一氧化氮模擬心肌預(yù)處理保護(hù)及其機(jī)制研究.pdf

1、該實(shí)驗(yàn)建立了心肌細(xì)胞缺氧預(yù)處理(HPC)模型,并對(duì)其早期和延遲保護(hù)作用的機(jī)制進(jìn)行了研究;在此基礎(chǔ)上,分別探討了NO供體SNAP模擬的心肌細(xì)胞預(yù)處理早期和延遲保護(hù)作用及其機(jī)制. 1.HPC的心肌細(xì)胞保護(hù)作用及其機(jī)制該實(shí)驗(yàn)在心肌細(xì)胞HPC模型基礎(chǔ)上,采用比色法檢測(cè)心肌細(xì)胞LDH活性和MTT法檢測(cè)細(xì)胞存活率,以觀察心肌細(xì)胞損傷程度;采用吖啶橙(AO)熒光染色法及流式細(xì)胞儀檢測(cè)心肌細(xì)胞凋亡;底物酶解法檢測(cè)caspase-3活性;免疫組織化學(xué)法結(jié)

2、合計(jì)算機(jī)圖象分析檢測(cè)心肌細(xì)胞Bcl-2蛋白的表達(dá).2.一氧化氮模擬HPC早期保護(hù)作用實(shí)驗(yàn)采用比色法觀察心肌細(xì)胞損傷程度;采用AO熒光染色、TUNEL法、Annexin V-FITC/PI雙標(biāo)記流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)心肌細(xì)胞凋亡;采用激光共聚焦顯微術(shù)觀察NO對(duì)細(xì)胞內(nèi)鈣的影響;采用比色法檢測(cè)心肌細(xì)胞SOD和MDA活性.3.一氧化氮模擬HPC延遲保護(hù)作用實(shí)驗(yàn)通過比色法檢測(cè)心肌細(xì)胞LDH活性和MTT法觀察細(xì)胞存活率,評(píng)價(jià)心肌細(xì)胞損傷程度;免疫組織化學(xué)法