糧食、飼料中蛋白質(zhì)含量測定方法的研究.pdf

1、蛋白質(zhì)是糧食、飼料和食品中的重要營養(yǎng)成分，對機體的生長、發(fā)育具有不可替代的作用，但某些飼料、食品生產(chǎn)企業(yè)為了降低成本，向產(chǎn)品中添加非蛋白含氮物質(zhì)冒充高蛋白產(chǎn)品。這種低蛋白飼料一方面影響動物生長，另一方面是危害畜禽健康并進而嚴(yán)重影響人類食品衛(wèi)生安全。 目前，測定糧食、飼料以及食品等蛋白質(zhì)含量的國家標(biāo)準(zhǔn)方法為凱氏定氮法，其最大缺點是將樣品本身含有或添加的非蛋白含氮物與蛋白質(zhì)中的氮一同測出并換算為蛋白質(zhì)，結(jié)果使含菲蛋自氮樣品測定值比蛋

2、白質(zhì)實際含量明顯偏高。解決該問題的途徑是建立一種不受非蛋白氮等其它因素干擾、能夠準(zhǔn)確測定樣品中蛋白質(zhì)的方法來取代或作為凱氏定氮法的補充。 本研究通過比較目前各種測定蛋白質(zhì)方法的優(yōu)缺點，建立一種能夠簡捷、靈敏、準(zhǔn)確地測定糧食、飼料和食品中蛋白質(zhì)的方法。研究主要包括以下內(nèi)容：確定各種比色法穩(wěn)定性和線性范圍，干擾因素對測定方法的影響，樣品前處理最佳消化條件，干擾物對消化樣品測定的影響，并用凱氏定氮法對建立方法的驗證。 確定了大

3、米、玉米、大豆、面粉、玉米秸稈、曹蓿干草塊、火腿、鮮肉等不同樣品消化的最佳溫度、NaOH濃度、時間、樣品稀釋倍數(shù)等。最佳消化條件是：稱取粉碎樣品0.3g：NaOH濃度為1.O mol/L(面粉采用0.25 mol/L除外)；消化溫度為水浴50℃；消化時間為面粉0.5h，大米粉、玉米粉、鮮肉、火腿等lh，大豆粉2h，苜蓿干草、玉米秸稈4h；稀釋倍數(shù)除大豆1000倍外，其它均為500倍。 按照上述消化條件用Lowry法進行實際樣品測

4、定，結(jié)果與凱氏定氮法測定結(jié)果比較基本吻合，符合度從95.2％(大豆)至llO％(玉米)不等，其它大多數(shù)種類樣品接近100％。添加干擾試驗表明，非蛋白含氮物中三聚氰胺、硫酸銨、尿素、生物蛋白精添加濃度333.3g/kg仍無干擾作用?？s二脲添加濃度66.7g/kg無干擾。氯化鈉、蔗糖、檸檬酸鈉、維生素C、維生素B1、肌醇、多種氨基酸(酪氨酸除外)等在添加常規(guī)用量數(shù)倍不產(chǎn)生明顯干擾。 實驗結(jié)果表明，Lowry法具有靈敏度高、結(jié)果比較準(zhǔn)