琥珀酸產生菌的分離鑒定、誘變選育及發(fā)酵條件優(yōu)化.pdf

1、細菌發(fā)酵生產琥珀酸成本低廉、對環(huán)境污染少。由于其生產原料可再生，并能吸收利用溫室氣體CO<,2>，使之成為近年來國內外生物質能源轉化的研究熱點?！狙芯客ㄟ^采用選擇性較強的富集培養(yǎng)和快速準確篩選程序，從牛瘤胃中分離出適于淀粉質原料的琥珀酸產生菌，并進行相關的生理生化鑒定：通過紫外照射誘變育種得到琥珀酸高產突變株，優(yōu)化培養(yǎng)基組成并確定最適發(fā)酵培養(yǎng)條件。主要研究結論如下： 1．在富集培養(yǎng)中添加莫能菌素和富馬酸鈉，經溴甲酚綠變色平板快

2、速檢出500株產酸菌株。菌株發(fā)酵后經TLC初篩和改進后的HPCE方法復篩檢測，得到6株優(yōu)良產酸菌株，其中B-15菌株產琥珀酸11.5 g·L<'-1>，副產物甲酸4.65 g·L<'-1>，乙酸6.25 g·L<'-1>，該菌株琥珀酸產量最高。菌株B-15經生理生化鑒定后，初步確定其為放線桿菌屬(Actinobacillus sp．)。 2．以B-15為出發(fā)菌株，通過紫外照射誘變，依次采用溴甲酚綠平板、氟乙酸平板和丙烯醇平板對

3、菌株進行定向選育，得到的突變株FB-4發(fā)酵產琥珀酸19.90 g·L<'-1>，副產物乙醇7.55 g·L<'-1>，甲酸2.05 g·L<'-1>，乙酸4.85 g·L<'-1>，其琥珀酸產量較原始菌株提高70％。 3．對突變株FB-4進行發(fā)酵試驗的結果表明，最佳發(fā)酵培養(yǎng)基組成為，葡萄糖50 g·L<'-1>，酵母提取物10 g·L<'-1>，玉米漿5 g·L<'-1>，K<,2>HPO<,4> 3g·L<'-1>，MgCl