血液灌流對(duì)急性百草枯中毒兔腎損傷的干預(yù)研究.pdf

1、目的:
　　研究血液灌流技術(shù)(Hemoperfusion，HP)對(duì)百草枯(Paraquat，PQ)中毒兔腎損傷的干預(yù)作用及機(jī)制。
　　方法:
　　1.將60只普通級(jí)雄性日本大耳白兔隨機(jī)分為4組，正常對(duì)照組（6只，生理鹽水灌胃），空白對(duì)照組（18只，生理鹽水灌胃后1小時(shí)給予治療2小時(shí)），PQ染毒組（18只，20％PQ溶液50mg/kg灌胃），HP治療組（18只，百草枯灌胃后1小時(shí)給予HP治療2小時(shí)）。后三組兔分為3個(gè)觀察

2、時(shí)間小組(1、3、7天)，每組6只。經(jīng)不同處理后，正常對(duì)照組于第1天，后三組分別于第1、3、7天，耳緣靜脈取血，離心后取上清，麻醉處死，并留取腎組織，-80℃保存。
　　2.觀察不同處理組兔的行為學(xué)方面的變化。
　　3.觀察不同處理組兔腎組織的病理學(xué)改變。
　　4.化學(xué)比色法檢測(cè)血漿Scr和BUN，觀察不同處理組兔腎功能指標(biāo)的變化。
　　5.化學(xué)比色法檢測(cè)腎組織勻漿SOD、GSH-px活力和MDA含量的變化，雙抗

3、夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)HO-1、iNOS的含量，觀察兔腎組織的氧化損傷情況。
　　6.ELISA檢測(cè)TNF-α、IL-6水平變化，逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)法(RT-PCR)和蛋白印跡法(Western blot)分別檢測(cè)核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB基因和蛋白的表達(dá)水平，觀察兔腎組織的炎癥損傷情況。
　　結(jié)果:
　　1.正常對(duì)照組和空白對(duì)照組兔行為學(xué)未見異常表現(xiàn)。PQ染毒組兔于染毒后立刻出現(xiàn)中毒表現(xiàn)，中毒第3天表現(xiàn)最

4、為嚴(yán)重，之后逐漸好轉(zhuǎn)。在第1、3、7天HP治療組行為學(xué)表現(xiàn)較PQ染毒組輕。
　　2.光鏡下觀察，正常對(duì)照組和空白對(duì)照組兔腎臟病理切片未見異常表現(xiàn)。PQ染毒組兔腎組織病理損害在染毒后第3天最嚴(yán)重，在第1、3、7天，HP治療組腎臟病理損害較PQ染毒組輕。
　　3.與正常對(duì)照組相比，空白對(duì)照組血漿Scr、BUN無明顯變化，PQ染毒組血漿Scr、BUN在第1、3、7天明顯升高(P＜0.05)。與PQ染毒組相比，HP治療組血漿Scr、

5、BUN在第1、3、7天顯著下降(P＜0.05)
　　4.與正常對(duì)照組相比，空白對(duì)照組MDA、SOD、GSH-px、HO-1、iNOS無顯著差異(P＞0.05);PQ染毒組在第1、3、7天MDA含量、HO-1、iNOS活力均顯著升高(P＜0.05)，SOD、GSH-px活力顯著降低(P＜0.05)。與同時(shí)間點(diǎn)PQ染毒組相比，HP治療組在第1、3、7天MDA含量，HO-1活力降低，SOD、GSH-px活力升高(P＜0.05)，iNOS

6、活力在第1天無差異(P＞0.05)，而在第3、7天顯著降低（P＜0.05）。
　　5.與正常對(duì)照組相比，空白對(duì)照組TNF-α、IL-6、NF-κB蛋白和NF-κB基因表達(dá)無顯著差異(P＞0.05);PQ染毒組在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)TNF-α、IL-6、NF-κB蛋白和NF-κB基因表達(dá)顯著升高(P＜0.05)。與同時(shí)間點(diǎn)PQ染毒組比較，HP治療組在第1、3、7天TNF-α、IL-6、NF-κB蛋白和NF-κB基因表達(dá)顯著降低(P＜0.05)