南海紅樹(shù)內(nèi)生真菌#1403代謝產(chǎn)物1403-B抗腫瘤研究.pdf

1、目的：研究海洋微生物Haloroselhnia sp.(NO.1403)代謝產(chǎn)物1403-B的溶解貯存方法，檢測(cè)1403-B對(duì)多種腫瘤細(xì)胞的抑制作用，發(fā)現(xiàn)對(duì)1403-B作用敏感的腫瘤細(xì)胞株，初步探討海洋來(lái)源的醌類(lèi)藥物1403-B抗腫瘤的機(jī)制。
　　方法：在研究1403-B藥物溶解貯存方法的基礎(chǔ)上，用2.5μmol/L，5.0μmol/L，10μmol/L，20μmol/L和40μmol/L的1403-B分別處理三株鼻咽癌細(xì)胞(CN

2、E-2、5-8F、HONE-l)，兩株肝癌細(xì)胞(HepG2、Be17402)，肺癌細(xì)胞(A549)，前列腺癌細(xì)胞(PC3)，視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤(Rb)，胃癌細(xì)胞(SGC7901)和正常細(xì)胞人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)后MTT法檢測(cè)各細(xì)胞的存活狀態(tài);熒光顯微鏡觀察1403-B作用SGC7901后細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化，用流式細(xì)胞儀分析其凋亡情況，Westernblotting法檢測(cè)凋亡相關(guān)因子(Caspase-3)的切割。
　　結(jié)果：MTT結(jié)

3、果顯示1403-B的最佳溶解貯存方式為直接用溶劑DMSO配制50mmol/L貯存液，其對(duì)正常細(xì)胞HUVEC的半數(shù)抑制濃度(IC50)為22.64±0.62μmol/L，而對(duì)多種腫瘤細(xì)胞呈濃度依賴(lài)性抑制（P＜0.05），其中對(duì)胃癌細(xì)胞SGC7901的IC50最低，為4.12±0.57μmol/L。1403-B作用SGC7901細(xì)胞24h后，熒光顯微鏡下見(jiàn)細(xì)胞核皺縮，染色質(zhì)濃集，形成凋亡小體等凋亡現(xiàn)象且呈劑量依賴(lài)性增加。流式細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果表明