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1、目的:用動(dòng)物皮下包埋的模型,并且用戊二醛鞣制的牛頸靜脈帶瓣管道作為對(duì)照,來研究戊二醛結(jié)合肝素鞣制的牛頸靜脈帶瓣管道具有良好的抗鈣化能力和抗衰老能力。 方法:牛頸靜脈帶瓣管道的制備,選2-3歲當(dāng)天宰殺的牛,在清潔狀況下取牛頸靜脈全段,用大量的自來水沖洗靜脈壁和腔內(nèi),放入4℃生理鹽水冷容器中帶回實(shí)驗(yàn)室,及時(shí)進(jìn)行解剖,去除血管鞘膜和外面的脂肪組織。然后分為二組:A組:浸入0.1%魚精蛋白內(nèi)1小時(shí),生理鹽水沖洗,再放入0.5%戊二醛中固
2、定2小時(shí),溫度25℃,生理鹽水沖洗,再浸入1%肝素鹽水中24小時(shí),溫度25℃,生理鹽水沖洗,然后0.5%戊二醛保存。B組:直接浸入0.5%戊二醛中固定保存。 選擇試驗(yàn)兔12只,體重2Kg±0.8Kg,隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組(A組)和對(duì)照組(B組),每組6只。把制備好的牛頸靜脈帶瓣管道切成1×1cm大小的片。分別把A組VBJ。VC片包埋在試驗(yàn)組的兔的背部皮下,B組VBJVC片包埋在對(duì)照組兔的背部皮下。90天后取出VBJVC片。進(jìn)行鈣的定量
3、分析和形態(tài)學(xué)檢查。形態(tài)學(xué)分析包括光鏡下HE染色和gon-Kossa染色,并且進(jìn)行鈣化點(diǎn)的比較。鈣定量分析用原子分光光度計(jì)測(cè)量,通過鈣標(biāo)準(zhǔn)曲線(鈣濃度-吸光度標(biāo)準(zhǔn)曲線)測(cè)得兩組樣本鈣含量的數(shù)據(jù)進(jìn)行比較。所得的數(shù)據(jù)(X±S)用SASS8.02統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行重復(fù)測(cè)定的方差分析,結(jié)果用F值,P值表示,P<0.05時(shí)認(rèn)為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)果:比較戊二醛結(jié)合肝素鞣制的VB5VC(A組)較之傳統(tǒng)的單純的用戊二醛鞣制的VBJVC(B組),其結(jié)果
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