腺癌患者纖維支氣管鏡活檢標(biāo)本的表皮生長(zhǎng)因子受體基因檢測(cè).pdf

1、目的：
　　 通過蝎形探針擴(kuò)增阻滯突變系統(tǒng)和免疫組化法，測(cè)定腺癌患者支氣管鏡黏膜活檢標(biāo)本中EGFR基因突變的檢出率以及兩者之間一致性，分析小標(biāo)本EGFR基因突變檢測(cè)的影響因素，并進(jìn)一步探討腺癌患者小標(biāo)本EGFR基因檢測(cè)作為早期診療參考指標(biāo)在臨床應(yīng)用中的意義。
　　 方法：
　　 回顧2009年1月-2011年11月于北京協(xié)和醫(yī)院行支氣管鏡黏膜活檢確診腺癌患者的小活檢標(biāo)本108例，收集所有患者的相關(guān)臨床資料，鏡檢H

2、E切片腫瘤細(xì)胞比例和數(shù)量，應(yīng)用蝎形探針擴(kuò)增阻滯突變系統(tǒng)檢測(cè)小活檢標(biāo)本EGFR突變，應(yīng)用EGFRE746-A750del單抗和21L858R單抗檢測(cè)小活檢標(biāo)本EGFR常見突變的蛋白表達(dá)。
　　 結(jié)果：
　　 108例患者中，92例患者除去臨床診斷所需標(biāo)本后有標(biāo)本剩余可以進(jìn)行基因突變檢測(cè)，檢出率為85.2％。男性、老年、Ⅳ期、支氣管鏡下表現(xiàn)為增生型、取材小于等于4次、中分化肺癌、腫瘤細(xì)胞數(shù)量小于200個(gè)/高倍視野的患者無標(biāo)本

3、剩余的概率更高，但均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。應(yīng)用Scorpions-ARMS法，92例標(biāo)本DNA都可以檢測(cè)到擴(kuò)增曲線，檢測(cè)成功率為100％。33例肺腺癌患者存在EGFR基因突變，突變率為35.8％。其中15例(16.3％)存在19號(hào)外顯子缺失突變(19del)，17例(18.5％)存在21號(hào)外顯子點(diǎn)突變（包括15例21L858R突變和2例21L861Q突變），1例(3.0％)存在20號(hào)外顯子插入突變，1例(3.0％)存在20號(hào)外顯

4、子點(diǎn)突變(20S768I)，1例(3.0％)同時(shí)存在19del和21L858R突變。女性、無吸煙史組突變率更高，但結(jié)果無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，女性較男性發(fā)生21L858R突變的概率更高(P=0.022)，支氣管鏡下為浸潤(rùn)型表現(xiàn)組EGFR突變率更高（P=0.043）。年齡、臨床分期、活檢部位、活檢取樣次數(shù)、是否明確為腺癌、腫瘤分化程度、腫瘤細(xì)胞數(shù)量、腫瘤細(xì)胞比例、免疫組化使用切片數(shù)量與EGFR突變無明顯相關(guān)(P＞0.05)。基因突變

5、組OS明顯長(zhǎng)于野生組總生存期(P=0.036)。E746-A750的陽(yáng)性表達(dá)率為17.8％(16/90)，與ScorpionsARMS法相比，敏感性為73.3％，特異性為93.3％，一致性一般(kappa=0.649);L858R的陽(yáng)性表達(dá)率為21.4％(19/89)，與ScorpionsARMS法相比，敏感性為93.3％,特異性為93.2％，一致性較好(kappa=0.783)。
　　 結(jié)論：
　　 腺癌患者支氣管鏡活