利用開孔明膠固定化啤酒酵母生產(chǎn)ATP的研究.pdf

1、利用固定化酵母催化一磷酸腺苷(AMP)磷酸化生成三磷酸腺苷(ATP)是最有工業(yè)前景的ATP生產(chǎn)方法之一。該法的中心內(nèi)容包括：穩(wěn)定的細(xì)胞質(zhì)量、適宜的固定化形式、適宜的反應(yīng)操作條件等。本文對酵母的培養(yǎng)條件、開孔明膠固定化細(xì)胞的制備條件以及ATP生產(chǎn)的反應(yīng)條件進行了較深入的探討和試驗研究。此外還建立了ATP分離與提純的實驗方法，并通過實驗考察了發(fā)酵液的ATP回收率、成品ATP的純度以及ATP的實際產(chǎn)率。 首先選用了一株轉(zhuǎn)化率較好但穩(wěn)

2、定性差的酵母菌株，對擴培培養(yǎng)基中的蔗糖蜜、蛋白胨、(NH<,4>)<,2>SO<,4>KH<,2>PO<,4>四種因素不同濃度水平進行正交實驗，研究其對培養(yǎng)酵母菌濃及ATP轉(zhuǎn)化活性的影響，確定了用于ATP生產(chǎn)的酵母細(xì)胞培養(yǎng)工藝的較佳配方，其結(jié)果為：m(蔗糖蜜)＝120％，m(蛋白胨)＝0.70％，m(KH<,2>PO<,4>)=0.15％，m((NH<,4>)<,2>SO<,4>)＝0.25％。實驗還確定了該啤酒酵母適宜的擴大培養(yǎng)時間是

3、14～20小時。 研究了開孔明膠固定化啤酒酵母細(xì)胞的制備條件，結(jié)果表明15％的明膠和2％的海藻酸鈉形成的復(fù)配膠包埋10％的啤酒酵母細(xì)胞制備成的固定化顆粒經(jīng)2％戊二醛交聯(lián)1小時具有較高的磷酸化活性。 利用該固定化顆粒研究了酵母酶系生產(chǎn)ATP的反應(yīng)機理，考察了多種因素對ATP轉(zhuǎn)化情況的影響，結(jié)果表明用開孔明膠包埋啤酒酵母制成的固定化細(xì)胞，在含有15g/LAMP，葡萄糖150mmol/L，硫酸鎂16mmol/L，pH7.0