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文檔簡介
1、目的:
EML4/ALK(echinoderm microtubule-associated protein like4/anaplastic lymphoma kinase,棘皮動(dòng)物微管相關(guān)類蛋白4/間變淋巴瘤激酶)融合基因在亞洲NSCLC患者中表達(dá)率在10%左右,我們對(duì)中國肺腺癌患者進(jìn)行ALK基因的檢測,并分析臨床病理表現(xiàn)與支氣管鏡標(biāo)本檢出率的關(guān)系,以明確支氣管鏡小標(biāo)本用于ALK基因檢測時(shí)的檢出率和陽性率,及與提高檢出
2、率相關(guān)的因素。
方法:
收集100例肺腺癌患者臨床資料和支氣管鏡組織標(biāo)本,采用原位免疫熒光雜交和免疫組織化學(xué)兩種方法進(jìn)行ALK基因檢測,并分析臨床病理因素包括:支氣管鏡下表現(xiàn)、活檢部位和數(shù)量、免疫組織化學(xué)切片數(shù)量、病理特征及腫瘤細(xì)胞數(shù)目和比例與小標(biāo)本檢出率間的關(guān)系,同時(shí)比較ALK基因陽性和陰性患者的臨床特征和預(yù)后情況。
結(jié)果:
共收集到108例患者的臨床資料和92例患者的支氣管鏡組
3、織標(biāo)本。中國肺腺癌患者ALK基因表達(dá)率為7.8%(6/77),原位免疫熒光雜交法對(duì)支氣管鏡標(biāo)本的檢出率為71.3%(77/108)。左肺下葉和左主支氣管活檢部位的FISH檢出率高于其他部位(P=0.004)。腫瘤細(xì)胞數(shù)目大于100個(gè)者檢出率更高(P=0.00)。沒有發(fā)現(xiàn)年齡、性別、臨床分期、支氣管鏡下肉眼表現(xiàn)、活檢數(shù)量、病理診斷明確度、分化程度及免疫組織化學(xué)所用切片數(shù)與原位免疫熒光雜交法檢出率之間的關(guān)系檢出。ALK基因在小于50歲者中陽
4、性率更高(P=0.01)。6例ALK基因陽性者全部不吸煙,5例有資料者均為低分化癌,但P>0.1。沒有發(fā)現(xiàn)ALK基因表達(dá)與性別、臨床分期及支氣管鏡下表現(xiàn)等因素的相關(guān)性。2例ALK陽性者生存時(shí)間分別只有4個(gè)月和9個(gè)月。采用D5F3單抗的免疫組織化學(xué)法敏感性50%,特異性100%。
結(jié)論:
FISH法對(duì)支氣管鏡小標(biāo)本ALK基因的檢出率為71.3%,在中國肺腺癌患者中的陽性率為7.8%。左肺下葉和左主支氣管部位的檢
5、出率高于其他部位。腫瘤細(xì)胞數(shù)目大于100個(gè)者檢出率高。ALK基因陽性者年齡更小。D5F3單抗用于免疫組織化學(xué)法的敏感性不高,特異性好。
EML4/ALK融合基因在非小細(xì)胞肺癌患者中的檢測。棘皮動(dòng)物微管相關(guān)類蛋白4/間變性淋巴瘤激酶(echinoderm microtubule-associated proteinlike4/Anaplastic lymphoma kinase,EML4/ALK)為發(fā)生在2號(hào)染色體短臂上的融
6、合基因,特異性表達(dá)于非小細(xì)胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者的腫瘤組織中。其表達(dá)陽性者具有為肺腺癌、不吸煙及與表皮因子生長受體(epidermal growth factor receptor,EGFR)、K-ras基因表達(dá)互斥等特征。EML4/ALK表達(dá)陽性者對(duì)ALK激酶抑制劑的治療有效,因此篩選出EML4/ALK陽性者有重要的臨床意義。目前最常用的為原位免疫熒光雜交法(fluorescei
7、nce in situ hybridization,F(xiàn)ISH),敏感性和特異性高,技術(shù)成熟,有標(biāo)準(zhǔn)試劑盒,但成本較高,標(biāo)本不易保存。聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)法(polymerase chain reaction,PCR)最早用于發(fā)現(xiàn)EML4/ALK基因,但對(duì)標(biāo)本要求高,易出現(xiàn)假陽性,較少用于臨床檢測。免疫組織化學(xué)法(immunohistochemistry,IHC)的標(biāo)本可以長期保存,成本較低,但EML4/ALK蛋白在NSCLC中表達(dá)不高,如若可
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