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文檔簡介
1、目的:明確抑癌基因ARHI在人胃癌細胞株及組織標本的表達情況,并統(tǒng)計分析其表達異常與胃癌患者臨床病理特征之間的相關(guān)性;初步研究ARHI基因在胃癌細胞中的功能,從而為更深入的研究和早期胃癌的基因診斷及分子靶向治療提供新的思路和理論依據(jù)。
材料方法:本研究通過收集胃癌手術(shù)新鮮標本、石蠟標本及培養(yǎng)不同分化程度胃癌細胞株,利用半定量RT-PCR,Western-blot,免疫組化,MTT,Transwell及流式細胞分析術(shù)等方法在
2、mRNA和蛋白水平,從細胞到人體組織,對胃癌中ARHI基因的表達進行多層面多方法的研究驗證。同時利用體外培養(yǎng)的MKN-28胃癌細胞初步研究了ARHI基因在胃癌中的功能。
結(jié)果:在細胞層面,從mRNA和蛋白水平檢測發(fā)現(xiàn),ARHI基因在不同分化程度的人胃癌細胞系及正常人胃粘膜上皮細胞之間均存在表達差異,ARHI表達量隨細胞分化程度的升高而增加,兩種實驗方法檢測結(jié)果基本一致。在組織層面的驗證與細胞實驗基本一致,即ARHI基因在多
3、數(shù)胃癌組織標本表達下調(diào)或缺失,而在相應(yīng)正常組織標本相對高表達;ARHI蛋白表達與腫瘤的分化程度及TNM分期有關(guān)(P<0.05),而與患者的年齡、性別、腫瘤發(fā)生部位、大小、大體類型、是否淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等均無明顯統(tǒng)計學差異。經(jīng)MTT、Transwell小室以及流式細胞術(shù)的方法檢測表明,在MKN-28高分化胃癌細胞中ARHI基因干擾后細胞增殖、遷移及抗凋亡能力均較空載PU6質(zhì)粒的細胞增強。
結(jié)論:ARHI基因在人胃癌中存在表達下調(diào)或
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