IL-1β、COX-2、MMP-2與胎膜早破的相關(guān)性研究.pdf

1、目的：通過對胎膜早破患者和正常足月妊娠者血清及羊水中的白細(xì)胞介素-1β(IL-1β)濃度，胎膜中環(huán)氧合酶-2(COX-2)和基質(zhì)金屬蛋白酶-2(MMP-2)表達水平的測定，分析胎膜早破患者血清、羊水中IL-1β與胎膜中COX-2、MMP-2三者的相關(guān)性，探討IL-1β、COX-2、MMP-2在胎膜早破中的作用。從細(xì)胞因子、環(huán)氧合酶以及基質(zhì)金屬蛋白酶角度闡述胎膜早破的發(fā)生機制，為臨床上預(yù)防和治療胎膜早破提供理論依據(jù)和新的思路方法。

2、 方法： 1.研究對象：選擇2006年9月至2007年7月在河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院婦產(chǎn)科病房住院分娩的孕婦60例，其中妊娠足月胎膜早破(tPROM)20例為Ⅰ組；妊娠不足月(足月前)胎膜早破(pPROM)20例為Ⅱ組；正常足月妊娠20例作對照為Ⅲ組。所有研究對象均為第一胎、單胎、頭位，無妊娠合并癥及并發(fā)癥(如羊水過多、頭盆不稱、宮頸發(fā)育不全等)，無內(nèi)外科合并癥，無宮內(nèi)感染及其它臨床發(fā)熱征象。所有孕婦年齡、孕產(chǎn)次、營養(yǎng)狀況、經(jīng)濟收入

3、等均相似，具有可比性。 2.標(biāo)本采集：(1) 血清：受試對象于剖宮產(chǎn)術(shù)前抽肘前靜脈血3ml，1700轉(zhuǎn)/分，離心15分鐘，分離血清，置-20℃冰箱保存待檢；(2) 羊水：于剖宮產(chǎn)術(shù)中行羊膜腔穿刺取羊水3～5ml，離心后取上清液置.20℃冰箱備用；(3)胎膜：取子宮切口下2～3cm處胎膜1.5cm×1.5cm大小兩塊，一塊用4％ 多聚甲醛固定、石蠟包埋備用，另一塊用磷酸鹽緩沖液(PBS)沖洗3次，去掉粘著的血液，立即凍存在

4、液氮中而后置-80℃冰箱保存待檢。 3.實驗方法(1) 采用固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)測定各研究組對象血清、羊水中IL-1β濃度，并比較各組間有無差異及血清與羊水中IL-1β有無相關(guān)性；(2)依據(jù)胎膜標(biāo)本切片常規(guī)蘇木精-伊紅(HE)染色后的組織學(xué)結(jié)果，劃分為感染組和無感染組；(3) 利用逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈反應(yīng)(reverse transcription polymerase chain reaction，RT-PCR)方法測定

5、胎膜組織中COX-2、MMP-2的mRNA水平并比較。 所得數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS13.0軟件進行統(tǒng)計學(xué)處理，各項測定值以均數(shù)士標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示，對所得數(shù)值進行F檢驗、t檢驗及直線相關(guān)分析，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。 結(jié)果 1.胎膜早破組血清、羊水中IL-1β濃度明顯高于對照組(P<0.01)，羊水中IL-1β濃度足月前胎膜早破組高于足月胎膜早破組，有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.01)；血清中IL-1β濃度足月前胎膜

6、早破組與足月胎膜早破組無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)。 2.胎膜早破組胎膜中COX-2 mRNA和MMP-2 mRNA水平明顯高于對照組，兩者比較差異有顯著性(P<0.01)，但足月和足月前胎膜早破兩組間無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)。 3.將所有研究對象根據(jù)胎膜組織學(xué)劃分為感染組19例(tPROM 8例，pPROM 9例，對照組2例)，無感染組41例。胎膜早破組胎膜感染發(fā)生率高于對照組，有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，但足月

7、和足月前胎膜早破兩組間無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)。感染組血清、羊水中IL-1β濃度，胎膜中COX-2mRNA、MMP-2 mRNA水平均高于無感染組，有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.01)；但無感染組中胎膜早破組又較對照紐血清、羊水中IL-1β濃度、胎膜中COX-2 mRNA、MMP-2 mRNA水平高，有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)，但足月和足月前胎膜早破兩組間無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)。 4.血清與羊水中IL-1β水平呈正相關(guān)(r=

8、0.628，P<0.01)，血清中IL-1β水平與胎膜中COX-2 mRNA水平呈正相關(guān)(r=0.458，P<0.01)，羊水中IL-1β水平與胎膜中COX-2mRNA水平呈正相關(guān)(r=0.528，P<0.01)，胎膜組織中COX-2mRNA和MMP-2 mRNA表達水平呈正相關(guān)(r=0.826，P<0.01)。 結(jié)論： 1.本研究表明胎膜早破患者血清、羊水中IL-1β濃度，胎膜中COX-2、MMP-2 mRNA水平均高

9、于正常足月妊娠者，且三個因子具有相關(guān)性。說明IL-1β、COX-2、MMP-2通過相互促進相互影響形成了一個鏈鎖過程參與了胎膜早破的發(fā)生。 2.tPROM和pPROM兩組感染率均高于正常足月妊娠者，且感染組血清、羊水中IL-1β濃度、胎膜中COX-2、MMP-2水平均高于無感染組，但無感染組中胎膜早破組又較對照組血清、羊水中IL-1β濃度、胎膜中COX-2、MMP-2水平高，說明在由IL-1β、COX-2、MMP-2機理引起的胎