不同方法處理的牛頸靜脈帶瓣管道免疫學研究.pdf

1、背景：牛頸靜脈帶瓣管道(BJVC)是近年研究并應(yīng)用于臨床的帶瓣管道，作為帶瓣管道有著巨大的潛在價值。作為異種生物材料，牛頸靜脈必須經(jīng)過充分交聯(lián)鞣制以去除其免疫原性。戊二醛作為一種經(jīng)典的交聯(lián)鞣制劑，已用于臨床多年，因具有滅菌、去除組織免疫原性作用可靠等特點而得到普遍認同。大多數(shù)生物材料的交聯(lián)鞣制均以戊二醛為首選，但經(jīng)戊二醛交聯(lián)鞣制的生物材料存在易鈣化易衰敗等缺陷。因此須研究發(fā)展其他交聯(lián)技術(shù)。多聚環(huán)氧化合物及光氧化法處理的生物材料因具有良好

2、的生物相容性，無細胞毒性等優(yōu)點被認為是具有良好應(yīng)用前景的兩種新型交聯(lián)技術(shù)。研究表明含有膠原蛋白的生物材料免疫原性與其處理方法有關(guān)，但用多聚環(huán)氧化合物(PC)、戊二醛(GA)、光氧化(DMP)交聯(lián)鞣制BJVC后是否還存在免疫原性及其大小有無差別，尚未見報道。 目的：研究牛頸靜脈帶瓣管道經(jīng)不同方法交聯(lián)后免疫原性變化方法：牛頸靜脈隨機分為4組：新鮮牛頸靜脈為對照組，PC交聯(lián)組、GA交聯(lián)組、DMP交聯(lián)組。牛頸靜脈分別勻漿提取抗原，再與完

3、全弗氏佐劑混合制成復合乳劑抗原后免疫新西蘭大白兔，雙向免疫擴散法測定兔血清抗體滴度。取新鮮牛頸靜脈免疫抗血清，采用免疫印跡法(Westernblot)體外檢測不同方法交聯(lián)后的牛頸靜脈帶瓣管道免疫原性。 結(jié)論：經(jīng)PC、GA、DMP適當交聯(lián)處理的牛頸靜脈免疫原性均顯著性降低，PC和DMP兩種新型交聯(lián)技術(shù)能與GA交聯(lián)一樣有效地滅活免疫原性，具有良好的應(yīng)用前景。 第二部分不同交聯(lián)方法處理的牛頸靜脈移植后免疫學比較目的：經(jīng)PC、G

4、A、DMP適當交聯(lián)處理的牛頸靜脈免疫原性均顯著性降低，但臨床觀察及動物實驗結(jié)果表明經(jīng)典的戊二醛交聯(lián)沒有終止同種移植和異種移植后的免疫應(yīng)答。本實驗探討不同交聯(lián)方法處理的帶瓣牛頸靜脈(BJVC)移植后免疫學變化，為制備BJVC和臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。 方法：以PC、DMP化學改性的牛頸靜脈帶瓣管道為研究對象，建立犬重建右心室—肺動脈連接動物模型；觀察9-12個月，通過免疫學及組織學方法，研究其免疫反應(yīng)。 結(jié)論：經(jīng)PC、GA交

5、聯(lián)處理的BJVC帶瓣管道仍具有一定的免疫原性，移植后仍存在細胞免疫和體液免疫，用DMP交聯(lián)處理的BJVC帶瓣管道具有不引起明顯的免疫反應(yīng)的特點，是一種較好的交聯(lián)處理方法。 第三部分牛頸靜脈帶瓣管道臨床應(yīng)用研究目的：目前還沒有一種重建右室流出道的理想材料，同種帶瓣管道來源困難，有時尺寸大小不合適，還存在退化衰敗的問題，本研究旨在評估應(yīng)用新的替代品—戊二醛交聯(lián)的牛頸靜脈帶瓣管道或血管片重建右室流出道治療復雜先天性心臟病的近期臨床效果

6、及免疫反應(yīng)大小。 方法：2003年10月～2005年1月共應(yīng)用牛頸靜脈帶瓣管道(BJVC)治療復雜先天性心臟病5例。應(yīng)用牛頸靜脈帶瓣血管片(BJVCP)重建重癥TOF右心室流出道13例(A組)，并與同期自體心包跨瓣環(huán)加寬13例(B組)進行比較。同時通過免疫學方法，研究其免疫排斥反應(yīng)。 結(jié)論：1、牛頸靜脈帶瓣管道用于重建右室—肺動脈連接，近期血流動力性能良好，遠期血流動力學性能尚待進一步觀察研究。 2、牛頸靜脈帶瓣