豬骨蛋白對(duì)骨質(zhì)疏松模型大鼠骨密度和相關(guān)的生化分子的影響.pdf

1、目的:通過測(cè)定骨密度及相關(guān)各項(xiàng)指標(biāo)探討豬骨蛋白對(duì)骨質(zhì)疏松模型大鼠的影響。
　　方法:本實(shí)驗(yàn)采用大鼠糖皮質(zhì)激素骨質(zhì)疏松模型及骨損傷模型,對(duì)豬骨蛋白的抗骨質(zhì)疏松作用進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究。(1)將3月齡Wistar大鼠60只隨機(jī)分為6組:空白對(duì)照組、模型組、陽性藥組、骨蛋白高劑量組、中劑量組、低劑量組?？瞻讓?duì)照組,按10ml/kg每天灌胃給予蒸餾水;模型組,按2.5ml/kg每周兩次肌肉注射地塞米松;骨質(zhì)疏松模型豬骨蛋白高劑量組,按200mg/

2、kg每天灌胃給予豬骨蛋白:中劑量組,100mg/kg每天灌胃給予豬骨蛋白,低劑量組,按50mg/kg每天灌胃給予豬骨蛋白;陽性藥組,按300mg/kg每天灌胃給予接骨七厘片。除空白組外,其余各組肌肉注射地塞米松2.5mg/kg,每周兩次,連續(xù)注射6周造成骨質(zhì)疏松模型。連續(xù)給藥12周后,取血、尿用于測(cè)定血鈣(Ca)、磷(P)和堿性磷酸酶(ALP);放射性免疫法測(cè)定血清骨鈣素(BGP)的含量以及尿鈣(Ca)、尿磷(P)、尿肌酐(Cr)和尿羥

3、脯氨酸(HOP)的含量。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后取大鼠脛骨檢查骨密度。處死時(shí)留取脛骨制作脫鈣骨切片做骨組織形態(tài)計(jì)量學(xué)分析。(2)取Wistar大鼠60只,制成脛骨骨損傷模型,隨機(jī)分為6組:模型組,陽性組,高劑量組,中劑量組,低劑量組,每組均為20只大鼠。空白組每日灌胃給予10ml/kg蒸餾水,陽性組每日給予300mg/kg接骨七厘片,高劑量組每日給予200mg/kg豬骨蛋白,中劑量組每日給予100mg/kg豬骨蛋白,低劑量組每日給予50mg/kg豬骨

4、蛋白。連續(xù)給藥20d后,取一半大鼠脛骨進(jìn)行放射學(xué)觀察和骨痂組織學(xué)觀察,另一半大鼠繼續(xù)給藥,40d后,取剩余大鼠脛骨進(jìn)行放射學(xué)觀察和骨痂組織學(xué)觀察。本實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)利用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì),P<0.05表示統(tǒng)計(jì)學(xué)上差異有顯著性。
　　結(jié)果:(1)骨蛋白高、中和低劑量組血磷含量分別為:2.28±0.35 mmol/L,2.34±0.32 mmol/L和2.29±0.30 mmol/L,均比骨質(zhì)疏松模型組明顯降低(2.61±0.

5、23mmol/L)(P<0.05);堿性磷酸酶(ALP)含量分別為:94.50±19.79 U/L,102.1±23.96 U/L和110.1±23.53 U/L,均明顯比骨質(zhì)疏松模型組降低(137.9±23.99U/L)(P<0.05);血清骨鈣素含量分別為:1.69±0.27 ng/L,1.80±0.20 ng/L和1.73±0.17 ng/L,均比骨質(zhì)疏松模型組明顯降低(1.97±0.24 ng/L)(P<0.05);骨蛋白高、中

6、和低劑量組尿鈣(肌酐)和尿羥脯氨酸(肌酐)含量分別為:0.16±0.05 mmol/μmol/0.20±0.05μg/μmol,0.18±0.04 mmol/μmol/0.24±0.05μg/μmol和0.22±0.04 mmol/μmol/0.25±0.05μg/μmol,分別明顯低于模型組(0.27±0.08mmol/μmol/0.29±0.07μg/μmol)(P<0.05)。各組血鈣,尿磷/肌酐(P/Cr)均無顯著性改變。骨質(zhì)疏

7、松模型組大鼠脛骨骨密度值比模型組低(P<0.01);陽性對(duì)照組和骨蛋白三個(gè)劑量組骨密度值(0.150±0.015 g/cm~2,0.152±0.015 g/cm2和0.148±0.013 g/cm~2)均比模型組(0.136±0.012 g/cm2)高(P<0.05)。高劑量和中劑量的骨小梁厚度分別為:48.73±12.2μml,48.17±10.28μml,均比模型組(36.23±12.27μml)的大(P<0.05)。豬骨蛋白三個(gè)劑

8、量組的骨小梁面積百分比(30±8.98％,38.41±11.27%和40.59±9.88%)均均比模型組(29.57±7.19%)大(P<0.05)。組織形態(tài)學(xué)觀察表明,豬骨蛋白三個(gè)劑量給藥組大鼠的骨小梁結(jié)構(gòu)均明顯改善。(2)給藥20d后,放射學(xué)結(jié)果顯示:豬骨蛋白三個(gè)劑量組骨折線愈合比模型組快;組織學(xué)結(jié)果顯示:豬骨蛋白組的成骨細(xì)胞比模型組活躍且骨小梁生長的比較好。給藥40d后,放射學(xué)結(jié)果顯示:豬骨蛋白高、中劑量組的骨折線基本愈合,模型組