280nm LED-紫外線對(duì)HL-60細(xì)胞增殖的影響及機(jī)制研究.pdf

1、目的:
　　觀察280nm LED-紫外線(Light Emitting Diode-Ultraviolet，LED-UV)對(duì)HL-60細(xì)胞增殖的影響并研究其發(fā)生機(jī)制。
　　方法:
　　取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的急性早幼粒白血病細(xì)胞標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞株(HL-60)作為研究對(duì)象，280nmLED-UV作為光源，實(shí)驗(yàn)分為A-E五組（對(duì)照組A及實(shí)驗(yàn)組B-E),分別以0J/m2、8J/m2、15J/m2、30J/m2、60J/m2的劑量照射細(xì)胞，

2、隨后將各組細(xì)胞置于含10％胎牛血清的IMDM培養(yǎng)液、37℃、5％CO2、飽和濕度的條件下培養(yǎng)2小時(shí)。倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況及形態(tài)變化，CCK-8檢測(cè)細(xì)胞增殖抑制率，熒光定量PCR檢測(cè)Bcl-2基因的表達(dá)量，AnnexinⅤ-FITC/PI雙染流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡，PI染色流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞周期分布。
　　結(jié)果:
　　1.HL-60細(xì)胞生長(zhǎng)及形態(tài)變化:對(duì)照組細(xì)胞形態(tài)完整、圓形透亮、排列整齊、密度較大。實(shí)驗(yàn)組隨著LED-

3、UV劑量的增大，細(xì)胞皺縮、透亮度降低、排列紊亂、密度減少。E組可見大量崩解破碎的細(xì)胞。
　　2.HL-60細(xì)胞增殖抑制率:實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞增殖抑制率的比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=1297.68，P＜0.01)，且隨著LED-UV劑量的增大，細(xì)胞增殖抑制率逐漸升高，各組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P值均＜0.01）。
　　3.HL-60細(xì)胞Bcl-2基因的表達(dá)量:實(shí)驗(yàn)組Bcl-2基因表達(dá)量的比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=54.34，P＜0.0

4、1）。B-D組隨著LED-UV劑量的增大，Bcl-2基因的表達(dá)量逐漸降低，各組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P值均＜0.01）;而E組Bcl-2基因的表達(dá)量明顯高于D組(P＜0.01)。
　　4.HL-60細(xì)胞凋亡率:各組細(xì)胞凋亡率的比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=293.50，P＜0.01)。 A-D組隨著LED-UV劑量的增大，細(xì)胞凋亡率逐漸升高，各組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P值均＜0.01）;而E組細(xì)胞凋亡率明顯低于D組（P＜0.01）

5、。
　　5.HL-60細(xì)胞周期分布:各組G0/G1期細(xì)胞比例的比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=173.44，P＜0.01）。A-D組隨著LED-UV劑量的增大，G0/G1期細(xì)胞比例逐漸升高，各組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P值均＜0.05）;而E組G0/G1期細(xì)胞比例明顯低于D組(P＜0.01)。
　　結(jié)論:
　　1.280nm LED-UV能抑制HL-60細(xì)胞Bcl-2基因的表達(dá)，在8-30J/m2劑量范圍內(nèi)呈劑量依賴性，劑量

6、為30J/m2時(shí)抑制作用最強(qiáng)，60J/m2時(shí)抑制作用明顯降低。
　　2.280nm LED-UV能誘導(dǎo)HL-60細(xì)胞凋亡，在0-30J/m2劑量范圍內(nèi)呈劑量依賴性，劑量為30J/m2時(shí)凋亡率最高，60J/m2時(shí)凋亡率明顯降低。
　　3.280nm LED-UV能使HL-60細(xì)胞周期阻滯于G0/G1期，在0-30J/m2劑量范圍內(nèi)呈劑量依賴性，劑量為30J/m2時(shí)阻滯作用最強(qiáng)，60J/m2時(shí)阻滯作用明顯降低。
　　4.2