月腺大戟抗淋巴細(xì)胞性白血病機(jī)理的研究.pdf

1、[目的]初步探討中藥月腺大戟的毒性及對(duì)淋巴性白血病的作用機(jī)理，為開發(fā)治療白血病的天然藥物，為臨床應(yīng)用月腺大戟治療白血病提供理論基礎(chǔ)。 [方法]本研究首先獲取純正的月腺大戟原植物，經(jīng)鑒定后，分別用蒸餾水和95％乙醇將其進(jìn)行粗提，用水提物進(jìn)行一系列實(shí)驗(yàn)。首先進(jìn)行毒理學(xué)方面的實(shí)驗(yàn)，對(duì)月腺大戟的細(xì)胞毒性與傳統(tǒng)的治療藥物環(huán)磷酰胺進(jìn)行了對(duì)比并進(jìn)行了致突變研究：對(duì)不同給藥組P388淋巴細(xì)胞白血病患鼠肝、腎中MDA的含量進(jìn)行了比較，進(jìn)行了月腺大

2、戟水浸液的最大耐受實(shí)驗(yàn)(MTD)、微核實(shí)驗(yàn)和精子畸變實(shí)驗(yàn)，并對(duì)MTD實(shí)驗(yàn)小鼠各重要臟器進(jìn)行病理檢查。然后，在初步了解其毒性的基礎(chǔ)上以P388淋巴細(xì)胞性白血病小鼠為動(dòng)物模型，從延長(zhǎng)白血病小鼠生命延長(zhǎng)率、遏制細(xì)胞惡性增殖及病理改變、增強(qiáng)機(jī)體抗脂質(zhì)過氧化系統(tǒng)活性、機(jī)體免疫能力、誘導(dǎo)白血病細(xì)胞凋亡等角度對(duì)月腺大戟的抗白血病的作用機(jī)理進(jìn)行了較系統(tǒng)的研究：比較了不同給藥組小鼠的生命延長(zhǎng)率，計(jì)數(shù)了小鼠外周血白細(xì)胞數(shù)及腹水瘤細(xì)胞數(shù)，對(duì)外周血淋巴細(xì)胞進(jìn)行

3、形態(tài)學(xué)觀察并計(jì)數(shù)腫瘤細(xì)胞凋亡率，通過計(jì)算T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)換率反映機(jī)體特異性免疫力，對(duì)肝、腎中SOD和GSH-PX活力進(jìn)行了測(cè)定，免疫組化法對(duì)外周血淋巴細(xì)胞中bcl-2/bax相關(guān)凋亡基因蛋白的表達(dá)進(jìn)行了檢測(cè)。 [結(jié)果]結(jié)果表明月腺大戟能顯著抑制由于P388白血病細(xì)胞攻擊引起的DBA小鼠外周血中白細(xì)胞和腹水瘤細(xì)胞的惡性增殖、提高患鼠的生命延長(zhǎng)率，緩解受白血病細(xì)胞攻擊引起的瘤細(xì)胞浸潤(rùn)、并恢復(fù)肝中超氧化物歧化酶與谷胱甘肽過氧化物酶的活性，

4、說(shuō)明月腺大戟對(duì)抑制白血病的發(fā)展，提高機(jī)體抗脂質(zhì)過氧化能力有較強(qiáng)的作用。 本研究還發(fā)現(xiàn)，月腺大戟水提物對(duì)淋巴細(xì)胞白血病小鼠bcl-2和bax凋亡相關(guān)基因蛋白表達(dá)具有不同程度的影響，不同劑量的藥物對(duì)腫瘤細(xì)胞中凋亡基因的表達(dá)存在著差異，提示月腺大戟可能是通過作用于細(xì)胞凋亡相關(guān)基因影響其表達(dá)，最終誘導(dǎo)白血病細(xì)胞凋亡來(lái)抑制白血病，因而誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡可能是月腺大戟抑制白血病的重要途徑之一。 月腺大戟的毒性實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，與對(duì)照組相比，在使用

5、劑量(2.7g/kg)下對(duì)機(jī)體無(wú)明顯毒性，微核實(shí)驗(yàn)與精子畸變實(shí)驗(yàn)均未發(fā)現(xiàn)有明顯致突變與致畸作用。月腺大戟的最大耐受量(MTD)＞288g/kg。與對(duì)照藥物環(huán)磷酰胺相比，即使月腺大戟的劑量增至77g/kg，各項(xiàng)毒性指標(biāo)也遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于常規(guī)用藥劑量的環(huán)磷酰胺。但同時(shí)，月腺大戟高劑量組(288g/kg)在腎臟和心臟等出現(xiàn)了不同程度的病理改變，而對(duì)照組并未發(fā)現(xiàn)，有可能是其毒性作用引起，有待進(jìn)一步研究。但總體上月腺大戟是一種安全性較好的低毒藥物。