E2F-1和pRb基因磷酸化狀態(tài)在直腸癌中的表達(dá)及臨床意義.pdf

1、背景和目的：
　　腫瘤的發(fā)生是因?yàn)榧?xì)胞的增殖和分化失常所導(dǎo)致的惡性生長現(xiàn)象。在正常情況下，細(xì)胞的增殖是受兩大類基因來調(diào)控的，一類是正調(diào)控信號(hào)，促進(jìn)細(xì)胞生長和增殖，并阻止其發(fā)生終末分化；另一類為負(fù)調(diào)控信號(hào)，抑制增殖，促進(jìn)分化、成熟和衰老，最后凋亡，如抑癌基因，這兩類信號(hào)在細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生的效應(yīng)相互拮抗，維持平衡，對(duì)正常細(xì)胞的生長、增殖和衰亡進(jìn)行精確地調(diào)控，如果其中一種或它們共同發(fā)生變化，即有可能引起細(xì)胞增殖失控，從而導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生。

2、>　　Rb基因是最早發(fā)現(xiàn)的腫瘤抑制基因，最初發(fā)現(xiàn)于兒童的視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤，它的產(chǎn)物Rb蛋白是細(xì)胞周期的負(fù)性調(diào)節(jié)器。Rb基因位于人13號(hào)染色體q14，含有27個(gè)外顯子，轉(zhuǎn)錄4.7Kb的mRNA，編碼蛋白質(zhì)為P105，定位于核內(nèi)，有磷酸化和非磷酸化兩種形式。非磷酸化形式稱活性型，能促進(jìn)細(xì)胞分化，抑制細(xì)胞增殖。細(xì)胞生長停止，Rb蛋白處于低磷酸化水平，而處于分裂增殖的腫瘤只含有磷酸化型的Rb蛋白；轉(zhuǎn)錄因子E2F家族調(diào)節(jié)細(xì)胞生長和細(xì)胞周期進(jìn)程，E2

3、F-1是這個(gè)家族最具有代表性成員，它能活化基因的轉(zhuǎn)錄包括G1向S期的轉(zhuǎn)錄。Rb基因?qū)δ[瘤的抑制作用與轉(zhuǎn)錄因子（E-2F）有關(guān)，在G0、G1期，低磷酸化型的Rb蛋白與E-2F結(jié)合成復(fù)合物，使E-2F處于非活性化狀態(tài)；在S期，Rb蛋白被磷酸化而與E-2F解離，結(jié)合狀態(tài)的E-2F變成游離狀態(tài)，細(xì)胞進(jìn)入增殖階段。當(dāng)Rb基因發(fā)生缺失或突變，喪失結(jié)合、抑制E-2F的能力，于是細(xì)胞增殖活躍，導(dǎo)致腫瘤發(fā)生。
　　本實(shí)驗(yàn)的目的是用免疫組化的方法在6

4、0例直腸癌及癌旁正常組織中檢測Rb與E2F-1的表達(dá)，并它們與直腸癌的臨床病理學(xué)指標(biāo)之間的關(guān)系，以及它們與直腸腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等臨床病理學(xué)指標(biāo)之間的關(guān)系，以期為揭示癌腫浸潤周圍正常組織及轉(zhuǎn)移的機(jī)制提供線索，也為化療時(shí)降低腫瘤細(xì)胞耐藥及臨床防治直腸癌的復(fù)發(fā)尋求更好的途徑。
　　材料與方法：
　　(1)病例采集于汕頭大學(xué)第二附屬醫(yī)院病理科2008-1—2009-6年直腸腺癌手術(shù)切除石蠟組織標(biāo)本60例，入選病例術(shù)前均無放療史，有完整

5、臨床病理資料，所有病例均經(jīng)病理檢查確診，入選的病例均無家族史。以距癌組織邊緣5cm以上無癌浸潤的癌旁正常粘膜組織作為正常對(duì)照。
　　(2)應(yīng)用免疫組化方法檢測直腸腺癌及癌旁正常粘膜組織中E2F-1和磷酸化的Rb的表達(dá)情況。
　　(3)應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
　　結(jié)果：
　　(1)Rb和E2F-1主要表達(dá)在腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞核和少量細(xì)胞質(zhì)中，也表達(dá)在癌旁正常粘膜組織中。它們在直腸腺癌組織中陽

6、性表達(dá)率均顯著高于對(duì)照組。
　　(2)在直腸腺癌中，Rb與E2F-1在不同分化程度的癌組織中表達(dá)率存在顯著性差異(P<0.05)；Rb與E2F-1的表達(dá)隨Dukes分期增加而增強(qiáng),各期間存在顯著性差異(P<0.05)；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者Rb與E2F-1表達(dá)均高于無轉(zhuǎn)移者,兩者存在顯著性差異(P<0.05)；Rb與E2F-1的表達(dá)與年齡、大體類型無關(guān)。
　　(3)Rb與E2F-1同時(shí)陽性表達(dá)為26例，兩者同時(shí)為陰性表達(dá)為18例，E2

7、F-1陽性且Rb陰性表達(dá)為6例，用統(tǒng)計(jì)學(xué)分析發(fā)現(xiàn)E2F-1表達(dá)與Rb表達(dá)呈正相關(guān)(χ2=12.9，P<0.001)。
　　結(jié)論：
　　(1)在直腸腺癌中Rb和E2F-1參與了腫瘤組織增生、腫瘤組織學(xué)分化、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及腫瘤增殖等過程。
　　(2)Rb、E2F-1在直腸腺癌細(xì)胞中的表達(dá)具有一定的正相關(guān)性，即E2F-1過度表達(dá)，同時(shí)Rb也存在過表達(dá)；因此推測抑制細(xì)胞正常發(fā)生凋亡,兩者間相互作用誘導(dǎo)腫瘤發(fā)生；直腸腺癌組織中R