pRb、E2F-1及P21在多發(fā)性骨髓瘤骨髓組織中的表達(dá)及臨床意義.pdf

1、目的:多發(fā)性骨髓瘤(Multiple myeloma,MM)屬于血液系統(tǒng)疾病，是惡性漿細(xì)胞病中最常見(jiàn)的一種類(lèi)型。其特征是由于單克隆的漿細(xì)胞惡性增殖，分泌大量單克隆的免疫球蛋白，致使正常的多克隆漿細(xì)胞及多克隆免疫球蛋白分泌受到抑制，本周蛋白隨尿液排出，并常伴有廣泛的骨質(zhì)破壞，貧血，反復(fù)感染，高黏滯綜合征，高鈣血癥，腎功能不全等一系列臨床表現(xiàn)，并將引起嚴(yán)重不良后果甚至死亡。近幾年來(lái)，由于醫(yī)療儀器的進(jìn)步、診斷技術(shù)的提高及人口老齡化的增加，多發(fā)

2、性骨髓瘤的發(fā)病率呈上升趨勢(shì)。本病的治療以化療為主，中位生存期為3-5年，隨著蛋白酶體抑制劑等新藥的應(yīng)用，MM的生存期有所延長(zhǎng)，但該病的病因及發(fā)病機(jī)制迄今尚未完全明確，本病目前仍無(wú)法根本治愈。因此對(duì)多發(fā)性骨髓瘤發(fā)生、發(fā)展機(jī)制的研究是十分必要的。
　　真核細(xì)胞的增殖分裂是一個(gè)精細(xì)復(fù)雜的調(diào)控過(guò)程，由細(xì)胞周期執(zhí)行。細(xì)胞內(nèi)存在一系列由調(diào)控因子組成的調(diào)控系統(tǒng)，細(xì)胞周期的有序進(jìn)行就是在一系列調(diào)控因子的保障下完成的，這些調(diào)控因子保障了細(xì)胞內(nèi)復(fù)雜事

3、件精確有序的進(jìn)行，保障前一事件準(zhǔn)確無(wú)誤的完成后才啟動(dòng)后一事件的進(jìn)行。調(diào)節(jié)細(xì)胞周期的機(jī)制分為驅(qū)動(dòng)機(jī)制和監(jiān)控機(jī)制。驅(qū)動(dòng)機(jī)制負(fù)責(zé)細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖，主要有細(xì)胞周期素、細(xì)胞周期依賴(lài)性激酶和各種癌蛋白組成;監(jiān)控機(jī)制在DNA受損或細(xì)胞接受生長(zhǎng)抑制信號(hào)時(shí)阻止細(xì)胞周期的運(yùn)行，并對(duì)受損DNA進(jìn)行修復(fù)，確保DNA復(fù)制和有絲分裂的精確完成，主要由細(xì)胞周期依賴(lài)性激酶抑制劑和抑癌基因組成。細(xì)胞周期調(diào)控異常與腫瘤發(fā)生的關(guān)系十分密切，在各種致癌因素的作用下，細(xì)胞周期調(diào)

4、控因子發(fā)生異常，如突變、異位、擴(kuò)增、缺失等，不能發(fā)揮正常功能，致使細(xì)胞周期失調(diào)，監(jiān)控機(jī)制失活，驅(qū)動(dòng)機(jī)制增強(qiáng)，細(xì)胞無(wú)限制增值，最終形成腫瘤。研究調(diào)控因子在細(xì)胞周期失調(diào)過(guò)程中的變化及作用機(jī)制，可以為腫瘤的診斷、預(yù)后提供新的監(jiān)控指標(biāo)并為腫瘤的治療提供新的靶點(diǎn)。本實(shí)驗(yàn)旨在研究細(xì)胞周期調(diào)控蛋白pRb、E2F-1及P21在MM骨髓活檢組織中的表達(dá)情況及對(duì)MM發(fā)生、發(fā)展的影響。
　　方法:采用免疫組織化學(xué)的方法，測(cè)定49例MM病人和15例營(yíng)養(yǎng)不

5、良性貧血病人骨髓活檢中pRb、E2F-1及P21三種蛋白的表達(dá)情況。將49例MM骨髓活檢標(biāo)本按照ISS分期標(biāo)準(zhǔn)，分成Ⅰ期組（13例）、Ⅱ期組（14例）和Ⅲ期組（22例），查看三種蛋白在各分期組中的表達(dá)情況并分析與MM的關(guān)系。依據(jù)免疫球蛋白分泌類(lèi)型不同將MM組分為IgG型（20例）、IgA型（10例）、輕鏈型（15例）和其它型（4例），觀(guān)察并分析三種蛋白在不同分型中的表達(dá)情況及與MM的關(guān)系。根據(jù)化療后的緩解情況將MM組分成完全緩解(CR)

6、組和未緩解（NR）組，CR組28例，NR組21例，觀(guān)察化療前后三種蛋白表達(dá)情況并分析與MM療效的關(guān)系。
　　結(jié)果:
　　1 pRb表達(dá)情況:49例MM患者骨髓活檢標(biāo)本中有39例表達(dá)陽(yáng)性，陽(yáng)性率為79.59％，15例對(duì)照組中有7例表達(dá)陽(yáng)性，陽(yáng)性率為46.67％，兩組陽(yáng)性率表達(dá)存在明顯差異(P＜0.05)，MM組表達(dá)水平高于對(duì)照組;兩組表達(dá)強(qiáng)度存在差異(P＜0.05)，MM組強(qiáng)于對(duì)照組。在不同分期中，由Ⅰ期組至Ⅲ期組的陽(yáng)性表達(dá)率

7、為53.85％、78.57％、95.45％,三組陽(yáng)性率表達(dá)存在差異(P＜0.05)，隨著MM病理分期的增加pRb的陽(yáng)性表達(dá)率呈增加趨勢(shì);三組表達(dá)強(qiáng)度存在明顯差異(P＜0.05)，由Ⅰ期組至Ⅲ期組呈遞增趨勢(shì)。在不同分型組中，pRb蛋白的陽(yáng)性表達(dá)率無(wú)差異(P＞0.05)，表達(dá)強(qiáng)度亦無(wú)差異(P＞0.05)。治療前后兩組的陽(yáng)性表達(dá)率存在差異(P＜0.05)，NR組高于CR組;治療后兩組表達(dá)強(qiáng)度有差異，NR組高于CR組（P＜0.05），而治療前兩

8、組表達(dá)強(qiáng)度無(wú)差別（P＞0.05）。
　　2 E2F-1表達(dá)情況:49例MM組中有39例表達(dá)陽(yáng)性，陽(yáng)性率為79.60％，15例對(duì)照組中5例表達(dá)陽(yáng)性，陽(yáng)性率為33.33％，兩組比較存在明顯差異(P＜0.05)，MM組陽(yáng)性率表達(dá)明顯高于對(duì)照組;表達(dá)強(qiáng)度差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，MM組高于對(duì)照組。由Ⅰ期組至Ⅲ期組的陽(yáng)性表達(dá)率為61.54％、71.43％、95.45％，陽(yáng)性表達(dá)率比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，隨病理分期增加而增加

9、;三組表達(dá)強(qiáng)度存在差異(P＜0.05)，由Ⅰ期組到Ⅲ期組呈遞增趨勢(shì)。在四種不同分型中陽(yáng)性表達(dá)率及表達(dá)強(qiáng)度均無(wú)差異(P＞0.05)。治療前兩組的表達(dá)強(qiáng)度存在差異（P＜0.05），CR組低于NR組，兩組陽(yáng)性表達(dá)率無(wú)明顯差異（P＞0.05）;而治療后兩組的陽(yáng)性表達(dá)率及表達(dá)強(qiáng)度存在差異(P＜0.05)，NR組較CR組高。
　　3 P21蛋白表達(dá)情況:49例MM組中有29例表達(dá)陽(yáng)性，陽(yáng)性率為59.18％，15例對(duì)照組標(biāo)本中14例表達(dá)陽(yáng)性，陽(yáng)

10、性率為93.33％，兩組比較存在差異（P＜0.05），MM組低于對(duì)照組;兩組表達(dá)強(qiáng)度存在差異（P＜0.05），MM組低于對(duì)照組。由Ⅰ期組至Ⅲ期組的陽(yáng)性表達(dá)率為84.62％、64.29％、40.91％,陽(yáng)性率表達(dá)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，隨著病理分期的增加，P21呈遞減趨勢(shì);三組表達(dá)強(qiáng)度比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），呈遞減趨勢(shì)。在不同分型中P21陽(yáng)性率和表達(dá)強(qiáng)度無(wú)明顯差異(P＞0.05)。治療前后兩組陽(yáng)性表達(dá)率有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P

11、＜0.05），CR組高于NR組;兩組的表達(dá)強(qiáng)度無(wú)差異(P＞0.05)。
　　4相關(guān)性分析:pRb與P21蛋白在MM骨髓活檢中呈負(fù)相關(guān)，與E2F-1呈正相關(guān)性;P21蛋白與E2F-1呈負(fù)相關(guān)性。
　　結(jié)論:
　　1 pRb在MM中呈高表達(dá)，并隨MM的病理分期增加呈增加趨勢(shì)，治療前后CR組低于NR組，與疾病分型無(wú)顯著相關(guān)。pRb在MM的發(fā)生中起促進(jìn)作用，表達(dá)的高低可以反映疾病的進(jìn)展?fàn)顟B(tài)。
　　2 E2F-1蛋白在MM