大鼠耳蝸發(fā)育中SYN、VAMP-2的表達和ATP來源的研究.pdf

1、目的：突觸囊泡的包裝、儲存和神經(jīng)遞質(zhì)釋放與突觸素（SYN）和小泡相關(guān)膜蛋白-2（VAMP-2）有著重要關(guān)系。二者在耳蝸發(fā)育過程中起著重要作用。本實驗擬通過研究不同鼠齡大鼠耳蝸內(nèi)SYN、VAMP-2的差異表達，探討二者表達與聽覺功能發(fā)育成熟的關(guān)系。 方法：選取出生后1天(P1)、5天(P5)、10天(P10)、14天(P14)及28天(P28)健康Sprague－Dawley大鼠各5只，行耳蝸冰凍切片，運用免疫熒光的方法，觀察各組

2、間SYN、VAMP-2表達分布的差異。 結(jié)果：大鼠出生后，其耳蝸形態(tài)發(fā)育尚不成熟，P1和P5組大鼠耳蝸Kolliker器還未退化，耳蝸的Corti器、Kolliker器均未發(fā)現(xiàn)SYN表達。P10組耳蝸Corti器結(jié)構(gòu)基本成形，其頂周也未發(fā)現(xiàn)SYN表達，但在耳蝸底周和蝸管中部SYN的分布呈現(xiàn)特異性定位，內(nèi)螺旋束和外螺旋束出現(xiàn)了較弱的點狀表達。P14組耳蝸Corti器結(jié)構(gòu)形態(tài)接近成熟，底周至頂周蝸管的內(nèi)螺旋束和外螺旋束均出現(xiàn)簇狀表達

3、，較P10組強烈，且在Deiters細胞內(nèi)側(cè)緣出現(xiàn)點狀表達，從內(nèi)向外表達逐漸減弱。P28組中，SYN在內(nèi)螺旋束呈星點狀表達，在外螺旋束呈杯盞狀表達，在五組中表達最為強烈。隧道螺旋束與內(nèi)螺旋束相連處、內(nèi)側(cè)的Deiters細胞內(nèi)側(cè)緣也可見SYN的較弱表達。大鼠螺旋神經(jīng)元（SGN）在發(fā)育成熟過程中數(shù)目有所減少，各組神經(jīng)元胞漿內(nèi)均有SYN廣泛均勻表達，且隨鼠齡增長在胞漿中的表達逐漸增強。VAMP-2在P1、P5組和P10組頂周大鼠耳蝸Corti

4、器、Kolliker器中均未發(fā)現(xiàn)特異性表達。在P10組底周和蝸管中部、P14與P28組大鼠耳蝸中Corti器的表達部位與SYN基本一致。在P14和P28組內(nèi)毛細胞頂部的胞漿可見星點狀表達。各組SGN胞漿中均有VAMP-2廣泛均勻表達。 結(jié)論：SYN和VAMP-2與耳蝸神經(jīng)纖維的定位分布和神經(jīng)生物活動存在緊密聯(lián)系。二者在大鼠耳蝸發(fā)育過程中的表達存在差異，它們在不同鼠齡的表達變化與既往研究顯示的耳蝸神經(jīng)纖維發(fā)育過程基本一致。這種差異