Snord116基因敲除小鼠Ghrelin水平升高的機制及其胃神經(jīng)系統(tǒng)的研究.pdf

1、Prader-Willi綜合癥(簡稱PWS)是一種最常見的由遺傳引起的肥胖癥，其最顯著的臨床表征是病人無法控制的饑餓感和過度飲食。遺傳學的研究以及最新的證據(jù)證實了Snord116是導致PWS的最關鍵的基因。本實驗室前期構(gòu)建了Snord116基因敲除小鼠，對該種小鼠進行了多方面的研究和測量。Snord116基因敲除小鼠一個豐常值得關注的表征是：該種小鼠飽食情況下Ghrelin的水平是正常小鼠的3倍，相當于正常小鼠饑餓24小時后的水平。Gh

2、relin作為目前唯一己知的“饑餓激素”，可以引起動物和人的進食行為。PWS病人無法抑制的饑餓感和過食行為與Ghrelin含量升高有無必然的聯(lián)系目前還不清楚。為了回答該問題，本課題構(gòu)建了兩個質(zhì)粒，分別用于Ghrelin基因敲除和轉(zhuǎn)基因小鼠。目標是在Snord116基因敲除小鼠中進一步敲除Ghrelin基因，檢測Ghrelin是Snord116敲除小鼠過食行為的必要條件。
　　 PWS病人Ghrelin的水平為正常值的3倍，本文利

3、用免疫熒光和RT-PCR的方法分別在細胞水平和mRNA水平上對Ghrelin水平升高的原因進行了初步的探索。免疫熒光顯示Snord116基因敲除小鼠胃內(nèi)Ghrelin細胞的形態(tài)、大小、分布的位置以及數(shù)量較野生型小鼠沒有明顯的區(qū)別。RT-PCR測定胃內(nèi)Ghrelin mRNA表明，Snord116基因敲除小鼠胃內(nèi)Ghrelin mRNA水平較野生型沒有太明顯的升高，這與免疫熒光結(jié)果一致。
　　 Snord116是一個非編碼的小核仁

4、RNA，但其生物學功能目前還不清楚。一般的小核仁RNA主要是以復合物的狀態(tài)通過甲基化修飾來調(diào)控基因的表達。本文利用甘油梯度離心的方法確定了Snord116復合物的大小約在700KD，比一般的小核仁RNA復合物是一個非常大的復合物，其生物學功能可能也非常復雜。
　　 基于Snord116在腦組織及所有的神經(jīng)中都有表達以及本實驗室前期的各項測量數(shù)據(jù)，我們懷疑Snord116基因敲除小鼠神經(jīng)發(fā)育異常，尤其是胃部神經(jīng)發(fā)育異?？赡苁窃斐蒅