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1、目的:檢測(cè)細(xì)胞外基質(zhì)金屬蛋白酶誘導(dǎo)因子(extracellular matrix metalloproteinase inducer,EMMPRIN)和基質(zhì)金屬蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)在胎膜組織中的定位情況;探討EMMPRIN及MMP-2在正常妊娠晚期胎膜組織中的表達(dá)及意義;研究EMMPRIN及MMP-2在胎膜早破中的相關(guān)性并分析二者在其發(fā)病機(jī)制中的作用。 方法:隨機(jī)采集20
2、06年9月至2007年7月在河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院婦產(chǎn)科病房住院,臨產(chǎn)前行剖宮產(chǎn)分娩的初產(chǎn)婦胎膜組織,其中足月胎膜早破者12例,足月前胎膜早破者10例和正常完好胎膜10例作對(duì)照組。所有受試對(duì)象排除有其他妊娠并發(fā)癥、臨床感染征象及近期抗生素應(yīng)用史者。 (1) 應(yīng)用半定量逆轉(zhuǎn)錄-多聚酶鏈反應(yīng)(reversetranscription-polymerase chain reaction,RT-PCR)技術(shù)測(cè)定各組胎膜中EMMPRIN及M
3、MP-2的mRNA表達(dá)水平并比較二者在各組間有無(wú)差異;在每一組中分析EMMPRIN mRNA與MMP-2 mRNA 的相關(guān)性。 (2) 采用免疫組織化學(xué)SP方法檢測(cè)各組胎膜組織中EMMPRIN和MMP-2的蛋白定位情況及表達(dá)水平;比較二者在各組間有無(wú)差異;在每一組中,分析二者的蛋白表達(dá)水平有無(wú)相關(guān)性。 (3) 依據(jù)常規(guī)蘇木素-伊紅(HE)染色后的組織學(xué)結(jié)果,將所有胎膜標(biāo)本切片劃分為絨毛膜羊膜炎組和非絨毛膜羊膜炎組,比較兩
4、組胎膜組織中EMMPRIN的蛋白表達(dá)水平有無(wú)差異。數(shù)據(jù)用SPSS 13.0軟件作統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,采用F檢驗(yàn)、q檢驗(yàn)、t檢驗(yàn)及直線相關(guān)分析,P<0.05為差異有顯著性意義。 結(jié)果: 1、EMMPRIN、MMP-2mRNA和蛋白在足月胎膜早破,足月前胎膜早破及正常妊娠晚期胎膜組織中均有表達(dá)。 2、EMMPRIN和MMP-2的蛋白表達(dá)部位;EMMPRIN主要表達(dá)于羊膜上皮細(xì)胞和絨毛膜滋養(yǎng)細(xì)胞的胞膜;MMP-2表達(dá)于羊膜上皮
5、細(xì)胞和絨毛膜滋養(yǎng)細(xì)胞的胞漿。 3、MMP-2mRNA和蛋白的表達(dá):對(duì)照組MMP-2mRNA的相對(duì)表達(dá)量為:[(63.50±9.53)× 10-2],低于足月胎膜早破組[(80.75±7.02)× 10-2](P<0.01)和足月前胎膜早破組[(77.30±6.31)× 10-2](P<0.01),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;對(duì)照組MMP-2的蛋白表達(dá)量為:[(20.01±1.83)×10-2],低于足月胎膜早破組[(23.33±2.81)
6、×10-2](P<0.01)和足月前胎膜早破組[(22.60±2.99)× 10-2](P<0.05),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;但MMP-2mRNA和蛋白的表達(dá)在足月與足月前胎膜早破組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 4、EMMPRIN mRNA和蛋白的表達(dá):對(duì)照組EMMPINmRNA的相對(duì)表達(dá)量為:[(118.76±10.88)× 10-2],低于足月胎膜早破組[(135.00±9.27)×10-2](P<0.01)和足月前胎
7、膜早破組[(128.50±9.49)× 10-2](P<0.05),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;對(duì)照組EMMPRIN的蛋白表達(dá)量為:[(24.40±3.63)×10-2],低于足月胎膜早破組[(29.92±3.23)×10-2](P<0.01)和足月前胎膜早破組[(27.30±2.36)×10-2](P<0.05),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。但EMMPRIN mRNA和蛋白的表達(dá)在足月與足月前胎膜早破組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 5、
8、EMMPRIN與MMP-2的mRNA相對(duì)表達(dá)量的相關(guān)性:在足月和足月前胎膜早破組中,二者存在顯著正相關(guān)(r=0.639。P<0.05;r=0.645,P<0.05);在對(duì)照組中,相關(guān)性無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(r=O.178,P>0.05)。 6、EMMPRIN與MMP-2的蛋白表達(dá)量的相關(guān)性:在足月和足月前胎膜早破組中,二者存在顯著正相關(guān)(r=O.585.P<0.05;r=0.681,P<0.05);在對(duì)照組中,相關(guān)性無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(r=0
9、.268,P>0.05)。 7.絨毛膜羊膜炎組EMMPRIN蛋白表達(dá)量為:[(29.69±2.40)×10-2],高于非絨毛膜羊膜炎組[(26.00±3.74)×10-2],差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。 結(jié)論: 1、EMMPRIN、MMP-2在足月胎膜早破,足月前胎膜早破及正常妊娠晚期胎膜組織中均有表達(dá),EMMPRIN表達(dá)位置為羊膜上皮細(xì)胞及絨毛膜滋養(yǎng)細(xì)胞的胞膜。MMP-2表達(dá)于羊膜上皮細(xì)胞和絨毛膜滋養(yǎng)細(xì)胞
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