二氧化碳抗溶劑法制備肺部給藥用PLLA多孔微球及其生物學評價.pdf

1、本文選用碳酸氫銨（AB）作為致孔劑，采用壓縮二氧化碳抗溶劑法（PCA）分別制備了肺部給藥用聚乳酸多孔微球（PLLA PMs）和載胰島素的聚乳酸多孔微球（INS-PLLA PMs），并對其生物相容性和醫(yī)用功能性進行了研究。論文主要工作概括如下：
　　1．PLLA PMs的制備與表征：結合AB致孔法和PCA工藝制備的微球表面粗糙呈多孔結構，幾何粒徑（Dg）約20μm，空氣動力學直徑（Da）約4.2μm，具有良好的流動性和霧化性能，肺內(nèi)

2、沉積結果顯示PLLA PMs可有效沉積到SD大鼠的支氣管底部及肺上葉；分析傅立葉變換紅外光譜（FTIR）、X-射線粉末衍射（XRPD）和差示掃描量熱（DSC）結果表明，經(jīng)二氧化碳抗溶劑法處理后的PLLA化學結構未發(fā)生改變，熱穩(wěn)定性有所降低，仍保持了一定的晶型結構；且在體外模擬肺液降解試驗中展現(xiàn)出高于PLLA實心微球降解速度的優(yōu)勢。
　　2．INS-PLLA PMs的制備與表征：制備得到的微球表面粗糙、呈多孔結構，Dg為15.62μ

3、m，Da為4.26μm，F(xiàn)PF為64.58％，經(jīng)噴霧器霧化時間持續(xù)0.12 s，霧化效率約為90.95%，展現(xiàn)出良好的空氣動力學性質。FTIR結果表明，經(jīng)二氧化碳抗溶劑法處理的INS-PLLA PMs化學成分未發(fā)生變化。圓二色譜（CD）分析及生物活性驗證結果表明胰島素經(jīng)超臨界流體技術處理后，其二級結構未發(fā)生顯著變化，仍保持了良好的降血糖活性。胰島素均勻分散于載體基質中，藥物體外釋放可持續(xù)24 h，具有藥物緩釋效果。
　　3．生物相

4、容性研究：肺部毒性考察了肺部給藥PLLA PMs后的急性肺損傷和免疫炎癥毒性，結果顯示空氣和微球的運動會引起一定程度的急性肺損傷，使乳酸脫氫酶（LDH）、堿性磷酸酶（ALP）及其他蛋白物質少量泄漏，趨化炎性細胞因子白細胞介素-6（IL-6）、白細胞介素-8（IL-8）及腫瘤壞死因子-α（TNF-α），造成輕度的免疫炎癥反應，但仍屬于機體正常的免疫防御；整體毒性考察了PLLA PMs對A549細胞的影響，其細胞增殖率約90%，毒性反應級別

5、為1，具有良好的細胞生物相容性；其體外溶血率低于5%，血液相容性良好；KM小鼠腹腔注射PLLA PMs混懸液后無急性全身毒性作用。
　　4．醫(yī)用功能性研究：INS-PLLA PMs經(jīng)肺部給藥后可有效沉積到大鼠氣管、右肺上葉及左全肺，0.5 h內(nèi)隨著肺部呼吸運動進而分散于全肺，4 h內(nèi)部分胰島素已通過肺內(nèi)吸收進入血液循環(huán)，8 h內(nèi)吸收清除完全；II型糖尿病大鼠降血糖試驗結果表明，空白 PLLA PMs經(jīng)肺部給藥后無降血糖作用，而IN