原花青素對小鼠視網膜光化學損傷的保護作用.pdf

1、目的:觀察小鼠視網膜光化學損傷后病理形態(tài)及凋亡相關指標的改變，探討原花青素(proanthocyanidins，PC)對小鼠視網膜光化學損傷(retinal photochemicai injury)的保護和拯救作用。
　　 方法:
　　 1.昆明小鼠50只，隨機分為A組(正常對照組)、B組(光化學損傷模型組)和C組給藥組[分為C1組(僅造模前給藥組)，C2組(造模前后給藥組)和C3組(僅造模后給藥組)]，每組均有10只

2、小鼠。
　　 2.造模方法：自制光損傷箱，箱內6個面均裝有36 W的冷光源熒光燈共20個，光照度為(16473.5±402.8)1x。動物分光照前先暗適應12 h，之后光照12 h，連續(xù)3個循環(huán)，總光照時間為36 h。在光照全過程中，箱內溫度保持在28～32℃。C組小鼠按400mg/kg灌胃給原花青素混懸液；所有動物于造模后第7天處死并取出眼球行石蠟包埋切片。
　　 3.部分石蠟切片進行HE染色，光鏡下觀察視網膜形態(tài)學改

3、變，并對視網膜外核層厚度進行測量。
　　 4.部分石蠟切片進行凋亡原位檢測(TUNEL法)標記凋亡細胞，并計算凋亡指數(shù)(AI)。
　　 5.統(tǒng)計學分析用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進行，計算各組平均值(x)和標準差S，兩組間比較用方差分析。
　　 結果:
　　 1.正常小鼠視網膜內外節(jié)排列整齊，分界清晰，外核層排列緊密，染色均勻，細胞形態(tài)規(guī)整。
　　 2.視網膜光化學損傷模型成功建立，HE染色形態(tài)學觀

4、察發(fā)現(xiàn)：視網膜各層結構疏松，內外節(jié)破壞嚴重，外核層明顯變薄，僅留1～2層。
　　 3.給藥組中，C2組視網膜十層結構較完整，分界較清晰，外核層細胞排列基本整齊，內外節(jié)輕度腫脹。C1組視網膜內外節(jié)輕度腫脹，間隙增寬，外核層間隙稍增寬。C3組視網膜結構較C1組內外節(jié)腫脹明顯，間隙增寬，外核層細胞部分受到損害，排列紊亂。
　　 4.TUNEL染色正常小鼠視網膜呈陰性；光化學損傷組在外核層有大量陽性著染細胞核，原花青素給藥組僅見