蓮房原花青素對(duì)口腔癌的藥理作用及其機(jī)制研究.pdf

1、縮略語(yǔ)表縮寫名LSPCMTXKBL929MTT中文名蓮房原花青素甲氨蝶吟人口腔表皮樣癌小鼠成纖維細(xì)胞二甲基噬哇二苯基四哇澳鹽HETEMFCMFITCCDMDAGSHPXTSOD英文全名ProcyanidinsofLotusSee即odMethotrexateHumanepidermoidcarcinomaMousefibrosarcomacell3(45dimethylthiazol2yl)25diphenyltetrazoliumbr

2、omideHematoxylinEosinTransmissionelectronmicroscopyFlowcytometryPropidiumiodineFluoresceinisomerthiocyanateCadherins910dimethyl12benzanthraceneMaleicDialdehydeGlutathioneperoxidaseTotalSuperoxidedismutase蘇木精一伊紅透射電鏡流式細(xì)胞術(shù)碘

3、化丙陡異硫氰酸熒光素鈣豁附素二甲基苯花蕙丙二醛谷朧甘膚過(guò)氧化物酶總超氧化物歧化酶蓮房原花青素對(duì)口腔癌的藥理作用及其機(jī)制研究生長(zhǎng)，但在100300tgmL時(shí)不影響其生長(zhǎng)，而在50PgmL時(shí)又顯著的抑制了其生長(zhǎng)，提示LSPC對(duì)癌細(xì)胞的毒作用和對(duì)正常細(xì)胞的保護(hù)作用有一個(gè)最佳的劑量范圍。綜合兩者，可得LSPC對(duì)KB細(xì)胞最佳作用濃度為2004001xgmL.2.LSPC對(duì)KB細(xì)胞形態(tài)的影響采用相差顯微鏡、HE常規(guī)染色光學(xué)顯微鏡和透射電鏡觀察了LS

4、PC對(duì)KB細(xì)胞作用引起的形態(tài)變化。用不同濃度的LSPC作用KB細(xì)胞后，相差顯微鏡下可見細(xì)胞變圓、變小，細(xì)胞膜透亮，細(xì)胞漂浮，表明細(xì)胞分裂減少，生長(zhǎng)受到抑制。HE常規(guī)染色光鏡下可見細(xì)胞核向細(xì)胞膜邊集、突出，細(xì)胞皺縮、變圓、變小，出現(xiàn)碎核，表明LSPC對(duì)KB細(xì)胞有細(xì)胞毒作用，且細(xì)胞呈現(xiàn)凋亡現(xiàn)象。透射電鏡下可見橋粒結(jié)構(gòu)消失，細(xì)胞萎縮，胞內(nèi)出現(xiàn)大量的空泡，染色質(zhì)邊集，斷裂等，出現(xiàn)凋亡的典型特征。以上三者結(jié)果均表明，LSPC可顯著的抑制KB細(xì)胞的

5、生長(zhǎng)、改變KB細(xì)胞形態(tài)，并誘導(dǎo)KB細(xì)胞凋亡。3.LSPC誘導(dǎo)KB細(xì)胞凋亡作用研究運(yùn)用流式細(xì)胞儀，采用PI染色法和FITCannexinVPI法，觀察不同濃度LSPC誘導(dǎo)KB細(xì)胞凋亡作用，并通過(guò)檢測(cè)KB細(xì)胞表面蛋白CD95表達(dá)量探討LSPC誘導(dǎo)KB細(xì)胞凋亡途徑。PI染色法結(jié)果顯示，LSPC濃度在20即gmL300tgmL40即gmL時(shí)，分別有7.5%8.3%17.5%KB細(xì)胞處于凋亡后期或己經(jīng)壞死或是兩者的混合FITCannexinVPI

6、法結(jié)果顯示，當(dāng)LSPC濃度在200ugmL時(shí)，部分KB細(xì)胞處于凋亡早期，而LSPC濃度在300ggmL400pgML時(shí)，部分KB細(xì)胞處于凋亡后期或己經(jīng)壞死或兩者皆有。表明LSPC可誘導(dǎo)KB細(xì)胞凋亡，同時(shí)也可引起KB細(xì)胞壞死，且呈劑量效應(yīng)關(guān)系.但隨著LSPC濃度的增加，CD95蛋白表達(dá)量呈下降趨勢(shì)，即KB細(xì)胞可由Fas途徑引起凋亡的細(xì)胞數(shù)減少，與LSPC可誘導(dǎo)KB細(xì)胞凋亡作用結(jié)果不一致。這可能是LSPC與細(xì)胞表面蛋白CD95結(jié)合，從而阻礙