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文檔簡介
1、目的:
1.觀察不同劑量反式脂肪酸(Trans Fatty Acids,TFA)對雄性小鼠的生殖毒性作用;
2.初步探討原花青素(proanthocyanidins,PC)對反式脂肪酸致雄性小鼠生殖損傷保護效果及可能機制,為評價PC對TFA致生殖損傷的保護作用提供實驗依據。
方法:
以TFA和PC為受試物,以健康成年昆明(KM)種雄性小鼠為實驗對象。將96只小鼠隨機分為8組:對照組、低、中、高劑量
2、TFA染毒組、PC對照組、L-TFA+PC保護組、M-TFA+PC保護組、H-TFA+PC保護組;3個劑量TFA染毒組:分別按低(TFA25 mg/kg)、中(TFA50 mg/kg)、高(TFA100 mg/kg)TFA染毒劑量給小鼠灌胃90天,隔天一次,上午灌胃TFA、下午灌胃等量的生理鹽水;3個PC保護組:染毒劑量、時間同染毒組,上午灌胃TFA、下午每組灌胃同劑量的(100mg/kg)PC;對照組灌胃生理鹽水、PC組灌胃(100m
3、g/kg)PC。各組動物灌胃體積為10ml/kg.bw。實驗結束后取血處死動物,取睪丸、附睪和腎臟分別稱重并計算其臟器系數(shù);常規(guī)病理學切片,HE染色觀察睪丸病理形態(tài)變化;光學顯微鏡下觀察精子質量的改變;全自動生化分析儀檢測血清T、LH、FSH水平;試劑盒測定MDA、SOD、GSH-Px酶的活性。
結果:
1.中、高劑量TFA染毒組小鼠末體重及凈增體重明顯高于對照組,經PC保護的高劑量TFA染毒組動物的凈增體重低于同劑
4、量染毒組(P<0.05)。
2.高劑量TFA染毒組小鼠睪丸臟器系數(shù)低于對照組,經PC保護的高劑量TFA染毒組睪丸臟器系數(shù)低于同劑量染毒組(P<0.05);PC對其它各染毒組睪丸、附睪及腎臟臟器系數(shù)影響不大,差異無顯著性(P>0.05)。
3.睪丸病理形態(tài)顯示:對照組小鼠睪丸曲細精管完整,上皮細胞層次正常,管腔中見到大量成熟精子等;TFA染毒組睪丸組織基底膜模糊不清、核間隙增寬,部分管壁脫落缺失,腔內未見精子等;給予P
5、C保護后,睪丸組織形態(tài)較TFA染毒組有所改善,以低、中劑量TFA染毒組改善較明顯,睪丸間質有所縮小,間質細胞顆粒減少,各級生精細胞數(shù)量有所增加,曲細精管上皮細胞層次趨向正常,腔內精子較多。
4.與對照組比較,中、高劑量TFA染毒組小鼠精子數(shù)量、精子存活率、精子活力均降低,畸形率增加(P<0.05);經PC保護的中、高劑量TFA染毒組精子數(shù)量、精子存活率、精子活力均有不同程度的增加,畸形率減少與相同劑量染毒組比較,差別有顯著性(
6、P<0.05);精子畸形以尾折疊、卷尾、尾體彎曲、不規(guī)則精子、雙尾精子為主。
5.高劑量TFA染毒組小鼠血清FSH、LH、T值均低于對照組(P<0.05);經PC保護的高劑量TFA染毒組FSH、LH、T值均較同劑量的染毒組有不同程度的增加,差別有顯著性(P<0.05)。
6.高劑量 TFA染毒組小鼠睪丸 LDH-X、GGT的活性均低于對照組(P<0.05);經PC保護高劑量TFA染毒組LDH-X、GGT活性均較同劑量
7、的染毒組有不同程度的增加(恢復),差別有顯著性(P<0.05),其它各組對其酶的活性影響不明顯(P>0.05)。
7.與對照組比較,中、高劑量 TFA染毒組小鼠睪丸 MDA含量增加,SOD、GSH-Px活性降低(P<0.05);高劑量TFA染毒組CAT活性低于對照組(P<0.05);經PC保護的高劑量TFA染毒組小鼠睪丸SOD、GSH-Px、CAT活性均較同劑量的染毒組增加(P<0.05);PC保護的中劑量TFA染毒組睪丸GS
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