配合飼料中蛋白質(zhì)原料的溯源技術(shù)研究.pdf

1、當(dāng)前,飼料質(zhì)量安全問(wèn)題引發(fā)的食品安全危機(jī)的頻繁爆發(fā)使得如何更好地對(duì)飼料產(chǎn)品原料來(lái)源和組成進(jìn)行溯源管理成為廣大飼料管理者、科研工作者、生產(chǎn)者和消費(fèi)者廣泛關(guān)注的焦點(diǎn).近紅外光譜(NIRS)分析技術(shù)具有快速,準(zhǔn)確,操作簡(jiǎn)便,無(wú)損,成本低,且測(cè)量重復(fù)性高的優(yōu)點(diǎn),是一種在飼料質(zhì)量安全等眾多領(lǐng)域都有著廣泛應(yīng)用前景的溯源技術(shù):熒光定量PCR技術(shù)可以對(duì)飼料中不同物種的基因目標(biāo)片斷進(jìn)行擴(kuò)增,從而對(duì)飼料組分來(lái)源進(jìn)行判別.本論文分別建立了配合飼料中豆粕、魚(yú)粉

2、兩種成分的熒光定量PCR和NIRS定性和定量檢測(cè)方法,并對(duì)兩種檢測(cè)方法進(jìn)行了比較,為兩種方法在飼料質(zhì)量溯源管理中的推廣應(yīng)用提供了理論基礎(chǔ).本研究的主要結(jié)論如下: 篩選了來(lái)源于編碼魚(yú)線粒體12S RNA的242bp的基因片段、來(lái)源于編碼大豆線粒體ATP合成酶的137bp基因片段和編碼大豆線粒體18S RNA的142bp基因片段,用作:PCR試驗(yàn)中對(duì)配合飼料中魚(yú)粉和豆粕成分進(jìn)行定性檢測(cè)內(nèi)源標(biāo)記物;利用熒光定量PCR技術(shù)分別建立了預(yù)測(cè)

3、配合飼料中魚(yú)粉、豆粕含量的標(biāo)準(zhǔn)曲線,魚(yú)粉標(biāo)準(zhǔn)曲線的決定系數(shù)0.9615,兩種豆粕特異引物得到的標(biāo)準(zhǔn)曲線的決定系數(shù)分別為0.9726和0.9767.用以上標(biāo)準(zhǔn)曲線預(yù)測(cè)未知樣品中的魚(yú)粉和豆粕含量,預(yù)測(cè)值與真實(shí)值的相關(guān)性分別為0.8875、0.9361和0.9295.可見(jiàn),PCR技術(shù)用于魚(yú)粉、豆粕的定性和定量檢測(cè)結(jié)果尚可接受,但仍有很多不可控因素限制了該技術(shù)的應(yīng)用. 利用.NIRS技術(shù)建立了魚(yú)粉、豆粕的:NIRS定標(biāo)模型,模型的決定系

4、數(shù)R<'2>分別達(dá)到13.9554.和0.9857;SECV值分別為0.9541,1.1065;RSD均小于10﹪,RPD均大于3,定標(biāo)效果良好.通過(guò)預(yù)測(cè)未知樣品對(duì)所建模型的預(yù)測(cè)能力進(jìn)行驗(yàn)證,定性預(yù)測(cè)的準(zhǔn)確度較高.定量預(yù)測(cè)時(shí),未知樣品中魚(yú)粉、豆粕的NIRS預(yù)測(cè)值與真實(shí)值間決定系數(shù)R<'2>分別達(dá)到了0.987l和0.9964:且:RSD均小于10﹪,RPD均大于3,預(yù)測(cè)精度很好.結(jié)果表明,NIRs技術(shù)可以很好的對(duì)配合飼料中魚(yú)粉、豆粕兩種