原花青素對氨基脲染毒小鼠肝腎損傷的影響.pdf

1、目的:
　　1、觀察原花青素(PC)對氨基脲(SEM)染毒小鼠肝腎損傷的影響及添加原花青素前后效果對比;
　　2、探討原花青素(PC)對氨基脲(SEM)染毒小鼠肝腎損傷的的保護(hù)機(jī)制,為原花青素進(jìn)一步開發(fā)利用提供理論依據(jù)。
　　方法:
　　80只清潔級健康成年昆明種(KM)小鼠,雌雄各半,隨機(jī)分為8組:溶劑對照組、SEM染毒組、SEM染毒+低劑量PC保護(hù)組、SEM染毒+中劑量PC保護(hù)組、SEM染毒+高劑量PC保護(hù)組

2、、低劑量PC保護(hù)+SEM染毒組、中劑量PC保護(hù)+SEM染毒組、高劑量PC保護(hù)+SEM染毒組;溶劑對照組灌胃去離子水,每天一次,連續(xù)6周;SEM染毒組,前2周灌胃56.25 mg/kg·bwSEM溶液,后4周灌胃去離子水;SEM染毒后加低、中、高劑量PC保護(hù)組,前2周均灌胃56.25 mg/kg·bwSEM溶液,后4周分別灌胃100mg/kg·bw、200mg/kg·bw、400mg/kg·bwPC溶液;低、中、高劑量PC保護(hù)后加SEM染

3、毒組,前4周分別灌胃100mg/kg·bw、200mg/kg·bw、400mg/kg·bwPC溶液,后2周灌胃56.25 mg/kg·bwSEM溶液;以上各組溶液均用去離子水作溶劑,灌胃體積為10ml/kg·bw,試驗期間連續(xù)灌胃,每日一次。末次灌胃24h后,眼眶靜脈叢取血后處死小鼠,取肝臟、腎臟計算其臟器系數(shù);常規(guī)病理學(xué)切片,HE染色觀察肝臟和腎臟組織形態(tài)學(xué)變化;全自動生化分析儀檢測血清ALT、AST、GGT、UREA、CRE、UA的

4、含量;制備肝臟和腎臟勻漿,采用試劑盒測定MDA、GSH含量和SOD、GSH-PX活性。
　　結(jié)果:
　　1、SEM染毒組小鼠體重增長低于溶劑對照組(P<0.05);低、中、高劑量PC后保護(hù)組小鼠體重增長高于SEM染毒組(P>0.05);中、高劑量PC前保護(hù)組小鼠體重高于同劑量PC后保護(hù)組,其差別有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);
　　2、SEM染毒組小鼠肝、腎臟器系數(shù)高于溶劑對照組(P<0.05);中、高劑量PC后保護(hù)組小

5、鼠肝臟臟器系數(shù)低于SEM染毒組(P<0.05);高劑量PC后保護(hù)組小鼠腎臟臟器系數(shù)低于SEM染毒組(P<0.05);中、高劑量 PC前保護(hù)組小鼠肝臟、腎臟臟器系數(shù)均低于同劑量PC后保護(hù)組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);
　　3、肝、腎組織病理形態(tài)學(xué)觀察:肝組織形態(tài)學(xué)改變:SEM染毒組,肝細(xì)胞變性壞死嚴(yán)重,肝索排列紊亂,胞漿疏松化和氣球樣變并伴有大量炎性細(xì)胞浸潤;PC后保護(hù)組,肝臟組織形態(tài)較SEM染毒組有所改善,肝細(xì)胞變性壞死程

6、度明顯減輕;PC前保護(hù)保護(hù)組隨PC劑量的增加,肝細(xì)胞壞死、脂肪變性、細(xì)胞水腫及炎性浸潤等病理變化明顯改善。
　　腎組織形態(tài)學(xué)改變:SEM染毒組,可見系膜細(xì)胞中、重度增生,系膜區(qū)增寬,腎小管內(nèi)出現(xiàn)蛋白管型,腎小管上皮細(xì)胞呈玻璃樣變性,并見大量巨噬細(xì)胞浸潤;PC后保護(hù)組,腎組織形態(tài)特點(diǎn)較SEM染毒組有所改善,腎小管上皮細(xì)胞變性壞死程度明顯減輕;PC前保護(hù)組,隨著PC劑量的增加,腎小球壞死、腎小管上皮細(xì)胞變性及炎性浸潤等病理改變明顯改善

7、,僅見部分炎癥細(xì)胞浸潤。
　　4、SEM染毒組小鼠血清 ALT、AST、GGT含量高于溶劑對照組(P<0.05);中、高劑量PC后保護(hù)組小鼠血清ALT、AST、GGT含量低于SEM染毒組(P<0.05);中、高劑量PC前保護(hù)組小鼠血清ALT、AST、GGT水平低于同劑量PC后保護(hù)組,差別有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
　　5、SEM染毒組小鼠血清UREA、CRE、UA含量高于溶劑對照組(P<0.05),中、高劑量PC后保護(hù)組

8、小鼠血清UREA、CRE、UA含量低于SEM染毒組(P<0.05);中、高劑量PC后保護(hù)組小鼠血清UREA、CRE、UA含量低于同劑量PC后保護(hù)組,差別有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
　　6、SEM染毒組小鼠肝臟SOD活性、MDA含量高于溶劑對照組(P<0.05);中、高劑量PC后保護(hù)組與SEM染毒組比,小鼠肝臟SOD活性升高,MDA含量降低(P<0.05);中、高劑量PC前保護(hù)組小鼠血清SOD活性升高,MDA含量降低與同劑量PC

9、后保護(hù)組比較(P<0.05);與溶劑對照組比較SEM染毒組小鼠肝組織GSH含量升高,GSH-Px活力下降(P<0.05);與SEM染毒組比,中、高劑量PC后保護(hù)組小鼠肝組織勻漿中的GSH含量降低,GSH-Px活力升高(P<0.05);中、高劑量PC前保護(hù)組與同劑量PC后保護(hù)組相比小鼠肝組織GSH含量降低, GSH-Px活力升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
　　7、與溶劑對照組比,SEM染毒組小鼠腎臟SOD、GSH-Px活性

10、下降、GSH、MDA增高(P<0.05);與SEM染毒組比,中、高劑量PC后保護(hù)組腎臟GSH-Px、SOD活性升高,GSH、MDA含量降低(P<0.05);中、高劑量PC前保護(hù)組與同劑量PC后保護(hù)組比,GSH-Px、SOD活性升高,GSH、MDA含量下降,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),
　　結(jié)論:
　　1.一定劑量(56.25 mg/kg·bw)氨基脲對昆明種小鼠肝腎具有亞慢性毒性作用;
　　2.200-400mg