血清藥理學方法研究藏藥魯堆多吉對雌性大鼠生殖系統(tǒng)的影響及作用機制.pdf

1、目的:本課題以藏藥魯堆多吉（藏黨參）中的長花黨參(CodonopsisthalictrifoliaWall.Var.mollis(Chipp)L.T.Shen）為研究對象，觀察藏黨參水提液對雌性SD大鼠生殖系統(tǒng)的影響，并用血清藥理學方法研究藏黨參含藥血清對體外培養(yǎng)的卵巢顆粒細胞增殖分化及生理功能的影響，同時探究藏黨參對卵巢顆粒細胞的作用機制。為臨床使用藏黨參治療生殖系統(tǒng)疾病提供科學的實驗數(shù)據(jù)。
　　 方法:用藏黨參水提液和潞黨參

2、水提液灌胃雌性SD大鼠持續(xù)兩周，計量大鼠卵巢及子宮的重量變化;用放射免疫法檢測大鼠血清中雌二醇(E2)和孕酮(P)的變化，用酶聯(lián)免疫法(ELISA)檢測大鼠血清中卵泡刺激素(FSH)、黃體生成素(LH)、谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的變化。
　　 建立大鼠卵巢顆粒細胞體外培養(yǎng)方法，采用血清藥理學方法研究藏黨參含藥血清和潞黨參含藥血清對大鼠卵巢顆粒細胞增殖分化及功能的影響，并通過阻斷卵巢顆粒細胞的

3、cAMP通路、Ca2+通道和細胞內(nèi)蛋白質合成，對含藥血清的作用機制進行初步探究。
　　 結果:藏黨參水提液和潞黨參水提液灌胃大鼠兩周后，雌性大鼠的卵巢重量降低(P＜0.05);同時大鼠血清中卵泡刺激素(FSH)含量顯著升高(p＜0.05);血清中谷胱甘肽(GSH)水平顯著升高(P＜0.05)，丙二醛(MDA)的含量(P＜0.05)顯著降低。
　　 在卵巢顆粒細胞體外培養(yǎng)實驗中，通過臺盼藍排斥實驗和雌二醇含量測定證明含藥血

4、清濃度為5％，含藥血清與顆粒細胞共培養(yǎng)時間達到24h時，含藥血清能夠明顯降低顆粒細胞的雌二醇含量(P＜0.05)，但不影響顆粒細胞的MTT吸光度值(P＞0.05)、3β-HSD含量(P＞0.05)和孕酮的分泌量(P＞0.05)。cAMP通路的抑制劑H89能夠逆轉含藥血清對顆粒細胞雌二醇分泌的抑制作用(P＜0.05)。
　　 結論:藏黨參水提液中的藥效成分具有清除雌性大鼠體內(nèi)自由基的作用，其作用是通過提高大鼠血清中GSH含量、降低