金花茶皂甙的分離純化及化學結構研究.pdf

1、金花茶(Camellia chrysantha(Hu)Tuyama)系山茶科、山茶屬、金花茶組植物,為常綠灌木或小喬木。研究表明,金花茶葉的水浸出物具有降血糖、降血脂、降低血清中膽固醇、抑制腫瘤生長、提高機體免疫能力等多種生理功能,推測這些功能與金花茶葉中的皂甙、多糖等活性成分有密切關系。但是對金花茶皂甙的構效關系尚未清楚,也未見有相關研究報道。本研究以金花茶葉為實驗材料提取其中的皂甙成分,然后篩選分離純化樹脂,對皂甙進行分離純化。通過

2、抗氧化指標比較皂甙組分的抗氧化活性,并對抗氧化活性最高的皂甙組分進行進一步的分離純化,分析其理化性質,為金花茶皂甙的構效關系研究提供理論依據。
　　 研究的主要內容及結果如下:
　　 1、以新鮮金花茶葉為原料,經過微波滅酶后進行組織破碎,采用超聲波浸提及納米超濾等方法進行提取和濃縮,得到金花茶濃縮液。金花茶濃縮液經過乙醇沉淀去雜、乙醚脫色得到粗皂甙提取液。試驗結果顯示金花茶粗皂甙提取液中主要含有皂甙并含有少量的茶多酚,皂

3、甙含量約為茶多酚的10倍。
　　 2、通過靜態(tài)吸附率和解吸率等指標比較了聚酰胺樹脂、XAD16、DM130和XAD1600等4種樹脂對金花茶粗皂甙分離的效果,并選擇XAD16作為分離樹脂對金花茶粗皂甙進行分離純化。分離純化結果:在水以及10％、20％和30％異丙醇洗脫液處分別得到了WS、IS1、IS2、IS3等4個皂甙組分。各皂甙組分的得率分別為34.8％、9.1％、20.3％、31.8％,皂甙總得率達96.0％。高效液相色譜分

4、析結果顯示,相對于粗皂甙,各皂甙組分的吸收峰數量明顯減少,表明XAD16大孔吸附樹脂層析柱可以有效將金花茶粗皂甙分離出極性不同的皂甙組分。
　　 3、以維生素C為參照物,通過羥基自由基清除試驗、超氧陰離子清除試驗、DPPH·自由基清除試驗、磷鉬絡合物法等4種不同的抗氧化試驗,比較了粗皂甙、WS、IS1、IS2、IS3等皂甙組分的抗氧化活性。結果顯示,各皂甙組分均有明顯的抗氧化活性,在清除羥基自由基實驗中,IS1的清除率為66.5

5、％,比維生素C及其他三個皂甙組分高；在DPPH·自由基清除試驗中,IS1的清除率為96.3％,接近同濃度維生素C的清除率100％；在清除超氧陰離子的實驗中,IS1的清除率達到64.7％,比皂甙組分IS2、IS3高；在磷鉬絡合物法實驗中,IS1的抗氧化活性比皂甙組分IS2、IS3高37.1％、39.8％,可以看出IS1的抗氧化活性較為顯著。
　　 4、通過XAD1600柱層析和聚酰胺柱層析對抗氧化活性最高的皂甙組分IS1進行進一步