厚樸酚對變形鏈球菌生物膜致齲毒力因子作用的研究.pdf

1、目的：本實(shí)驗(yàn)通過激光共聚焦顯微鏡(CLSM)觀察厚樸酚對體外變形鏈球菌生物膜的作用效果，并初步了解厚樸酚對變形鏈球菌生物膜的產(chǎn)酸、耐酸、胞外多糖形成及生物膜形成能力等相關(guān)致齲毒力因子的轉(zhuǎn)錄表達(dá)的影響，為進(jìn)一步研究厚樸酚防齲的藥理作用機(jī)制奠定基礎(chǔ)。
　　方法:首先在蓋玻片上建立變形鏈球菌生物膜體外模型，經(jīng)不同藥物濃度作用后,分別加入吖啶橙/溴化乙錠（AO/EB）染色，在激光共聚焦顯微鏡觀察并進(jìn)行紅綠熒光定量分析；根據(jù)GenBank基

2、因庫查詢ffh、gtfD、pdp等基因序列并設(shè)計(jì)引物,RT-PCR方法測定變形鏈球菌生物膜致齲毒力因子ffh、gtfD和pdp基因片段受不同藥物濃度作用后基因表達(dá)水平的變化。
　　結(jié)果：CLSM觀察厚樸酚作用于已形成的24h細(xì)菌生物膜后，實(shí)驗(yàn)組綠色熒光面積隨著藥物濃度的增加而減少，與對照組相比各藥物濃度均明顯降低了細(xì)菌生物膜的生長活性,膜內(nèi)活菌比例明顯下降；通過電泳凝膠成像系統(tǒng)檢測分析,在梯度藥物濃度作用并保證細(xì)菌模板量一致的情況