表皮松解性角化過(guò)度型魚(yú)鱗病一家系KRT10基因突變的研究及應(yīng)用維甲酸治療的臨床觀察.pdf

1、前言
　　 魚(yú)鱗病(ichthyosis)是一組以皮膚干燥伴片層魚(yú)鱗狀粘著性鱗屑為特征的角化異常性遺傳性皮膚病。根據(jù)遺傳機(jī)制、臨床表現(xiàn)及組織病理學(xué)的差異,主要分為四型:尋常型魚(yú)鱗病(ichthyosis vulgads,Ⅳ)、表皮松解性角化過(guò)度型魚(yú)鱗病(epidermolytic hyperkeratosis,EHK)、X連鎖型魚(yú)鱗病(X-linked ichthyosis,XLI)、先天性非大皰性魚(yú)鱗病樣紅皮病(nonbull

2、ous congenital ichthyosiformerythroderma,NCIE)。
　　 表皮松解性角化過(guò)度型魚(yú)鱗病(EHK)是一種罕見(jiàn)的常染色體顯性遺傳性皮膚病(MIM 113800),其發(fā)生率在0.33/10萬(wàn)～1/10萬(wàn)之間。約有半數(shù)病人有陽(yáng)性家族史,90％的患者在1歲時(shí)開(kāi)始有皮膚損害,71％出生時(shí)就有。本病具有很高的自發(fā)突變率,至少半數(shù)病例為散發(fā)性。遺傳學(xué)的連鎖分析、基因突變和轉(zhuǎn)基因小鼠研究,都表明EHK是由

3、編碼基底層以上的角蛋白基因1(KRT1)和10(KRT10)突變引起的。本研究利用直接測(cè)序的方法對(duì)該家系進(jìn)行KRT1和KRT10基因的所有編碼區(qū),特別是熱點(diǎn)區(qū)基因突變的檢測(cè),以期發(fā)現(xiàn)新的致病突變,進(jìn)一步豐富基因的突變譜。
　　 材料和方法
　　 一、實(shí)驗(yàn)材料
　　 (一)研究對(duì)象:
　　 經(jīng)中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院皮膚科確診的遼寧漢族表皮松解性角化過(guò)度型魚(yú)鱗病一家系,其中二人發(fā)病,為母子關(guān)系,且其臨床表現(xiàn)

4、相同。
　　 (二)主要試劑:
　　 10％SDS、EDTA、硼酸、蛋白酶K、Tris飽和酚、氯仿、無(wú)水乙醇、溴化乙啶、瓊脂糖、TBE緩沖液、2×Taq plus PCR Master Mix。
　　 二、實(shí)驗(yàn)方法
　　 取患者皮損進(jìn)行組織病理檢查,提取該家系成員的外周血DNA,采用聚合酶連反應(yīng)(PCR)及DNA直接測(cè)序方法,檢測(cè)患者角蛋1(KRT1)及角蛋白10(KRT10)的基因突變。確診之日起予先證

5、者第三代維甲酸(阿羅神)口服,同時(shí)配合外用藥治療。
　　 結(jié)果
　　 該家系2例患者存在KRT10基因的雜合點(diǎn)突變,即在KRT10基因第2140位G→A,導(dǎo)致其第156位的精氨酸變?yōu)榻M氨酸(R156H)。維甲酸治療四個(gè)月后,癥狀改善,皮膚鱗屑明顯變薄。
　　 結(jié)論
　　 KRT10 R156H是導(dǎo)致該家系2例患者臨床表型的特異突變,進(jìn)一步證實(shí)KRT10基因第156位密碼子是突變熱點(diǎn),從而為基因診斷和基因治