啤酒酵母的RAPD分子分型及標(biāo)記研究.pdf

1、本文建立了啤酒酵母RAPD的擴增體系，通過RAPD分子標(biāo)記比較研究了不同啤酒酵母菌株的遺傳多樣性以及遺傳相似性，并利用RAPD對2株發(fā)酵性能良好的啤酒酵母菌株進行了標(biāo)記。 利用啤酒酵母種特異性引物SC-1和SC-2對22株酵母基因組DNA進行擴增，已知的8株啤酒酵母均出現(xiàn)1170bp左右的特征譜帶，未知其種屬來源的14株酵母分離株中有7株也出現(xiàn)了1170bp特征譜帶，屬于啤酒酵母(Saccharomycescerevisiae)

2、。 對啤酒酵母RAPD擴增體系進行了優(yōu)化，得出啤酒酵母RAPD擴增采用模板50ng，2.5mMMg2+，Taq酶1.5U，200μMdNTPs，25pmol隨機引物，反應(yīng)總體積為25μL和93℃2min，36℃1min，72℃2min1次循環(huán)；93℃1min，36℃1min72℃2min，40次循環(huán)；93℃1min，36℃1min，72℃10min1次循環(huán)的PCR擴增程序能夠得到比較良好的RAPD電泳圖譜并具有良好的重復(fù)性。

3、 采用RAPD對15株不同來源的啤酒酵母進行了分子標(biāo)記和系統(tǒng)學(xué)研究，在50條隨機引物中篩選到P07、09、11、21和42計5條隨機引物具有較好的擴增多態(tài)性。共檢測到49個位點，其中46個為多態(tài)標(biāo)記，并獲得了清晰穩(wěn)定DNA圖譜，顯示出不同來源的15株啤酒酵母菌株之間存在著較大的種內(nèi)遺傳多態(tài)性，根據(jù)菌株之間的遺傳相似系數(shù)和距離可以分成不同的類群，顯示出不同的親緣關(guān)系。通過發(fā)酵試驗發(fā)現(xiàn)這些菌株的代謝產(chǎn)物雙乙酰和高級醇的含量，雙乙酰的還原