表皮松解性角化過度型魚鱗病一家系KRT10基因突變的研究及應(yīng)用維甲酸治療的臨床觀察.pdf

1、前言
　　 魚鱗病(ichthyosis)是一組以皮膚干燥伴片層魚鱗狀粘著性鱗屑為特征的角化異常性遺傳性皮膚病。根據(jù)遺傳機(jī)制、臨床表現(xiàn)及組織病理學(xué)的差異,主要分為四型:尋常型魚鱗病(ichthyosis vulgads,Ⅳ)、表皮松解性角化過度型魚鱗病(epidermolytic hyperkeratosis,EHK)、X連鎖型魚鱗病(X-linked ichthyosis,XLI)、先天性非大皰性魚鱗病樣紅皮病(nonbull

2、ous congenital ichthyosiformerythroderma,NCIE)。
　　 表皮松解性角化過度型魚鱗病(EHK)是一種罕見的常染色體顯性遺傳性皮膚病(MIM 113800),其發(fā)生率在0.33/10萬～1/10萬之間。約有半數(shù)病人有陽性家族史,90％的患者在1歲時(shí)開始有皮膚損害,71％出生時(shí)就有。本病具有很高的自發(fā)突變率,至少半數(shù)病例為散發(fā)性。遺傳學(xué)的連鎖分析、基因突變和轉(zhuǎn)基因小鼠研究,都表明EHK是由

3、編碼基底層以上的角蛋白基因1(KRT1)和10(KRT10)突變引起的。本研究利用直接測序的方法對該家系進(jìn)行KRT1和KRT10基因的所有編碼區(qū),特別是熱點(diǎn)區(qū)基因突變的檢測,以期發(fā)現(xiàn)新的致病突變,進(jìn)一步豐富基因的突變譜。
　　 材料和方法
　　 一、實(shí)驗(yàn)材料
　　 (一)研究對象:
　　 經(jīng)中國醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院皮膚科確診的遼寧漢族表皮松解性角化過度型魚鱗病一家系,其中二人發(fā)病,為母子關(guān)系,且其臨床表現(xiàn)

4、相同。
　　 (二)主要試劑:
　　 10％SDS、EDTA、硼酸、蛋白酶K、Tris飽和酚、氯仿、無水乙醇、溴化乙啶、瓊脂糖、TBE緩沖液、2×Taq plus PCR Master Mix。
　　 二、實(shí)驗(yàn)方法
　　 取患者皮損進(jìn)行組織病理檢查,提取該家系成員的外周血DNA,采用聚合酶連反應(yīng)(PCR)及DNA直接測序方法,檢測患者角蛋1(KRT1)及角蛋白10(KRT10)的基因突變。確診之日起予先證

5、者第三代維甲酸(阿羅神)口服,同時(shí)配合外用藥治療。
　　 結(jié)果
　　 該家系2例患者存在KRT10基因的雜合點(diǎn)突變,即在KRT10基因第2140位G→A,導(dǎo)致其第156位的精氨酸變?yōu)榻M氨酸(R156H)。維甲酸治療四個(gè)月后,癥狀改善,皮膚鱗屑明顯變薄。
　　 結(jié)論
　　 KRT10 R156H是導(dǎo)致該家系2例患者臨床表型的特異突變,進(jìn)一步證實(shí)KRT10基因第156位密碼子是突變熱點(diǎn),從而為基因診斷和基因治