不同方法處理的牛頸靜脈帶瓣管道免疫學(xué)研究.pdf

1、背景：牛頸靜脈帶瓣管道(BJVC)是近年研究并應(yīng)用于臨床的帶瓣管道，作為帶瓣管道有著巨大的潛在價(jià)值。作為異種生物材料，牛頸靜脈必須經(jīng)過充分交聯(lián)鞣制以去除其免疫原性。戊二醛作為一種經(jīng)典的交聯(lián)鞣制劑，已用于臨床多年，因具有滅菌、去除組織免疫原性作用可靠等特點(diǎn)而得到普遍認(rèn)同。大多數(shù)生物材料的交聯(lián)鞣制均以戊二醛為首選，但經(jīng)戊二醛交聯(lián)鞣制的生物材料存在易鈣化易衰敗等缺陷。因此須研究發(fā)展其他交聯(lián)技術(shù)。多聚環(huán)氧化合物及光氧化法處理的生物材料因具有良好

2、的生物相容性，無細(xì)胞毒性等優(yōu)點(diǎn)被認(rèn)為是具有良好應(yīng)用前景的兩種新型交聯(lián)技術(shù)。研究表明含有膠原蛋白的生物材料免疫原性與其處理方法有關(guān)，但用多聚環(huán)氧化合物(PC)、戊二醛(GA)、光氧化(DMP)交聯(lián)鞣制BJVC后是否還存在免疫原性及其大小有無差別，尚未見報(bào)道。 目的：研究牛頸靜脈帶瓣管道經(jīng)不同方法交聯(lián)后免疫原性變化方法：牛頸靜脈隨機(jī)分為4組：新鮮牛頸靜脈為對照組，PC交聯(lián)組、GA交聯(lián)組、DMP交聯(lián)組。牛頸靜脈分別勻漿提取抗原，再與完

3、全弗氏佐劑混合制成復(fù)合乳劑抗原后免疫新西蘭大白兔，雙向免疫擴(kuò)散法測定兔血清抗體滴度。取新鮮牛頸靜脈免疫抗血清，采用免疫印跡法(Westernblot)體外檢測不同方法交聯(lián)后的牛頸靜脈帶瓣管道免疫原性。 結(jié)論：經(jīng)PC、GA、DMP適當(dāng)交聯(lián)處理的牛頸靜脈免疫原性均顯著性降低，PC和DMP兩種新型交聯(lián)技術(shù)能與GA交聯(lián)一樣有效地滅活免疫原性，具有良好的應(yīng)用前景。 第二部分不同交聯(lián)方法處理的牛頸靜脈移植后免疫學(xué)比較目的：經(jīng)PC、G

4、A、DMP適當(dāng)交聯(lián)處理的牛頸靜脈免疫原性均顯著性降低，但臨床觀察及動物實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明經(jīng)典的戊二醛交聯(lián)沒有終止同種移植和異種移植后的免疫應(yīng)答。本實(shí)驗(yàn)探討不同交聯(lián)方法處理的帶瓣牛頸靜脈(BJVC)移植后免疫學(xué)變化，為制備BJVC和臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。 方法：以PC、DMP化學(xué)改性的牛頸靜脈帶瓣管道為研究對象，建立犬重建右心室—肺動脈連接動物模型；觀察9-12個(gè)月，通過免疫學(xué)及組織學(xué)方法，研究其免疫反應(yīng)。 結(jié)論：經(jīng)PC、GA交

5、聯(lián)處理的BJVC帶瓣管道仍具有一定的免疫原性，移植后仍存在細(xì)胞免疫和體液免疫，用DMP交聯(lián)處理的BJVC帶瓣管道具有不引起明顯的免疫反應(yīng)的特點(diǎn)，是一種較好的交聯(lián)處理方法。 第三部分牛頸靜脈帶瓣管道臨床應(yīng)用研究目的：目前還沒有一種重建右室流出道的理想材料，同種帶瓣管道來源困難，有時(shí)尺寸大小不合適，還存在退化衰敗的問題，本研究旨在評估應(yīng)用新的替代品—戊二醛交聯(lián)的牛頸靜脈帶瓣管道或血管片重建右室流出道治療復(fù)雜先天性心臟病的近期臨床效果

6、及免疫反應(yīng)大小。 方法：2003年10月～2005年1月共應(yīng)用牛頸靜脈帶瓣管道(BJVC)治療復(fù)雜先天性心臟病5例。應(yīng)用牛頸靜脈帶瓣血管片(BJVCP)重建重癥TOF右心室流出道13例(A組)，并與同期自體心包跨瓣環(huán)加寬13例(B組)進(jìn)行比較。同時(shí)通過免疫學(xué)方法，研究其免疫排斥反應(yīng)。 結(jié)論：1、牛頸靜脈帶瓣管道用于重建右室—肺動脈連接，近期血流動力性能良好，遠(yuǎn)期血流動力學(xué)性能尚待進(jìn)一步觀察研究。 2、牛頸靜脈帶瓣