厚樸酚對變形鏈球菌生物膜致齲毒力因子作用的研究.pdf

1、目的：本實驗通過激光共聚焦顯微鏡(CLSM)觀察厚樸酚對體外變形鏈球菌生物膜的作用效果，并初步了解厚樸酚對變形鏈球菌生物膜的產(chǎn)酸、耐酸、胞外多糖形成及生物膜形成能力等相關致齲毒力因子的轉錄表達的影響，為進一步研究厚樸酚防齲的藥理作用機制奠定基礎。
　　方法:首先在蓋玻片上建立變形鏈球菌生物膜體外模型，經(jīng)不同藥物濃度作用后,分別加入吖啶橙/溴化乙錠（AO/EB）染色，在激光共聚焦顯微鏡觀察并進行紅綠熒光定量分析；根據(jù)GenBank基

2、因庫查詢ffh、gtfD、pdp等基因序列并設計引物,RT-PCR方法測定變形鏈球菌生物膜致齲毒力因子ffh、gtfD和pdp基因片段受不同藥物濃度作用后基因表達水平的變化。
　　結果：CLSM觀察厚樸酚作用于已形成的24h細菌生物膜后，實驗組綠色熒光面積隨著藥物濃度的增加而減少，與對照組相比各藥物濃度均明顯降低了細菌生物膜的生長活性,膜內活菌比例明顯下降；通過電泳凝膠成像系統(tǒng)檢測分析,在梯度藥物濃度作用并保證細菌模板量一致的情況