COX-2與新生鼠腦缺氧缺血的相關性研究及選擇性COX-2抑制劑的應用.pdf_第1頁
已閱讀1頁,還剩70頁未讀, 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內容提供方,若內容存在侵權,請進行舉報或認領

文檔簡介

1、新生兒缺氧缺血性腦損傷(HIBD)是造成新生兒死亡和兒童永久性神經功能障礙的常見原因。其發(fā)病機制尚不完全清楚,因此缺乏有效的防治手段。最近的許多研究提示了環(huán)氧合酶2(COX-2)在HIBD發(fā)生發(fā)展過程中起重要作用。但其作用時相及表達方式尚不清楚。 本實驗采用新生鼠HIBD模型,通過免疫組化方法測定其在HIBD發(fā)生發(fā)展過程中的表達,并應用選擇性COX-2抑制劑NS398進行干預,觀察COX-2免疫細胞化學陽性數、海馬CA1區(qū)神經元

2、數及神經細胞凋亡數表達變化,了解HIBD發(fā)生發(fā)展過程中COX-2的在神經細胞中的表達及時相上的變化,以進一步明確COX-2與HIBD之間的相互作用,并在不同時相及劑量給予選擇性COX-2抑制劑NS398進行干預后研究NS398在新生鼠HIBD中的保護作用,為臨床防治新生兒缺氧缺血性腦病(hypoxic-ischemicencephalopathyHIE)尋求新的途徑。 方法:7日齡(postnatalday7,P7)Wistar

3、大鼠,采用Rice法建立新生鼠HIBD模型,隨機分成正常對照組、缺氧缺血組(HIBD組)、NS398干預組。于缺氧缺血(hypoxia-ischemia,HI)后2、6、24、72小時、7天取腦,其中干預組分別于處置前30分鐘分別給予5、20、40mg/kgNS398進行干預,選擇出其中最為合適的劑量后,再增加HI后2、6小時干預組;HE染色觀察組織病理改變,計數海馬CA1區(qū)神經元數;免疫組化、圖像分析軟件檢測雙側腦半球橫截面積之比以及

4、免疫細胞化學陽性數表達變化;TUNEL法檢測腦組織細胞凋亡。 結果:(1).HI處置后2小時COX-2即見明顯免疫細胞化學陽性表達,在6小時-24小時后最高,并持續(xù)增高到7天后;對照組可見微量免疫細胞化學陽性表達。HIBD組明顯高于對照組(p<0.01)。免疫細胞化學陽性表達細胞主要見于星形膠質細胞及神經元細胞,其中以星形膠質細胞為最明顯;表達部位主見于皮質、海馬位置;血管旁表達最為明顯。(2).三種劑量的NS398干預后,檢測

5、免疫細胞化學陽性表達均較HIBD組明顯下降(p<0.01);5mg/kg給藥組明顯高于20及40mg/kg給藥組(p<0.05);20及40mg/kg給藥組除HIBD7d觀察組p<0.01外未見顯著區(qū)別(p>0.05);術后2、6h給藥組與術前20mg/kg給藥組間于24、72h及7d時陽性表達存在顯著區(qū)別(p<0.05);術后2h給藥組與與術后6h給藥組組間陽性表達無顯著區(qū)別(p>0.05)。(3).HI后患側腦組織橫截面積下降。HI

6、后7d,HIBD組患側與對側腦半球橫截面積之比(L:RAREA)較對照組明顯降低(p<0.01);NS398干預組L:RAREA值明顯高于HIBD組(p<0.01)。(4).HI后7d,HIBD組患側海馬CA1區(qū)細胞膜和核膜完整、核仁清楚的存活神經元數目明顯少于對照組(p<0.01),NS398干預組較HIBD組明顯增多(p<0.01)。(5).HIBD新生鼠患側HI后24hTUNEL染色陽性細胞數較多,至HI后7d明顯減少(p<0.0

7、1)。HI后24h、7d,HIBD組凋亡細胞數均明顯高于對照組(p<0.01)。NS398干預后均較HIBD組明顯減少(p<0.01);24h及7d凋亡細胞數比較:術后6h給藥組>術后2h給藥組>5mg/kg給藥組>20及40mg/kg給藥組(p<0.05),20及40mg/kg給藥組未見顯著區(qū)別(p>0.05)。 結論: 1.7日齡Wistar大鼠,結扎一側頸總動脈后予低氧(8%O2)2.0小時,制成HIBD模型,患側

8、腦組織可見梗死灶及萎縮現象,神經細胞壞死、凋亡,模型成功可行。 2.HIBD新生鼠患側腦組織COX-2免疫陽性細胞數明顯增高,反映新生鼠腦損傷時存在COX-2表達明顯增強;并提示其于損傷后2h即見明顯產生,約6-24h為其表達高峰時期,72h后出現衰減,并持續(xù)至7d;COX-2免疫陽性細胞表達主要為星形膠質細胞,并在小血管周圍明顯增強,說明HIBD時COX-2增高與血管源性的炎癥因子及內皮細胞參與密切相關,可能存在相互協同作用。

9、以上均說明其為神經早期損傷程度的一個重要指標并和損傷的持續(xù)存在相伴隨。 3.NS398能顯著減輕神經元損傷,減少HIBD大鼠患側腦組織凋亡細胞數,并明顯減輕患側腦萎縮程度。說明腹腔注射NS398對HIBD的神經損害具有保護作用。其應用結果同時再次證明了缺氧缺血對發(fā)育中腦組織的病理損傷中,COX-2的大量產生是導致損傷的發(fā)生發(fā)展過程中的一個重要因素。 4.初步證明20mg/kg為NS398應用于新生鼠的合理劑量。并說明其可

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網頁內容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經權益所有人同意不得將文件中的內容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內容的表現方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內容負責。
  • 6. 下載文件中如有侵權或不適當內容,請與我們聯系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評論

0/150

提交評論