作用，對于AD的治療具有重要的臨床意義。為此，本研究開展了臨床和基礎(chǔ)兩個部分的研究：(1)血管危險因素與AD認知功能障礙進展的2年前瞻性研究，探討血管危險因素在AD認知功能障礙進展中的作用。(2)腦缺血對AD大鼠認知功能的影響及機制研究，探討腦缺血在AD進展中的作用和機制。 第一部分血管危險因素對老年性癡呆認知功能影響的臨床研究 目的

5、 通過前瞻性研究探討血管危險因素與AD認知功能障礙進展的關(guān)系。 對象和方法 (1)對象：選擇2000年1月-2004年8月于我科臨床診斷為可能AD的老年病人，在2004年9月-2006年12月間進行2年的前瞻性研究，隨訪了163名AD病人。 (2)基線調(diào)查：人文資料、血管危險因素和用藥情況(詢問病史、體格檢查、輔助檢查和采血)以及成套神經(jīng)心理學(xué)測試(簡易智能量表MMSE篩查陽性者進行日常生活能力量表，物體

6、記憶測驗，詞語流暢性測驗，pfeffer功能活動調(diào)查表，數(shù)字記憶廣度測驗，積木測驗，漢密爾頓抑郁量表和Hachinski缺血指數(shù)評分)。采用美國精神疾病診斷和統(tǒng)計手冊第三版修訂本(DSM-Ⅲ-R)標(biāo)準(zhǔn)建立癡呆診斷，美國神經(jīng)病學(xué)-語言障礙一和卒中一老年性癡呆和相關(guān)疾病學(xué)會(NINCDS-ADRDA)標(biāo)準(zhǔn)建立可能AD診斷。AD進一步分為有血管危險因素組和無血管危險因素組。 (3)隨訪：每年對入選者進行隨訪。采用相同的神經(jīng)心理檢查量表

7、檢測認知功能。 (4)統(tǒng)計分析：對所收集的資料進行單因素和多因素分析。在單因素分析中，根據(jù)變量情況選擇Pearson卡方檢驗、獨立樣本t檢驗或Mann-whitney U檢驗等方法。在多因素分析中，采用多元線性逐步回歸模型分析血管危險因素與AD認知功能障礙進展的關(guān)系，并納入混淆因素進行校正。 結(jié)果 (1)隨訪：在基線調(diào)查時，抽取了我科2000年1月-2004年8月臨床診斷為可能AD的65歲以上的老年病人238人，

8、基線調(diào)查后211人(88.7％)被納入隨訪研究。本研究的隨訪時間為2年，在此期間有15人(7.1％)死亡，22人(10.4％)拒絕參加或外出，2人(0.9％)搬離到外地，9人(4.3％)因隨訪期間發(fā)生腦出血而被剔除，共有163人(77.3％)被納入研究。 (2)基線特征的單因素分析：根據(jù)有無血管危險因素劃分的兩組間進行基線特征的比較。同無血管危險因素者比較，有血管危險因素者的年齡較大(82.7+7.9 vs 78.3±6.7，p

9、<0.01)，女性較多(69.4％vs 58.3％，p<0.01)。兩組間在基線MMSE評分(17.6±4.3 vs18.5±5.1，p=0.426)，ADL評分(32.8±8.3 vs 32.1±7.7，p=0.896)，受教育程度(≤6years)(71.6％vs72.8％， p=0.830)，藍領(lǐng)(70.1％vs 68.7％，p=0.864)和抗AD藥(32.7％vs 31.4％， p=0.913)上無明顯統(tǒng)計學(xué)差異。 (

10、3)血管危險因素的基線分布特征： 基線調(diào)查時AD病例中各血管危險因素的分布分別為：高血壓(36.5％)，糖尿病(28.6％)，高膽固醇血癥(20.7％)，心肌梗塞(3.5％)，心房纖顫(6.9％)，頸動脈粥樣硬化斑塊(25.1％)、TIA(11.6％)，當(dāng)前吸煙(28.2％)，每日飲酒(23.1％)。 (4)認知功能障礙進展的單因素分析：在隨訪終點，AD中有血管危險因素者在記憶、定向、視空功能、抽象思維、語言和社會活動能力

11、等方面的評分均顯著低于無血管危險因素者(P<0.01)；而且有血管危險因素AD病例的各方面評分的下降幅度均明顯大于無血管危險因素的AD病例(P<0.01)。 (5)血管危險因素與AD認知功能障礙進展的多因素分析：校正了人文因素、治療血管危險因素藥物、抗AD藥物等混淆因素后，腦梗塞(b<,j>′=0.917,P<0.001)、TIA(b<,j>′=0.876，P<0.001)、糖尿病(b<,j>′=O.863，P<0.001)、高

12、血壓(b<,j>′=0.821，P<0.01)、頸動脈粥樣硬化斑塊(b<,j>′=0.749，P<0.05)、高膽固醇血癥(b<,j>′=0.736，P<0.05)、當(dāng)前吸煙(b<,j>′=0.4.39,P<0.05)、每日飲酒(b<,j>′=O.323，P<0.05)與AD認知功能障礙的加重相關(guān)。 結(jié)論 (1)腦梗塞、TIA、糖尿病、高血壓、頸動脈粥樣硬化斑塊、高膽固醇血癥、當(dāng)前吸煙和每日飲酒可加重AD的認知功能障礙。

13、分析血管危險因素加重老年性癡呆認知功能障礙的機制是血管危險因素引起腦缺血，導(dǎo)致海馬神經(jīng)元發(fā)生缺血性改變，功能紊亂甚至死亡，最終加重認知功能障礙。 (2)積極控制血管危險因素可在一定程度上減緩AD的進展。 第二部分腦缺血對AD大鼠認知功能的影響及機制研究 目的 通過海馬注射Aβ制備AD大鼠模型，右側(cè)紋狀體注射內(nèi)皮素-1(Endothelin-1，ET-1)制備腦缺血模型，觀察腦缺血后AD大鼠認知功能的變化，

14、探討腦缺血影響AD大鼠認知功能的機制。 方法 大鼠海馬注射Aβ1-40成功建立AD大鼠模型后，于AD大鼠右側(cè)紋狀體注射ET-1建立臨床常見的基底節(jié)區(qū)多發(fā)性腔隙性腦梗塞的腦缺血模型，觀察腦缺血對AD大鼠認知功能的影響及作用機制。 (1)AD大鼠模型的鑒定：從行為學(xué)(穿梭箱和Morris水迷宮檢測)、海馬組織病理學(xué)(剛果紅、尼氏和HE染色)和神經(jīng)元過度磷酸化tau蛋白的表達(抗tau(pS202)免疫組化)三個角度評

15、價模型。 (2)腦缺血對AD大鼠認知功能的影響：AD大鼠建立腦缺血條件后，行為學(xué)檢測AD大鼠認知功能的變化，檢測AD大鼠海馬組織病理學(xué)和過度磷酸化tau蛋白表達的變化。 (3)腦缺血影響AD大鼠認知功能的炎性機制：AD大鼠建立腦缺血條件后，免疫組織化學(xué)法檢測AD大鼠海馬內(nèi)星形膠質(zhì)細胞以及炎性細胞因子IL-1和TNF-α的表達變化，原位雜交和RT-PCR在核酸水平分別定位和定量檢測海馬內(nèi)炎性細胞因子IL-1和TNF-α的表

16、達變化。 結(jié)果 (1)Aβ1-40海馬內(nèi)注射造成了大鼠主動和被動回避反應(yīng)及空間分辨力的明顯下降(P<0.01)，大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力受損；海馬注射區(qū)內(nèi)DG的神經(jīng)細胞減少(P<0.01)；注射側(cè)海馬內(nèi)淀粉樣物質(zhì)沉積；海馬神經(jīng)元內(nèi)過度磷酸化tau蛋白的表達顯著增加(P<0.01)，成功建立了比較理想的阿爾茨海默病的實驗動物模型。大鼠右側(cè)紋狀體注射ET-1可成功建立基底節(jié)區(qū)多發(fā)性腔隙性腦梗塞的腦缺血模型。 (2)腦缺血后

17、AD大鼠認知功能的下降(P<0.01)、海馬內(nèi)Ap的沉積(P<0.05)、海馬神經(jīng)元的丟失(P<0.01)和過度磷酸化tau蛋白表達的增加(P<0.01)都較單純的AD大鼠明顯。 (3)腦缺血后AD大鼠海馬內(nèi)星形膠質(zhì)細胞和炎性細胞因子IL-1、TNF-α的表達都較單純的AD顯著增加(P<0.01)；海馬內(nèi)炎性細胞因子IL-1、TNF-amRNA的表達在定位和定量上都較單純的AD顯著增加(P<0.01)。 結(jié)論 (