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1、本文旨在研究維生素C(VC)對(duì)生長(zhǎng)中期草魚(yú)生產(chǎn)性能,腸道、機(jī)體和鰓健康以及肉質(zhì)的作用及作用機(jī)制。試驗(yàn)選取體重為264.37±0.66 g的中期草魚(yú)540尾,均分為6個(gè)處理,分別飼喂不同水平VC的飼糧(2.9、44.2、89.1、133.8、179.4和224.5mg VC/kg飼糧)10周,考察VC對(duì)中期草魚(yú)生產(chǎn)性能和肉質(zhì)的影響。10周生長(zhǎng)試驗(yàn)結(jié)束后,每個(gè)處理選30尾接近處理均重的魚(yú)均分為兩組,分別進(jìn)行14天的嗜水氣單胞菌攻毒試驗(yàn)和3天
2、的柱狀黃桿菌攻毒試驗(yàn),研究VC對(duì)魚(yú)類腸道、機(jī)體和鰓健康的作用及作用機(jī)制。
生長(zhǎng)試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn):適宜水平的VC(89.1 mg/kg)提高了中期草魚(yú)特異生長(zhǎng)率、增重百分比、采食量和飼料效率(P<0.05),提高了生產(chǎn)性能。同時(shí),適宜水平的VC還提高了中期草魚(yú)肌肉營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)(蛋白、脂肪、必需氨基酸、風(fēng)味氨基酸和多不飽和脂肪酸)含量、pH、剪切力和羥脯氨酸含量(P<0.05),降低了蒸煮損失、乳酸含量、組織蛋白酶B和L活力以及飽和脂肪酸
3、含量(P<0.05),提高了肌肉品質(zhì);肌肉品質(zhì)的提高可能與VC通過(guò)上調(diào)核因子相關(guān)因2(Nrf2)基因表達(dá)及下調(diào)錨定蛋白1a(Keap1a)和Keap1b基因表達(dá)(P<0.05),提高了銅鋅超氧化物歧化酶(CuZnSOD)等抗氧化酶的基因表達(dá)和活力(P<0.05),從而降低了ROS含量(P<0.05),降低了氧化損傷有關(guān)。攻毒試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn):適宜水平的VC(133.8 mg/kg)提高了抗病力(腸炎、赤皮和爛鰓)(P<0.05),抗病力的提
4、高與提高了腸道、機(jī)體和鰓健康有關(guān),這與其提高了腸道、頭腎、脾臟、皮膚和鰓的溶菌酶和酸性磷酸酶(皮膚除外)活力、補(bǔ)體C3和C4含量(P<0.05),上調(diào)了抗菌肽的基因表達(dá)(P<0.05),提高了抗菌能力;同時(shí),可能通過(guò)下調(diào)核轉(zhuǎn)錄因子κB p6(NF-κB p65)和雷帕霉素靶蛋白信號(hào)(P<0.05)(P<0.05),下調(diào)了主要促炎細(xì)胞因子腫瘤壞死因子α(前腸和鰓除外)、干擾素γ2、白介素1β(腸道除外)和IL-8基因表達(dá)(P<0.05),
5、上調(diào)了主要抗炎細(xì)胞因子IL-10和轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)(皮膚除外)基因表達(dá)(P<0.05),降低了炎癥反應(yīng),提高了免疫能力有關(guān)。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn),腸道、機(jī)體和鰓健康的提高與VC維持了腸道、頭腎、脾臟、皮膚和鰓結(jié)構(gòu)完整性有關(guān):(1)適宜水平的VC可能通過(guò)Nrf2信號(hào)上調(diào)了CuZnSOD等抗氧化酶的基因表達(dá)并提高了酶活力(P<0.05),提高了非酶抗氧化物質(zhì)還原型谷胱甘肽和VC含量(P<0.05),提高了自由基清除能力,降低了氧化
6、損傷;同時(shí),可能通過(guò)下調(diào)半胱天冬酶-3(caspase-3)、caspase-8和caspase-9基因表達(dá)(P<0.05),抑制了細(xì)胞凋亡,維持了細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整性;(2)VC可能通過(guò)下調(diào)肌球蛋白輕鏈激酶(MLCK)(脾臟除外)基因表達(dá)(P<0.05),上調(diào)了細(xì)胞間ZO-1、ZO-2和Claudin-b(鰓除外)等屏障功能蛋白基因表達(dá)(P<0.05),下調(diào)了頭腎和脾臟孔狀疏松蛋白Claudin-12/-15基因表達(dá)(P<0.05),維持了
7、細(xì)胞間結(jié)構(gòu)完整性。
綜上所述,VC能夠提高中期草魚(yú)的生產(chǎn)性能、肌肉品質(zhì)和抗病力。肌肉品質(zhì)的提高可能與VC通過(guò)Nrf2信號(hào)上調(diào)了CuZnSOD等抗氧化酶基因表達(dá)和活力從而降低了氧化損傷有關(guān)??共×Φ奶岣吲cVC提高了草魚(yú)腸道、機(jī)體和鰓健康有關(guān):(1)適宜水平的VC提高了草魚(yú)腸道、頭腎、脾臟和鰓抗菌物質(zhì)活力、含量和基因表達(dá),提高了抗菌能力,并通過(guò)上調(diào)主要抗炎細(xì)胞因子,下調(diào)主要促炎細(xì)胞因子及相關(guān)信號(hào)分子NF-κB p65等的基因表達(dá)降
8、低了炎癥反應(yīng),提高了魚(yú)類免疫能力;(2)VC可能通過(guò)Nrf2信號(hào)上調(diào)了CuZnSOD等抗氧化酶基因表達(dá)和活力從而降低了氧化損傷,并通過(guò)下調(diào)caspase-3等促凋亡蛋白基因表達(dá)抑制了細(xì)胞凋亡,維持了細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整性;同時(shí),可能通過(guò)調(diào)控MLCK信號(hào)調(diào)控了細(xì)胞間緊密連接蛋白基因表達(dá),維持了細(xì)胞間結(jié)構(gòu)完整性。以PWG和抗病力(腸炎、赤皮和爛鰓)為標(biāo)識(shí)確定中期草魚(yú)(264-1031g) VC的需要量分別為92.8、124.0、122.9和127.
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