內(nèi)毒素對(duì)牙齦成纖維細(xì)胞分泌基質(zhì)金屬蛋白酶的影響.pdf

1、河北醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文內(nèi)毒素對(duì)牙齦成纖維細(xì)胞分泌基質(zhì)金屬蛋白酶的影響姓名：于艷玲申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：口腔臨床醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師：許麗華楊冬茹20090301中文摘要液，每孔200ul均勻接種于96孔板，用不同濃度的內(nèi)毒素(O1u#ml，lug／ml，10u∥ml，100u#mlLPS)刺激牙齦成纖維細(xì)胞，運(yùn)用MTT比色檢測(cè)牙齦成纖維細(xì)胞在不同濃度內(nèi)毒素刺激下的相對(duì)增殖率和生長(zhǎng)抑制率，從而觀察內(nèi)毒素對(duì)牙齦成纖維細(xì)胞在生長(zhǎng)及增殖活性方面的影

2、響。324孔板內(nèi)以每孔2104的細(xì)胞密度將第四代牙齦成纖維細(xì)胞接種于蓋玻片上，24h細(xì)胞貼壁后棄原培養(yǎng)液用2％DMEM培養(yǎng)液靜息24h，實(shí)驗(yàn)組換含10u∥mlLPS的2％DMEM培養(yǎng)，對(duì)照組則不加內(nèi)毒素刺激只用2％DMEM培養(yǎng)，然后分別在不同的時(shí)間段(Oh、4h、8h、12h、24h)收集牙齦成纖維細(xì)胞的細(xì)胞爬片，冰丙酮固定，運(yùn)用細(xì)胞免疫組織化學(xué)染色方法SP法檢測(cè)基質(zhì)金屬蛋白酶1和3(MMP1，3)在HGFs中表達(dá)的量，從而觀察內(nèi)毒素對(duì)

3、牙齦成纖維細(xì)胞分泌基質(zhì)金屬蛋白酶的影響。結(jié)果：1細(xì)胞免疫組織化學(xué)染色結(jié)果顯示：體外培養(yǎng)的牙齦成纖維細(xì)胞均為抗波形絲蛋白染色陽(yáng)性，陽(yáng)性部位位于胞漿；抗角蛋白陰性，證實(shí)細(xì)胞來(lái)源于中胚層，符合牙齦成纖維細(xì)胞的生物學(xué)特征。第四代牙齦成纖維細(xì)胞運(yùn)用MTT法繪制生長(zhǎng)曲線結(jié)果顯示：牙齦成纖維細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線呈典型的“S”形，經(jīng)歷了潛伏期、對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期和平臺(tái)期三個(gè)生長(zhǎng)階段。2不同濃度內(nèi)毒素刺激牙齦成纖維細(xì)胞MTT結(jié)果顯示：與陰性對(duì)照組相比，第一天O1u∥m