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文檔簡介
1、目的:人類繁衍生息的基礎(chǔ)是生殖,生殖健康是人類健康的核心。近年來,男性生殖系統(tǒng)發(fā)病率逐年升高,男性生殖健康問題備受關(guān)注,是現(xiàn)在醫(yī)學科學研究的重點。藏醫(yī)藥有數(shù)千年的悠久歷史,它是藏族勞動人民同疾病作斗爭積累起來的經(jīng)驗和理論總結(jié),從藏藥中尋找天然、安全,并且能調(diào)節(jié)生殖功能的藥物對人類的生殖健康有重要意義。
本課題以藏藥魯堆多吉(藏黨參)——長花黨參(CodonopsisthalictrifoBa Wall.Var.mollis(C
2、hipp)L.T.Shen)為研究對象,觀測藏黨參水提物對雄性幼齡大鼠和成齡大鼠生殖系統(tǒng)的作用,用血清藥理學方法研究藏黨參水提物對睪丸間質(zhì)細胞睪酮分泌功能的影響及其機制途徑。為開發(fā)藏黨參提供科學的實驗數(shù)據(jù)。
方法:用藏黨參水提物和潞黨參水提物灌胃幼齡大鼠和成齡大鼠,兩周后,測量大鼠體重,精子密度,睪丸、附睪、精囊重量的變化;用放射免疫法檢測大鼠血清睪酮(T)的變化,用酶聯(lián)免疫法(ELISA)檢測大鼠血清雙氫睪酮(DHT)、卵泡
3、刺激素(FSH)和黃體生成素(LH)的變化。
用高效液相色譜法分析對照組、藏黨參給藥組和潞黨參給藥組大鼠血清之間的化學成分的差異,以及藏黨參水提物和潞黨參水提物之間化學成分的差異。
建立大鼠睪丸間質(zhì)細胞的體外培養(yǎng)技術(shù),然后用血清藥理學的方法研究藏黨參含藥血清和潞黨參含藥血清對大鼠睪丸間質(zhì)細胞睪酮分泌功能的影響,并對其作用機制進行初步探究。
結(jié)果:灌胃大鼠兩周后,藏黨參水提物和潞黨參水提物的低劑量組(10g/
4、Kg)、中劑量組(20g/Kg)和高劑量組(40g/Kg)能劑量依賴性地降低幼齡大鼠的睪丸重量、精子密度、血清睪酮(T)含量(P<0.05);低劑量組能顯著降低幼齡大鼠血清雙氫睪酮(DHT)含量(p<0.05);高劑量組能顯著降低幼齡大鼠的體重增加量(p<0.01);同時幼齡大鼠血清中卵泡刺激素(FSH)和黃體生成素(LH)濃度呈劑量依賴性顯著升高(p<0.05)。
灌胃大鼠兩周后,藏黨參水提物和潞黨參水提物的低劑量組(10g
5、/Kg)、中劑量組(20g/Kg)和高劑量組(40g/Kg)能劑量依賴性地降低成齡大鼠的體重增長量、睪丸重量、附睪重量、精囊重量、精子密度、血清睪酮(T)和雙氫睪酮(DHT)含量(P<0.05);同時成齡大鼠血清中卵泡刺激素(FSH)和黃體生成素(LH)濃度呈劑量依賴性升高。
與對照組清的高效液相色譜圖對比發(fā)現(xiàn),藏黨參和潞黨參含藥血清均在280nm下約20min時出現(xiàn)一個顯著的小尖峰,這說明給藥組大鼠血清中含有藥效物質(zhì)。藏黨參
6、和潞黨參水提液與含藥血清高效液相色譜圖相比在280nm下約20min時沒有出現(xiàn)一個顯著的小尖峰,提示血清藥效物為藏黨參和潞黨參水提液中的代謝成分。
睪丸間質(zhì)細胞的培養(yǎng)實驗中,通過臺盼藍排斥實驗和睪酮的基礎(chǔ)分泌都證明了本實驗離體大鼠的睪丸間質(zhì)細胞的功能良好,結(jié)果顯示離體培養(yǎng)24h細胞活率仍高達95%。
隨著含藥血清添加量的增加,睪丸間質(zhì)細胞睪酮的分泌能力逐漸降低。與空白對照組相比較,加入藏黨參含藥血清高于80μl時能顯
7、著抑制睪丸間質(zhì)細胞的睪酮分泌,睪丸間質(zhì)細胞內(nèi)的cAMP濃度顯著降低(p<0.05);加入潞黨參含藥血清高于40μl時能使睪丸間質(zhì)細胞的睪酮分泌顯著降低,睪丸間質(zhì)細胞內(nèi)的cAMP濃度顯著降低(p<0.05)。
結(jié)論:藏黨參和潞黨參水提液中的成分能夠被雄性大鼠吸收,代謝形成藏黨參和潞黨參的血清藥效物質(zhì),從而對雄性大鼠生殖系統(tǒng)產(chǎn)生藥理作用。
藏黨參和潞黨參血清中的藥效成分可能通過cAMP信號傳導途徑抑制睪酮的合成。
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